阴道炎五联检联合10%KOH湿片法在诊断念珠菌性阴道炎的应用研究

姜蕾

【摘要】 目的 探讨运用阴道炎五联检联合10% KOH湿片法检测念珠菌性阴道炎， 提高念珠菌性阴道炎的检出率， 为临床诊断治疗提供依据。方法 522例妇科门诊患者的阴道分泌物用阴道炎五联检卡检测， 同时联合应用五联检卡和10% KOH对其进行检测， 并将522例患者的阴道分泌物分别接种至念珠菌显色培养基培养， 评价阴道炎五联检联合10% KOH湿片法在检测念珠性阴道炎中应用价值。结果 联合检测法较阴道炎五联检法检测阳性率更高， 差异有统计学意义（P<0.05）。结论 在念珠球菌阴道炎诊断中， 五联检与10% KOH湿片法的联合应用阳性率较高， 有利于念珠菌性阴道炎的准确快速诊断。

【关键词】 阴道炎五联检；KOH湿片法；念珠菌性阴道炎

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.02.045

阴道炎五联检为阴道分泌物的检验提供了一种新的理论和方法， 其优越性国内已有多篇文献报道。经过本科室近1年的使用， 发现五联检试剂在判定阴道微生态菌群、白细胞数量以及湿片镜检符合率较高， 在判定细菌性阴道病方面较为快速准确， 但阴道炎五联检法受方法学所限制， 只能检测出白色念珠菌和热带念珠菌， 易造成临床上的误诊误治。为了弥补阴道炎五联检在检测念珠性阴道炎方面的不足之处， 本研究旨在研究联合阴道炎五联检和10%KOH湿片在诊断念珠菌性阴道炎中临床意义。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 2013年4月～2014年5月本院妇科门诊患者， 年龄16～65岁。

1. 2 试剂与方法 阴道炎五联检试剂盒购自江苏硕世生物科技有限公司；10% KOH用蒸馏水配置；科玛嘉显色培养基购自郑州博赛生物技术股份有限公司。每份标本同时用五联检试剂盒检测和10% KOH湿片镜检， 并接种至念珠菌显色培养基培养， 以念珠菌显色培养基培养结果为标准。五联检试剂盒严格按照说明书操作；10% KOH湿片法为1滴10% KOH加1滴用五联检稀释液处理过的分泌物混匀后观察20个高倍镜视野；念珠菌显色培养基法为接种经五联检稀释液处理过的分泌物1滴， 然后于35℃培养24～48 h后观察。

1. 3 结果判定标准 五联检试剂盒检测结果的判断按说明书进行；10% KOH湿片法以高倍镜下见到孢子、芽生孢子或管状假菌丝为阳性， 反之为阴性；念珠菌显色培养基通过对24～48 h生长的菌落的颜色可判断出白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和光滑念珠菌， 而其他念珠菌为白色， 用API-20C AUX鉴定试剂盒鉴定。

1. 4 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 522例阴道分泌物中共培养出念珠菌172株， 分别为白色念珠菌108株（62.8%）， 热带念珠菌20株（11.6%）， 光滑念珠菌16株（9.3%）， 克柔念珠菌12株（7.0%）， 近平滑念珠菌8株（4.7%）， 都柏林念珠菌3株（1.7%）， 葡萄牙念珠菌2株（1.2%）， 季也蒙念珠菌2株（1.2%）， 乳酒念珠菌1株（0.6%）。

2. 2 522例阴道分泌物中， 五联检法的阳性率为24.9%（130/522）， 联合检测法的阳性率为32.0%（167/522）。联合检测法与念珠菌显色培养法符合率为97.1%， 差异无统计学意义（χ2=6.44， P>0.05）。

3 讨论

念珠菌性阴道炎是阴道感染疾病中最常见疾病之一， 患者主要临床表现是外阴瘙痒、分泌物增多或异常， 是影响女性健康的世界性问题。白色念珠菌被认为是引起感染的主要真菌菌种。湿片法镜检念珠菌存在背景差、灵敏度低、对操作者经验要求高等缺点， 分离培养法虽然准确度、阳性率高， 但其诊断周期长， 不利于快速诊断。

从显色培养基培养的结果看， 白色念珠菌检出率占62.8%， 热带念珠菌占 11.6%， 而其他念珠菌占25.6%。阴道炎五联检是依据乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）及pH<4.6来判定念珠菌性阴道炎。而NAG是白色念珠菌、热带念珠菌的特异性酶， 同时也是滴虫特异性酶[1]， 另外不可避免的会存在不合格标本及NAG靠肉眼判断， 个人主观性较强等原因， 阴道炎五联检在念珠菌性阴道炎判定上易造成假阳性及假阴性。过高的假阳性及假阴性会给临床的诊断和治疗带来困扰， 尤其是势必会被漏检的有些菌种对某些药物天然耐药， 如葡萄牙念珠菌对两性霉素B、克柔念珠菌对氟康唑天然耐药， 光滑念珠菌对氟康唑有剂量的依赖性， 往往需增加70%剂量临床上才有疗效， 这些菌种的检出及准确鉴定对抗真菌药物的选择具有重要的价值。

盐水湿片法操作简便、快速， 但灵敏度比较低， Sobel认为是40%～60%[2]。10% KOH湿片法操作简便、快速， KOH可以改善背景， 并使孢子和假菌丝更容易观察。本研究的10% KOH法为观察20个高倍镜视野， 比程向方等[3]报道的高倍镜下观察10个视野多了一倍， 其报道的10% KOH法的检出率为60.25%， 国内大多数学者认为阳性率可达70%～80%。本研究利用五联检法与10% KOH法对收集的患者标本进行联合检测， 对于诊断过程中出现检测结果不一致的标本， 经谨慎详细研究得出最终诊断， 研究发现联合法较五联检法检出率较好， 且与培养法符合率较高。

综上所述， 为了更好的满足临床的需求， 提高念珠菌阴道炎检测的敏感度和特异性， 阴道炎五联检应与10%KOH湿片法联合开展。

参考文献

[1] 饶荣， 冯申亮.五联检检测3988例阴道分泌物结果分析.中国微生态学杂志， 2011， 23（2）：173-174.

[2] Sobel JD. Vaginitis. N Engl J Med， 1997， 337（26）：1896-1903.

[3] 程向方， 王雷.阴道念珠菌4种常用检验方法的比较及应用.中国实验诊断学， 2011， 15（8）：1390-1391.

[收稿日期：2015-09-01]