重组禽流感H5N1灭活疫苗对肉鸡的免疫效果分析

李再友，程顺财，范吉平

（1.四川省荣县古文镇畜牧兽医站，四川 荣县 643107；2.四川省荣县过水镇畜牧兽医站，四川 荣县 643107）

近年来，高致病性禽流感对我国禽类养殖业造成了巨大的损失，也对人类健康造成了极大的威胁。因此，我国已将其列入I类烈性传染病。免疫接种是当前防控该疫病的有效措施。禽流感病毒（AIV）是该病主要的致病原，属正粘病毒科，流感病毒属[1]。随着AIV的不断变异，现已形成了160多种亚型，目前还尚未找到有效的预防性免疫接种办法来显著降低禽流感的病死率。因此，本研究用H5N1 Re-1株与rL-H5株进行免疫试验，观察H5N1 Re-1株的免疫效果，以期为养殖生产提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物 从同一肉鸡场中选择300只肉鸡进行试验，肉鸡品种与批次均相同。

1.2 疫苗 本次试验所用的重组禽流感灭活疫苗（H5N1 Re-1株）由辽宁一公司生产，禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）由广东肇庆公司生产。

1.3 试验方法 将肉鸡随机分为A、B、C三组（100只/组），从每组选取 20只，分别在 1、5、10日龄检测母源抗体水平。然后分别作如下处理：

A组：10日龄接种重组禽流感灭活疫苗（Re-1株），随后在 10、20、25、30、45、55、65 日龄随机选择 20 只检测抗体水平；B组：10日龄时接种禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5 株），随后在 10、20、25、30、45、55、65日龄随机选择20只检测抗体水平；C组：不接种上述疫苗，作为空白对照。

1.4 HI抗体效价检测 根据《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936-2003）中关于血凝抑制试验（HI）评价禽类HI抗体水平的相关规定操作。运用t检验对所得数据进行统计分析。

2 结果

三组母源抗体平均水平与接种疫苗后的抗体水平见表1。

表1 三组母源抗体与免疫后抗体的平均水平 log2

三组肉鸡在1、5、10日龄时的母源抗体水平基本一致，直到20日龄母源抗体降至0。试验A组在10日龄免疫，15d后生效（即25日龄），随后抗体水平慢慢升高，45日龄时达到最大值8.0log2，高抗体滴度持续20d左右，随后慢慢降低。A组两月龄肉鸡的抗体水平约为4log2。

B组也在10日龄免疫，疫苗为rL-H5株，15d后开始生效，随后抗体水平慢慢升高，35 d（即45日龄）后达到最大值7.2log2，高抗体滴度保持15 d左右，然后慢慢降低。B组两月龄肉鸡的抗体水平约为4log2。

3 讨论

禽流感是由AIV造成的一种高致病性禽类传染病，具有极大的危害性。目前，世界动物卫生组织（OIE）已将其划入A类动物疫病，我国也将其作为I类动物疫病[2]。根据病毒表面糖蛋白血凝素蛋白（HA）与神经氨基酸酶(NA)的抗原组合，可将禽流感病毒分为多种亚型：H有16种，分别为H1～H16；N有10种，分别是N1～N10。二者组合在一起可形成160种亚型。根据临床研究发现，最常见的禽流感病毒是H5N1与H9N2两个亚型[3]。由于该病毒具有变异性的特点，目前尚未找到一种切实可行的防控措施来减小禽流感的危害。尽管经过多年的研究与实践，已研制出多种疫苗，但不同厂家生产的疫苗，其效果参差不齐。因此，为了更好地防控禽流感，笔者开展了本次试验。

试验结果显示，1日龄肉鸡体内的母源抗体处于较高水平，但随着日龄增加，抗体逐渐减少，直到20日龄时母源抗体降为0。由于10日龄时母源抗体水平在4 log2以下（4log2是农业部要求的有效抗体滴度），因此，笔者将10日龄作为首免时间。禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）包括很多疫苗成分，可极大地节约疫苗成本与劳力成本，还能减少免疫应激。但就免疫效果来说，该疫苗效果远低于重组禽流感灭活疫苗（Re-1株）。本次研究结果证实，重组禽流感H5N1灭活疫苗的免疫原性良好，肉鸡在免疫35 d后抗体水平达到最大值，同时，也未发现明显的不良反应。因此，笔者建议在家禽养殖生产中选择重组禽流感病毒灭活疫苗进行预防接种。另外，为刺激机体生成相关抗体或使抗体保持在有效范围内，应在恰当的时机进行加强免疫，以巩固免疫效果。可定期检测养鸡场内的禽流感抗体平均水平，以确定最佳免疫时机。由于疫苗生产厂家不同，同一疫苗的免疫效果也有一定的差异，因此，免疫流程应严格按照各厂家的疫苗说明书进行，不能一成不变。

[1] 孙建宏，刘景利，胡井雷，等.重组禽流感灭活苗和禽流感灭活苗对鸡免疫效果的观察[J].动物医学进展，2006，27（11）：80-83.

[2] 许崇现，蔡联喜，李国进，等.重组禽流感灭活疫苗(（H5N1，Re-1株）免疫效果比较试验[J].中国畜牧兽医，2008，35（2）：96-97.

[3] 陈建祥，袁金钱，孙勇艇，等.重组禽流感病毒H5亚型二价灭活苗（H5Nl，Re-5株+Re-4株）的免疫效果评价[J].浙江畜牧兽医，2009，13（5）：3-4.