手工克隆公猪繁殖性能跟踪

夏代刚，郑 华，蒙小云，石 伟，李 青

（深圳市农牧实业有限公司，广东 深圳 518023）

手工克隆公猪繁殖性能跟踪

夏代刚，郑 华*，蒙小云，石 伟，李 青

（深圳市农牧实业有限公司，广东 深圳 518023）

对3头克隆公猪的精液指标和配种效果进行了跟踪，并与同期普通公猪进行了对比，结果表明，克隆公猪的采精量、精子活力和精子畸形率与普通公猪差异不显著（P＞0.05），但精子密度极显著低于普通公猪（P＜0.01）；克隆公猪能达到85%的配种受胎率和81.67%的配种分娩率，已能达到正常集约化养猪需要的标准；克隆公猪所配母猪的窝均总仔、窝均活仔均显著低于普通公猪所配母猪（0.01＜P＜0.05），分别为11.14头和9.94头，其窝均畸形数则显著高于普通公猪（0.01＜P＜0.05），窝均死胎、窝均木乃伊和窝均弱仔数则差异不显著（P＞0.05）。克隆公猪完全可以用于扩大优秀种公猪群体并应用于集约化养猪生产。

克隆；生长；性能测定；猪

克隆技术使遗传优良的种猪快速扩繁成为了可能，但目前猪的克隆成功率低[1]，且成本高，所以克隆种公猪的经济价值更大，毕竟可以一公配多母。克隆的最终目的是为了产业化应用，那么我们生产克隆种公猪的目的是为了利用其采精配种，但克隆公猪的繁殖力正常吗？能否像普通公猪一样利用？目前这方面的研究尚处于起步阶段。Shibata M等（2006）[2]研究了金华克隆猪的生长性能和繁殖性能，马青艳等（2009）[3]对克隆的巴马小型猪繁殖性能进行了观察，逯心玉等（2012）[4]研究了克隆的大白猪的繁殖性能。

1  材料与方法

1.1 试验动物

选用深圳市农牧实业有限公司遗传指数高、生产性能好的杜洛克公猪作为供体，采用手工克隆技术建系和生产克隆胚胎。分别用手术法和内窥镜法胚胎移植，结果分娩9窝45头活仔，饲养到成年仅剩3头。本研究就以这3头克隆杜洛克公猪为研究对象，与同期的普通杜洛克公猪对比精液品质和配种性能。配种的180头母猪为同一公司发情正常的2～6胎普通二元杂母猪。

1.2 试验动物的饲养管理

按深圳市农牧实业有限公司饲养管理规程饲养，饲喂公司自己生产的全价配合料，自由采食，自由饮水。免疫和保健程序、卫生和消毒程序等均严格按公司已有的程序执行。

1.3 试验仪器

显微镜、磁力搅拌器、水浴锅、恒温冰箱、干燥箱、恒温板、电子称、血细胞计数板、精液稀释粉(丹麦) 、采精杯、温度计、滤纸、输精瓶、无菌袋、烧杯、蒸馏水、计数器、输精管。

表1 克隆公猪与普通公猪精液品质对比（平均数±标准误）

表2 克隆公猪与普通公猪情期配种受胎率、配种分娩头数对比

表3 克隆公猪与普通公猪配种后母猪产仔情况对比（平均数±标准误）

1.4 试验方法

1.4.1 精液采集

达到8月龄后开始进行人工采精调教，采精频率为每周1次，采精2～3次每次射精量基本稳定后正式进行试验。采精频率为每周1次，每头公猪收集5次采精数据，并计算其平均值为此头公猪的精液品质数据。

1.4.2 精液品质检查指标

记录每次采精的精液量、精子密度、精子活力、精子畸形率。

1.4.3 精液品质指标检查方法

人工采集的原精液经过滤后，用电子秤称量精液质量，再按1 g折算为1 mL的计算方法统计公猪射精量；原精初步镜检，用稀释液进行2～4倍的稀释，然后在400 相差显微镜下利用血细胞计数法进行检测，检测指标主要有：精子密度、精子活力（按1分制进行评分）、精子畸形率。

