脑血管疾病患者血小板的活化状态变化分析

吕 朴 黄一宁

北京大学第一医院神经内科 北京 100191

脑血管疾病患者血小板的活化状态变化分析

吕 朴 黄一宁

北京大学第一医院神经内科 北京 100191

目的 探讨脑血管疾病患者血小板的活化状态变化的临床意义。方法 随机选择90例脑血管疾病患者，其中脑梗死（脑梗死组）和高血压（高血压组）患者各45例，并选择30例健康者为对照组。利用流式细胞仪检测所有研究对象的血小板活化状态，并进行比较。结果 脑梗死组和高血压组的血小板表面膜糖蛋白CD41、CD61较对照组差异无统计学意义（均P＞0.05）；但较健康对照组，血小板表面膜糖蛋白CD62p、CD63均出现显著上升的情况，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论 脑血管疾病患者的血小板活化状态显著增强，临床对血小板表面膜糖蛋白的检测具有重要意义。

脑血管疾病；血小板；活化状态；变化

脑血管疾病是一类常见疾病，对人体的危害极大［1］。研究发现，血小板的活化状态与脑血管疾病之间存在一定的联系［2］。笔者从本院2013-09—2014-09收治的脑血管疾病患者中随机选择90例进行研究，探讨脑血管疾病患者血小板的活化状态变化的临床意义。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2013-09—2014-09收治的脑血管疾病患者90例，男51例，女39例；年龄59～81岁，平均（64.1±2.3）岁。脑梗死（脑梗死组）和高血压（高血压组）患者各45例，并从同期在本院接受健康体检群体中随机选择30例作为健康对照组。3组一般资料差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性。研究方案获医院伦理委员会批准。

1.2 方法 所有研究对象采集空腹静脉血3mL送检，使用美国guave6HT流式细胞仪（武汉科力瓦贸易有限公司）利用全血法检测所有研究对象的血小板活化状态，从采血到检测要在3h内完成，所使用的抗体和磷酸盐缓冲液（PBS）均购自上海瑞齐生物技术有限公司。检测项目包括血小板表面膜糖蛋白CD41、CD61、CD62p、CD63。检测方法：取试管1（阴性对照）和试管2（检测管），均加入5mL抗凝全血和PBS200mL，试管1中加入适量的CD42b-FITC和阴性对照抗体（对应于CD62-PE或CD63-PE），试管2中加入适量的CD42b-FITC和CD63-PE或者CD62-PE抗体。室温下置于避光除进行25min孵育后，加PBS2mL，上机进行检测。

1.3 统计学处理 所有数据采用SPSS 16.0软件统一处理。计量资料以±s表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

脑梗死组和高血压组患者的血小板表面膜糖蛋白CD41、CD61较健康对照组差异无统计学意义（均P＞0.05）；但血小板表面膜糖蛋白CD62p、CD63均显著上升，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表1。

表1 脑血管患者与健康者血小板活化状态比较（±s，％）

表1 脑血管患者与健康者血小板活化状态比较（±s，％）

注：与健康对照组比较，＊P＜0.05

组别 n CD41 CD61 CD62p CD63脑梗死组 30 95.72±1.53＊98.25±1.91＊10.25±6.03 5.76±6.55高血压组 30 93.29±3.89＊96.05±3.12＊20.33±12.61 6.75±8.13健康对照组 30 94.12±5.13 93.87±5.68 4.03±2.36 1.65±1.69

