安神补眠颗粒喷雾干燥工艺*

韩飞，曾鸿鹄，张洁，许汉林，杨明，罗晓健

(1.江西中医药大学药学院，南昌 330006;2.湖北中医药大学药学院，武汉 430065;3.江西中医药大学科技学院，南昌 330006;4.中药固体制剂制造技术国家工程中心，南昌 330006)

安神补眠汤为江西中医药大学附属医院自行组方，出自张仲景《金匮要略》中酸枣仁汤，全方由黄连、法半夏、酸枣仁等5味中药组成，具有清心去烦、养血安神、消痞散结、催眠静心等功效，用于治疗神经衰弱，或烦躁引起的失眠等病症临床效果显著。现按照中药6类新药标准将其制成颗粒剂，具有服用剂量小、稳定性强、更适合服用等优点。笔者在本实验中采用正交实验法，对安神补眠颗粒的喷雾干燥工艺进行考察，优选最佳工艺条件，为该制剂生产工艺提供实验依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent-1200高效液相色谱仪:Agilent-1200泵，Agilent-1200-VWD检测器，Agilent-1200化学工作站，Hypersil 0DS2 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5μm)(大连依利特公司);BSZZ4S型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司，感量:0.01 mg);电子恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司);HKP-9062A型恒温培养箱(上海一恒科学仪器有限公司);OPD-8型高速离心喷雾干燥机(上海大川原干燥设备有限公司);KQ-1000DE型超声清洗机(昆山市超声仪器有限公司);LXJ-Ⅱ型低速大容量离心机(上海安亭科学仪器厂);LHS16-A型烘干法水分测定仪(上海精密科学仪器有限公司)。

1.2 试药 盐酸小檗碱对照品(中国食品药品检定研究院，批号:110713-200208，含量 86.7%)，乙腈、甲醇为色谱纯(天津市永大化学试剂厂)，三乙胺、磷酸、磷酸二氢钾、冰醋酸、无水乙醇为分析纯(天津市博迪化工有限公司)，水为超纯水，其他试剂均为分析纯(天津市永大化学试剂厂)，安神补眠颗粒由江西中医药大学药学院制备。

2 方法与结果

2.1 辅料的筛选与确定 由于中药浸膏中杂质多，含糖量较高，或实际生产操作中多次经过乙醇处理，若将浸膏直接采用喷雾干燥方法，常出现粘壁、药粉焦糊、含水量较高等现象，导致喷雾干燥效果差、产率低甚至干燥无法完成。根据文献[1-2]说明，向中药浸膏中加入一定量辅料可大大改善喷雾干燥过程的粘壁、含水量较高等现象，并且得粉率高、成型性好。根据预实验结果，选取微晶纤维素、乳糖、麦芽糊精3种辅料以2∶1∶2比例，按照浸膏量6%投料，喷雾干燥较顺利，且实际可行。

2.2 浸膏的制备 根据预实验结果，确定采用水提醇沉的操作方法，按照处方量称取各味药材进行提取，将提取液静置后，滤过2次，合并滤液，高速离心，收集上清液，减压浓缩，加入75%乙醇，静置24 h后，取上清液回收乙醇至无醇味，再次减压浓缩至相对密度1.15，即得浸膏液;加入浸膏量6%的微晶纤维素∶乳糖∶麦芽糊精(2∶1∶2)混合物，搅拌均匀，作为浸膏液，备用。

2.3 盐酸小檗碱的含量测定

2.3.1 色谱条件 色谱柱:Hypersil 0DS2 C18(250 mm×4.6 mm，5μm);流动相为乙腈-0.05 mol·L－1磷酸二氢钾溶液(28∶72)(磷酸二氢钾溶液1000mL含三乙胺4mL，并用磷酸调节pH值至3)，检测波长347nm，流速1.0mL·min－1，柱温 30 ℃，进样量20μL，理论板数按盐酸小檗碱计算应不低于4000。

2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品(五氧化二磷减压干燥12 h)11.60 mg，置100mL量瓶中，加甲醇超声溶解，定容，摇匀，即得，每毫升含盐酸小檗碱 0.1160 mg。

2.3.3 供试品溶液的制备 取喷干粉末(批号:20120823)适量，研细，精密称取粉末1 g，置100mL量瓶中，精密加入甲醇溶解并定容，密塞，精密称定质量，超声处理(200 W，40 kHz)3次，每次20 min，放冷，再称定质量，甲醇补足失重，滤过，取续滤液，即得。

