糖尿病肾病患者血清胱抑素C与尿8-羟基脱氧鸟苷的变化及相关性

糖尿病肾病患者血清胱抑素C与尿8-羟基脱氧鸟苷的变化及相关性

徐美荣

(湖北科技学院附属第二医院，湖北 咸宁 437100)

摘要：目的 探讨糖尿病肾病患者血清胱抑素C(CysC)与尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的关系。方法 共选取研究对象50例，分为健康对照组15例，糖尿病肾病组35例。其中微量白蛋白尿组(20μg/min≤UAER<200μg/min)18例、大量蛋白尿组(UAER≥200μg/min)17例。收集和记录患者的一般资料(年龄、身高、体重、家族史等)，采用免疫比浊法测定血清CysC水平，酶联免疫吸附法测定尿8-OHdG，全自动生化仪测定血尿肌酐、血脂和空腹血糖(FPG)等生化指标，高压液相法测定糖化血红蛋白(HbA1c)，分析CysC与尿8-OHdG的相关关系。结果 与健康对照组相比，微量白蛋白尿组CysC、尿微量白蛋白排泄率(UAER)、尿8-OHdG显著升高，有统计学差异(P<0.05)；与微量白蛋白尿组相比，大量蛋白尿组CysC、UAER、尿8-OHdG显著升高，有统计学差异(P<0.05)；微量白蛋白尿组胱抑素C与尿8-OHdG呈正相关(P<0.05)；大量蛋白尿组胱抑素C与尿8-OHdG没有相关性。结论 尿8-OHdG和血清CysC水平可作为监测糖尿病肾病进程的指标。早期糖尿病肾病体内氧化应激的产生可能导致胱抑素C水平增加。

关键词：糖尿病肾病；胱抑素C；8-羟基脱氧鸟苷

中图分类号：R587.1

文献标识码：A

文章编号：2095-4646(2015)04-0284-03

ABSTRACT：Objective To investigate the relationship between serum Cys C and urine 8-OHdG. Methods 50 subjects were selected，15 controls and 35 diabetes.The general data(age，height，weight and family history)were collected.The levelof serum CysC was determined by immuno-turbidimetry.Urine 8-OHdG was detected by ELISA.Serum creatinine，uric creatinine，lipid and fast plasm glucose(FPG)were determined by automatic biochemical analazer.HbA1c was measured by HPLC.The relationship between serum Cys C and oxidative stress was analyzed.Results The levels of CysC、UAER and 8-OHdG in microalbuminuria group were significantly higher than those of control group，but lower than those of macroalbuminuria group(P<0.05).In microalbuminuria group serum CysC was positively correlated with Ccr，urinary albumin and MDA(P<0.05)，and was negatively correlated with 8-OHdG(P<0.05).In macroalbuminuria group serum CysC was not correlated with 8-OHdG.Conclusion The levels of Urine 8-OHdG and serum cysC can be used as predictors for monitoring the development of diabetic nephropathy.Oxidative stress state in patients with early-stage diabetic nephropathy may increase the level of Cysc.

收稿日期：(2015-01-24)

Study on the Relationship between Serum CysC and

Urine 8-OHdG in Diabetic Nephropathy

XU Mei-rong

(TheSecondAffiliatedHospitalofHubeiUniversityofScienceandTechnology，XianningHubei437100，China)

KEY WORDS：Diabetic nephropathy;CysC;8-OHdG

糖尿病肾病是糖尿病严重的慢性微血管并发症，也是糖尿病患者的主要死因之一，发病初期主要表现为微量白蛋白尿，若不及时控制易发展为终末期肾脏疾病需要透析治疗。因此，采用反映糖尿病肾病的敏感指标及时评价肾病严重程度具有重要的意义。胱抑素C(cystatinC，CysC)是反映肾小球滤过率变化的敏感内源性标记物，而氧化应激水平的升高与糖尿病肾病的发生发展密切相关[1]，因此本研究旨在分析CysC与氧化应激敏感指标尿8-OHdG的相关关系，明确其在糖尿病肾病病情评估中的意义。

1对象与方法

1.1研究对象健康对照组15例来自于我院体检中心的健康体检者，无糖尿病家族史，尿常规检查尿蛋白阴性。糖尿病组：选择2012年1月至2014年1月在我院内科住院的糖尿病肾病患者35例，根据24h UAER分为2组，其中微量白蛋白尿组(20μg/min≤UAER<200μg/min)18例，大量蛋白尿组(UAER≥200μg/min)17例。所有入选者年龄范围30～80岁，排除近期严重的心、肝、肾、脑及肺功能不全者、感染、出血、恶性肿瘤和其他内分泌疾病，无原发性肾病史，无糖皮质激素服用史。