3 讨论

在正常状态下，血管内部血液中的血小板为分散的静息状态［3］。一旦出现各种病理改变，如外来化学物质的刺激和血流变化以及血管损伤等，便会导致血小板活化状态的改变。血小板活化状态的变化有可能会导致多种疾病的发生，如糖尿病和各种心脑血管疾病等。血小板活化包括多方面的内容，如血小板成分的释放和血小板聚集及血小板形态变化等。血小板表面含有大量的膜糖蛋白，包括颗粒膜糖蛋白和质膜糖蛋白，如CD41和CD61、CD63等［4］。研究发现［5］，血小板会通过其表面糖蛋白参与到血栓的形成过程之中。在正常状态下，血小板的CD63会保持静息状态，但如果受到一定的刺激，CD62p、CD63会发生表达，形成活化血小板，其聚集和黏附能力等也会随之显著增强。因此，对膜糖蛋白的检测在脑血栓疾病的诊疗和预后等方面都具有十分重要的临床意义。研究发现［6］，血小板活化在脑梗死的发病过程中起重要作用，高血压能促进体内血小板活化和表达。血小板膜糖蛋白GMP-140、PAC-1表达与血小板参数PLT、MPV密切相关，均可以作为血小板活化的指标。血小板活化的时候颗粒膜蛋白与血小板膜蛋白发生融合作用，导致颗粒膜蛋白翻转到血小板膜表面［7］。因此，临床对血小板活化状态进行检测时可以使用流式细胞仪进行多参数分析，检测这些颗粒膜蛋白，对血小板表面予以标记，了解相关信息，判断血小板的活化状态［8-9］。本文结果显示，脑梗死组和高血压组以及冠心病组患者的血小板表面膜糖蛋白CD41、CD61较健康对照组差异无统计学意义，分析原因为血小板活化的时候CD41-CD61复合物作为纤维蛋白受体虽然会出现一定的改变，但CD41或CD61的总数却不会发生变化。因此，血小板CD41、CD61蛋白可以作为血小板特异性膜抗原用来进行血小板群鉴别，以更好的排除流式细胞仪分析过程中其他因素的干扰，如白细胞和红细胞以及碎片等［10］。血小板活化还会参与到脑梗死和冠心病患者的动脉粥样硬化性血栓形成过程中，在动脉粥样硬化的发展、发生过程中，血小板活化所起的作用极为重要。其中，CD62p蛋白在早期即参与了动脉粥样硬化的形成，并与且脉硬化的病变程度之间存在一定的相关性［11］。王国瑜等［12］研究发现，血小板膜糖蛋白PAC-1 与CD62P表达呈线性相关，并且与炎症趋化因子血小板因子4（platelet factor 4，PF4）浓度变化一致。表明血小板活化及其介导的炎症机制在动脉粥样硬化和血栓形成过程中起着重要的病理生理学作用，且该机制在不同病变类型之间存在显著差异。本次研究结果还显示，较健康对照组，脑梗死组和高血压组患者的血小板表面膜糖蛋白CD62p、CD63均出现显著上升的情况，表明脑梗死和冠心病等心脑血管患者的血小板活化功能较健康者会出现显著增强的情况。另外，关于高血压患者血小板活化状态的研究目前尚无一致的定论，大多数学者均认为高血压患者会出现血小板活化能力增强的情况。本文显示，较健康对照组，高血压组患者的血小板表面膜糖蛋白CD62p、CD63均出现显著上升的情况，提示高血压患者的血小板活化功能较之健康者会出现显著增强。分析可能与交感神经活性亢进、血流动力学改变以及以及内皮细胞受损等因素有关。另外，有学者报道［13］，血小板膜糖蛋白（GP）与急性脑梗死患者病情严重程度呈正相关，血小板活化状态对于评估急性脑梗死患者病情轻重以及判断预后有重要意义。本研究受到研究样本及时间等因素的限制，并没有对血小板活性状态与各脑血管疾病的发展及预后等问题进行探讨。

综上所述，脑血管疾病患者的血小板活化状态显著增强，临床可以通过对脑血管疾病患者血小板表面膜糖蛋白的检测来更好的预防各种脑血管疾病的出现。

［1］刘玥，张京春，史大卓，等.波动性高血压与血小板活化及其中西医结合干预策略［J］.中国中西医结合杂志，2013，33（7）：869-872.

［2］阮长耿主编.血栓与止血——现代理伦和临床实践［M］.南京：江苏科学出版社，1994：230.

［3］耿朝晖，郭竹英，胡晓波，等.血小板活化标志物：血小板与单核细胞聚合物的临床应用［J］.检验医学，2011，26（6）：419-421.

［4］赵通武，汪升学.左卡尼汀对维持性血液透析患者血小板活化状态的影响［J］.现代中西医结合杂志，2014，23（4）：413-415.

［5］王朝辉，鞠文博，黄竞妍，等.脑血栓患者治疗前后血小板膜糖蛋白CD62p水平的比较［J］.中国老年学杂志，2013，33（5）：1 152-1 153.

［6］刘远智，黄春秀.急性脑梗死患者血小板活化状态及参数的变化及临床意义［J］.实用医学杂志，2011，27（9）：1 673-1 675.

［7］杨海贵，高永开，张永兵，等.不同术式对重型颅脑损伤患者血小板活化指标及脑血管痉挛状态的影响［J］.中国实用神经疾病杂志，2013，16（13）：13-15.

［8］张敏，段惠玲，朱美婕，等.脑梗死患者血清抗心磷脂抗体α-颗粒膜蛋白、血小板、血脂水平及临床意义［J］.中国实用神经疾病杂志，2011，14（11）：41-42.

［9］马丽丽，张津华，刘辉，等.急性脑梗死患者血浆同型半胱氨酸与血小板活化的相关性研究［J］.中华老年心脑血管病杂志，2011，13（12）：1 102-1 104.

［10］沈明强，石冬敏，程庆璋，等.急性脑梗死患者的血小板活化、聚集状态及其临床意义［J］.临床神经病学杂志，2013，26（2）：105-107.

［11］Yuko Iida，Tomoaki Doi，Rie Matsushima-Nishiwaki.（-）-Epigallocatechin gallate selectively inhibits adenosine diphosphate stimulatedhuman platelet activation：Suppression of heat shock protein 27phosphorylationvia p38mitogen activated protein kinase［J］.Molecular Medicine Reports，2014，10（3）：1 383-1 388.

［12］王国瑜，周广喜.大动脉粥样硬化性卒中与脑小血管病患者血小板PAC-1、CD62P阳性率和血清血小板因子4水平的差异［J］.国际脑血管病杂志，2011，19（2）：95-100.

［13］姚平波，聂亚雄，赵红，等.血小板活化状态在急性脑梗死中的意义及其与预后的相关性［J］.广东医学，2013，34（5）：704-706 .

（收稿2014-07-11）

R743

B

1673-5110（2015）10-0075-02