2.3.4 标准曲线的绘制 精密量取盐酸小檗碱对照品溶液(0.1160 mg·mL－1)0.1，0.2，0.4，0.8，1.6，3.2，6.4mL，分别置10mL量瓶中，加甲醇稀释并定容，摇匀。分别精密吸取20μL，注入高效液相色谱仪，记录峰面积。以盐酸小檗碱对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为 Y=1411.8X+4.9609，r=0.9998，结果表明，盐酸小檗碱对照品浓度在 0.00116～0.07424 mg·mL－1内线性关系良好。

2.3.5 精密度实验 精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液(0.1160 mg·L－1)及供试品溶液各 20μL，分别注入液相色谱仪，连续进样6次，依法测定，记录峰面积，峰面积RSD分别为0.736%，0.985%，结果表明仪器精密度良好。

2.3.6 重复性实验 按“2.3.3”项下方法，取同一批喷干粉末(批号:20120823)6份进行测定，盐酸小檗碱平均含量 1.8288 mg·g－1，RSD 为 1.423%(n=6)，结果表明方法重复性良好。

2.3.7 稳定性实验 按“2.3.3”项下制备成供试品溶液，精密吸取同一供试品溶液20μL，分别于制备后0，2，4，8，12，24 h，依法测定，峰面积 RSD 为 0.821%，结果表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.3.8 回收率实验 精密称取同一批号样品(批号:20120823，含量为 1.8288 mg·g－1)共 6 份，每份0.1 g，分别置于10mL 量瓶中，分别加入0.1160 mg·mL－1盐酸小檗碱对照品1mL。按照“2.3.3”项方法操作下，按“2.3.1”项条件测定，得回收率为 98.37～101.21%，RSD为 1.516%。

2.4 喷雾干燥正交实验设计与结果 根据单因素考察的实验结果，选择对工艺影响较大的3种因素，即进/出风温度(A)、进液速度(B)、浸膏相对密度(C)为考察因素，以喷干所得粉末的含水率、得粉率、盐酸小檗碱的含量为指标，采用L9(34)正交实验优化喷雾干燥工艺，并以三者的数据为综合考察指标进行评分，采用加权平均法进行综合评价，综合评分=(盐酸小檗碱含量/最大盐酸小檗碱含量)×0.4×100+(最小含水率/含水率)×0.3×100+(得粉率/最大得粉率)×0.3×100。因素水平表、实验结果及方差分析见表1～3。

结果表明:对喷雾干燥工艺的影响C＞A＞B，其中A、C影响显著，B影响不显著;实验结果表明喷雾干燥的进/出风温度越高、浸膏相对密度越大，药粉含水率就越低，得粉率越高，喷雾干燥的效果越好;可能由于盐酸小檗碱的物化性质相对稳定，A、B因素对其含量影响不大。

表1 L9(34)正交实验因素水平表Tab.1 Factors and levels of L9(34)experiment

综合考虑，确定最佳工艺为A2B1C3，即进/出温度为145℃/85℃，进液速度为30mL·min－1，浸膏相对密度 1.15。

2.5 最佳工艺验证 为确定优选工艺的可靠性及稳定性，取3个不同批次的提取液，按上述最佳工艺进行验证实验。由表4结果可知，该工艺稳定、可控，重复性高。

2.6 喷干粉末的各指标测定

2.6.1 临界相对湿度的测定 称取喷干粉末(批号:20121024)约2 mg，置于已在相对湿度75%干燥器中恒重称量瓶中，精密称定。打开瓶盖，将样品置于以浓硫酸溶液控制相对湿度为75%的干燥器中，在25℃恒温培养箱中放置，分别于2，4，8，12，24 h，以后每24 h 取出称量瓶，精密称定质量，计算吸湿百分率，以吸湿率对时间作图即得吸湿曲线，并求出吸湿平衡时对应的时间，约为3 d(72 h)。

称取喷干粉末(批号:20121024)6份，每份约2 mg，同上操作，置盛有不同浓度的浓硫酸溶液的玻璃干燥器中，于25℃的恒温培养箱中保存3 d，取出称量瓶，精密称定，计算吸湿百分率，以吸湿量对相对湿度作图的吸湿平衡曲线，在拐点作两切线，切线交点对应的相对湿度，即为临界相对湿度，见图1，2，得出喷干粉末的临界相对湿度为53%。