1.2检测方法以上所有入选者均需隔夜空腹10h后采集静脉血，2h内常规分离出血清，采用颗粒增强散射免疫比浊法检测血清CysC水平，酶联免疫吸附法检测尿8-OHdG(试剂盒由北京利德曼生化技术有限公司提供)。8-OHdG结果用尿肌酐校正(即每毫克肌酐中8-OHdG含量)。全自动生化分析仪测定血尿肌酐、血脂、空腹血糖等生化指标；高压液相法测定糖化血红蛋白(HbA1c)；留取晨尿10ml，取上清液检测UAER(试剂由罗氏诊断有限公司提供的多功能试纸条)。同时记录入选者的年龄、性别、身高、体重及家族史等一般资料。

2结果

2.1两组一般资料比较两组间年龄(平均44.63±7.24)岁、血压[平均(133.52±1.41)mmHg]及BMI[(22.16±1.28)kg/m2]无统计学差异(P>0.05)。血脂水平(T-ch、TG、HDL-C、LDL-C)两组相比，均有显著性差异(P均<0.05)，见表1。

2.2CysC水平、UAER与尿8-OHdG比较CysC水平与尿8-OHdG在糖尿病肾病组明显增高，与对照组比较有统计学差异(P均<0.05)，与微量白蛋白尿组相比，大量蛋白尿组CysC、UAER与尿8-OHdG显著升高，有统计学差异(P均<0.05)。见表1。

表1　各组间变量比较( ± s)

表1　各组间变量比较( ± s)

变量对照组(15例)糖尿病肾病微量白蛋白尿组(18例)大量蛋白尿组(17例)FPG(mmol/L)4.41±0.349.44±1.90*9.98±1.97*HbA1c(%)5.06±0.188.31±1.63*8.58±1.71*T-ch(mmol/L)5.08±0.545.98±0.54*6.22±0.56*TG(mmol/L)1.39±0.452.99±0.65*2.96±0.84*HDL-C(mmol/L)1.21±0.350.71±0.34*0.69±0.42*LDL-C(mmol/L)2.23±0.613.68±1.01*3.98±1.24*Ccr(ml/min)124.25±0.5774.53±0.38*52.36±0.41*△UAER(μg/min)6.05±0.34166.56±1.38*248.95±1.47*△8-OHdG(ng/mgCr)7.21±1.1613.76±4.29*23.61±6.78*△CysC(mg/L)0.20±0.048.04±0.21*10.18±0.74*△

与对照组相比，*P<0.05；与微量白蛋白尿组相比，△P<0.05

注：Ccr(ml/min)=[24h尿Cr(mg/dl)×24h尿量(ml)]/[血Cr(mg/dl)×24×60]

2.3Spearman相关性分析Spearman相关分析结果显示：微量白蛋白尿组CysC与尿8-OHdG呈正相关(r=0.6435，P<0.05)。大量蛋白尿组CysC与尿8-OHdG没有相关性(r=0.1423，P>0.05)。

3讨论

血清CysC完全由肾小球滤过，并且十分稳定，因此可作为反映肾小球滤过率的理想内源性指标[2]。既往研究表明[3]，在糖尿病微量白蛋白尿患者中，CysC的敏感性和准确性较血肌酐和尿素氮更高，这在糖尿病肾病研究中极有价值。本研究显示糖尿病肾病组随着蛋白尿排泄的增加CysC水平亦逐渐升高，说明CysC可较为敏感地判断肾功能，有助于判断糖尿病早期肾损害。结果与Ogawa Y等的研究一致[4]。