1.4.4 种公猪的繁殖性能跟踪

采集3头克隆公猪和3头普通公猪精液，按人工授精操作规程每头公猪配20头发情母猪，每头母猪情期输精3次，配种28 d时B超查孕，分娩时记录产仔情况，记录指标包括窝产总仔数、活仔数、死胎数、畸形数、弱仔数、木乃伊数。

1.5 数据分析处理

试验数据用SAS软件(V8.02)的Means过程计算平均数和标准误，应用GLM过程进行差异显著性检验。

2  结果与分析

2.1 克隆公猪与普通公猪精液品质对比

具体见表1。可以看出，克隆公猪的采精量、精子活力和精子畸形率与普通公猪差异不显著（P＞0.05），但精子密度极显著低于普通公猪（P＜0.01），每mL精液只有1.87亿精子。

2.2 克隆公猪与普通公猪配种产仔情况对比

表2列出了克隆公猪与普通公猪的配种效果对比，克隆公猪能达到85%的配种受胎率和81.67%的配种分娩率，虽然略低于同期普通公猪的配种水平，但已能达到正常集约化养猪需要的标准。

从配种后母猪产仔情况来看（表3），克隆公猪所配母猪的窝均总仔、窝均活仔均显著低于普通公猪所配母猪（0.01＜P＜0.05），分别为11.14头和9.94头，其窝均畸形数则显著高于普通公猪（0.01＜P＜0.05），窝均死胎、窝均木乃伊和窝均弱仔数则差异不显著（P＞0.05）。

3  讨论

1)克隆公猪所配60头母猪平均胎次（3.82±0.18）胎，普通公猪所配60头母猪平均胎次（3.85±0.18）胎，经差异显著性检验，两者差异不显著（P＞0.05），剔除了母猪胎次对试验结果的影响。

2)本研究发现克隆公猪精液的精子密度极显著低于普通公猪（P＜0.01），其余精液指标差异不显著（P＞0.05），与逯心玉等（2012）[4]的研究结果不一致，他们认为克隆公猪的精子密度和活力都高于供核公猪，畸形率显著低于供核公猪。这种不一致可能源于与克隆公猪对照的对象差异，本研究选用同期年龄相近的普通公猪，而逯心玉等（2012）[4]的研究中选用了供核公猪。供核公猪从采样克隆到克隆产物成年采精，二者年龄相差至少1年时间；如果供核公猪是成年时采样，则相差2年时间，年轻公猪与老公猪精液品质对比很有可能占优势。

3)本研究中，克隆公猪所配母猪的窝均总仔、窝均活仔均显著低于普通公猪所配母猪（0.01＜P＜0.05），这与逯心玉等（2012）[4]认为无显著差异又不一致，其原因可能仍然是源于对照公猪的年龄差异。

4)通过研究，我们发现克隆公猪在繁殖性能方面虽然略低于普通公猪，但其各项繁殖指标已达到了集约化生产的要求，说明克隆公猪完全可以用于扩大优秀种公猪群体并应用于生产，克隆猪产业应用具有广阔前景。

[1] Nanassy L， Lee K， Javor A， et al. Effects of activation methods and culture conditions on development of parthenogenetic porcine embryos [J]. Anim Reprod Sci， 2008， 104(2-4)：264-274.

[2] Shibata M， Otake M， Tsuchiya S，et al. Reproductive and growth performance in Jinhua pigs cloned from somatic cell nuclei and the meat quality of their offspring [J]. J Reprod Develop， 2006， 52：583-590.

[3] 马青艳，陆维和，张彩珠，等.广西小型克隆猪繁殖性能和生长发育情况观察[J].中国畜禽种业，2009，11：55-56.

[4] 逯心玉，刘彪，胡魁，等. 克隆种公猪生长状况和繁殖性能评价[J]. 畜牧与兽医，2012，44（7 ）：6-9.

2014-11-05)

深圳市科技计划项目（编号：JSA200904011807A）

*通讯作者：郑华（1973—），男，高级畜牧师，主要从事猪的育种、生产和经营管理。