2.6.2 含水率的测定 根据《中华人民共和国药典》2010年版一部(附录ⅨH)，烘干法测得最佳干燥工艺所得干粉的含水率为7.68%。

2.6.3 休止角的测定 将3只漏斗串连并固定于水平放置的坐标纸上高度1 cm处，小心将混合均匀的颗粒沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到坐标纸上形成的颗粒圆锥体尖端接触到漏斗口为止，由坐标纸测出圆锥底部的半径(R)，计算出休止角，θ=Arctan H/R，利用此方法测得最佳工艺浸膏粉休止角为34.73°。

3 讨论

在综合评分公式中，考虑到盐酸小檗碱的含量与制剂的质量和药效密切相关，故占总分的40%。含水率的大小与喷雾干燥的效果成反比，故公式中采用最小含水率/含水率的方法进行评分，使所得结果与实际生产相吻合，且不会影响的最终结论。得粉率与喷干粉的含水量有一定相关性，本实验得粉率的计算已扣除水分的含量，所得数据与理论值基本接近。

本实验在考察喷干辅料时，曾尝试过可溶性淀粉和微粉硅胶[4-5]，但效果都不理想。可溶性淀粉虽易成型，且不易吸湿，但由于糊化温度较低，喷干时容易粘壁，喷干后粉末流动性较差且口感不佳，微粉硅胶虽大大提高粉末的流动性，但用量较大且吸湿较差，给制剂成型工艺带来较大的不便。最终，确定采用微晶纤维素∶乳糖∶麦芽糊精(2∶1∶2)的配比，其中微晶纤维素使粉末的流动性和成型性大大提高;乳糖和麦芽糊精不仅使粉末的吸湿性显著降低且口感良好，适合小儿服用;三者配合使用，得粉率高，成型强，喷干效明显改善。

表2 L9(34)正交实验安排和结果Tab.2 Design and results of L9(34)orthogonal experiment

表3 方差分析结果Tab.3 Results of ariance analysis

表4 最佳喷雾干燥工艺验证实验结果Tab.4 Results of verification test of spray drying process

图1 喷干粉末吸湿平衡曲线Fig.1 Curve of balance of moisture absorption by dry powder

由于安神补眠颗粒为中药复方制剂，黄连为君药，半夏为臣药，丹参、酸枣仁为佐药。综合各方面考虑，本实验选取黄连中的盐酸小檗碱作为评价指标，该成分稳定性强、含量高、检测方便，且能有效控制产品的药效和质量，适合实际生产中操作。

图2 喷干粉末的临界相对湿度Fig.2 Critical relative moisture of dry powder

本实验在考察进液速度对喷雾干燥的影响时，虽然结果没有显著性，但在实际生产过程中，如果进液速度过快，使得干燥过程不充分，得粉率较低，含水率较高;速度过慢[6-7]，干燥时间过长，药粉易粘壁、糊化;如何选择合适的进液速度，进液速度和药粉吸湿性有何关系，进液速度对药粉粉体学性质有何影响等问题，还有待于进一步研究。

[1]吕子明，于向红，陈凯，等.正交实验法优选黄连浸膏的喷雾干燥工艺[J].中国实验方剂学杂志，2013，19(1):10－12.

[2]乌日娜，那生桑，包勒朝鲁.复方沙棘颗粒剂的喷雾干燥工艺优选[J].中国实验方剂学杂志，2013，19(4):56－58.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:1758.

[4]潘旭旺，田静，蒋小琴，等.茵柏颗粒的喷雾干燥工艺研究[J].中草药，2009，40(11):1746－1749.

[5]向晶，苏艳霞，施军平.复方楂金颗粒喷雾干燥工艺研究[J].中华中医药学刊，2011，29(12):2682－2684.

[6]李光，李宜航，李学兰，等.肾茶水提物喷雾干燥工艺优化考察[J].医药导报，2013，32(11):1474－1477.

[7]蒋艳荣，张振海，刘丹，等.正交实验优选馨月舒胶囊气相二氧化硅辅助喷雾干燥工艺[J].中华中医药杂志，2013，28(8):2393－2396.