氧化应激在糖尿病的发病过程中作为一原发且独立的参与因素，其水平的升高与糖尿病微血管并发症密切相关[5]。高血糖诱导糖尿病患者发生氧化应激，而肾脏是氧自由基产生的主要部位。氧自由基产生增多，通过直接破坏蛋白质、脂肪和糖类并活化炎症细胞、启动凋亡机制等损伤肾脏，同时激活多种细胞内信号转导系统，表达相应的活性产物，使细胞外基质增多，促进糖尿病肾病的发生发展。8-OHdG是DNA氧化损伤的特异性生物标志物，血、尿8-OHdG的水平是目前国际上公认的评价机体氧化应激状态的新型可靠指标。研究认为监测8-OHdG水平的变化可作为评价糖尿病肾病病变程度的独立因素。Pan HZ等的研究结果表明糖尿病肾病患者血清中8-OHdG含量较单纯糖尿病患者有显著增加[6]。Lee SH等发现糖尿病肾病患者尿8-OHdG的含量明显高于正常白蛋白尿组[7]。本研究显示微量和大量蛋白尿组较对照组相比，尿8-OHdG水平随着糖尿病肾病的病程进展逐渐升高，证实了肾脏局部氧化和抗氧化平衡状态被破坏可能在糖尿病肾病的发生、发展中起着重要作用。

但目前CysC与氧化应激指标之间的相关关系少有研究。我们的相关分析结果显示，微量蛋白尿组CysC与尿8-OHdG的水平呈正相关，说明糖尿病肾病早期氧化应激的产生可能导致胱抑素C水平增加，亦有可能胱抑素C与氧化应激互为因果。我们分析CysC与氧化应激指标的相关性可能是多种因素综合作用的结果。高氧化应激状态可以导致血清同型半胱氨酸的增加，Cys C 作为一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，伴随同型半胱氨酸的增高而增高。另外氧化应激过程中反应氧产物ROS增加胞质内钙离子浓度，并增加许多缩血管活性物质血栓素A2(TxA2)，内皮素1(ETl)，腺苷、前列腺素2α等的产生，降低扩血管物质如内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的产生[8]；ROS还可增加肾小球入球动脉和出球动脉阻力，且入球>出球，因而降低了肾小球超滤系数；并且氧化应激是血管内皮损伤的核心因素[9]，可增加内皮细胞的促凝能力，导致肾毛细血管微血栓的形成，血流调节受损等等。本研究结果发现在大量蛋白尿组，CysC水平与尿8-OHdG变化没有相关性，我们分析产生上述现象的原因可能是当患者出现大量蛋白尿时，已是糖尿病肾病晚期，肾组织已严重受损，损害肾脏的因素不仅仅和氧化应激有关，还和肾脏固有细胞凋亡、表型转化、纤维化等多种机制有关。

总之，本研究结果发现，在糖尿病肾病微量白蛋白期CysC水平与氧化应激指标水平具有明显相关性，提示早期抗氧化治疗可能改善肾小球滤过功能，延缓糖尿病肾病进展。但是抗氧化治疗是否确切改善肾小球滤过功能还需要进一步研究，CysC和氧化应激相关性的具体机制也有待进一步研究。

参考文献：

[1]Giacco F，Brownlee M.Oxidative stress and diabetic complications[J].Circulation Research，2010，107(9)：1058

[2]朱雪明，单卫民，张国平.乳胶增强散射免疫比浊法测定血清Cystatin C[J].临床输血与检验，2002，3(3)：29

[3]Viberti GC，Hill RD，Jarrett RJ，et al.Microalbuminuria as a predictor of clinical nephropathy in insulin-dependent diabetes mellitus[J].Lancet，1982，1(8287)：1430

[4]Ogawa Y，Goto T．Serum cystatin C in diabetic patients not only an indicator for renal dysfunction in patients with overt nephropathy but also a predictor for cardiovascular events in patients without nephropathy[J]．Diabetes Res Clin Pract，2008，79(2)：357

[5]Singh DK，Winocour P，Farrington K.Oxidative stress in early diabetic nephropathy：fueling the fire[J].Nature Reviews Endocrinology，2011，7(3)：176

[6]Pan HZ，Zhang L，Guo MY，et al.The oxidative stress status in diabetes mellitus and diabetic nephropathy[J].Acta Diabetologica，2010，47(1)：71

[7]Lee SH，Nam BY，Kang EW，et al.Effects of an oral adsorbent on oxidative stress and fibronectin expression in experimental diabetic nephropathy[J].Nephrol Dial Transplant，2010，25(7)：2134

[8]Förstermann U.Nitric oxide and oxidative stress in vascular disease[J].Pflügers Archiv-European Journal of Physiology，2010，459(6)：923

[9]Agarwal R.Smoking，oxidative stress and inflammation：impact on resting energy expenditure in diabetic nephropathy[J].BMC Nephrol，2005，22(6)：13