5%阿维·虱螨脲乳油高效液相色谱分析

蓝宏彦 ，龚发秀，梁永星，邓欣毅，吴燕飞，邓明学

（1.柳州市惠农化工有限公司，广西 柳州 545616 ；2.广西特色作物研究院，广西 桂林 541004)

阿维·虱螨脲 5%乳油由阿维菌素和虱螨脲复配而成。阿维菌素是一种大环内酯双糖类化合物，是从土壤微生物中分离的天然产物，对昆虫和螨类具有触杀和胃毒作用并有微弱的熏蒸作用，无内吸作用。但它对叶片有很强的渗透作用，可杀死表皮下的害虫，且残效期长。其在柑橘上主要登记用于防治潜叶蛾、锈壁虱、红蜘蛛[1]。虱螨脲是诺华公司1997 年开发成功的昆虫几丁质合成抑制剂，属于苯甲酰脲类杀虫剂，药剂通过作用于昆虫幼虫阻止脱皮过程而杀死害虫，尤其对果树等食叶毛虫有出色的防效，对蓟马、锈螨、白粉虱有独特的杀灭机理，适于防治对合成除虫菊酯和有机磷农药产生抗性的害虫。药剂的持效期长，有利于减少打药次数[2]。两种化合物复配是很好的药剂。目前，阿维·虱螨脲复配制剂的分析方法未见报道。本文建立了在同一液相色谱条件下同柱分离测定阿维菌素和虱螨脲的高效液相色谱法。实验结果表明，该方法具有操作简便、快速、准确、分离效果好的特点，准确度和精确度均能达到定量分析的要求。

1 实验部分

1.1 试剂与溶液

甲醇（分析纯），新蒸二次蒸馏水，阿维菌素（B1a+B1b）标样（质量分数≥98.0%），虱螨脲标样（质量分数≥99.0%），阿维·虱螨脲5%乳油试样。

1.2 仪器

日本岛津SPD-M20A 高效液相色谱仪，具有自动进样器；LCsolution-岛津液相工作站；色谱柱：250mm×4.6mm(id)不锈钢柱，内装ODS-C185μm填充物。

1.3 液相色谱操作条件

流 动 相：甲 醇∶水=85∶15（V/V）；流 量：1.0mL·min-1，检测波长245nm；进样体积20μL；保留时间：虱螨脲约为5.54min；阿维菌素（B1b）约为8.36min，阿维菌素（B1a）约为10.27min，这样可使阿维菌素和虱螨脲在C18柱上获得较好的分离效果和较高的灵敏度。

上述液相色谱操作条件是典型的操作参数，可根据不同仪器特点和当时温度条件，对给定的操作参数进行适当的调整，以获得最佳效果。典型的标样和试样的高效液相色谱图见图1 与图2。

图1 阿维·虱螨脲标样图谱

图2 5 %阿维·虱螨脲试样图谱

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的配制

称取虱螨脲标品0.0538g（精确至0.0002g）和阿维菌素标品0.050g（精确至0.0002g） 置于50.0mL 容量瓶中，加入甲醇超声溶解，冷却至室温，定容至刻度，摇匀备用。

1.4.2 试样溶液的配制

称取试样 1.60g (精确到0.0002g)于50.0mL 容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，然后超声溶解，冷却至室温，摇匀备用。

1.4.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针标样溶液面积相对变化＜1.0%,按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液顺序进行测定。

1.4.4 计算

以质量分数表示虱螨脲或阿维菌素（B1a+B1b）含量X（%），按下列公式计算：

式中：A1为标样溶液中虱螨脲或阿维菌素（B1a+B1b）峰面积的平均值；A2为试样溶液中虱螨脲峰或阿维菌素（B1a+B1b）峰面积的平均值；m1为虱螨脲或阿维菌素（B1a+B1b）标样的质量，g；m2为标样中虱螨脲或阿维菌素（B1a+B1b）的质量，g；p 为虱螨脲或阿维菌素（B1a+B1b）标样的质量分数，%。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

2.1.2 检测波长的确定

用虱螨脲标样溶液在不同的波长条件下用高效液相色谱仪分别进样，可观察到在204nm 和245nm波长条件下有较大的吸收波长，但是在204nm 波长条件下溶剂对峰的干扰很大，因此选用245 nm 作为检测波长。

2.1.2 色谱柱的选择

根据虱螨脲的化学结构，我们选择常用的ODS-C18和正相填料Kromasil Si60柱进行试验，发现选用的反向填料柱能较好地将虱螨脲和杂质分离，因此选择用反向柱。

2.1.3 流动相的选择

根据虱螨脲的特点，对使用的甲醇和水按不同的比例，在色谱柱上进行选择比较。经过测定，选择甲醇溶液体积分数85%，水体积分数15%，流量为1.0mL·min-1时有效成分与杂质能很好地分离，峰形对称，基线平稳，并且分析时间较短，提高了工作效率。

2.2 分析方法的线性相关性

分别准确称取99.0%虱螨脲标样约0.0538g 和98.0%阿维菌素标样约0.050g（精确至0.0002g），分别置于50.0mL 容量瓶中，用甲醇稀释定容至刻度，摇匀后，置于10mL 容量瓶中，按上述色谱操作条件进行分析，以虱螨脲、阿维菌素质量为横坐标，相应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线（表1、图1 和图2）。虱螨脲线性回归方程为：y=6868806x+310433.7，线性相关系数为0.9999；阿维菌素线性回归方程为：y=18785537x+309871.9，相关系数0.9999，由此可见，虱螨脲、阿维菌素的液相色谱分析法线性关系良好。

表1 分析方法的线性相关性试验实验结果

图1 虱螨脲线性关系图

图2 阿维菌素线性关系图

2.3 分析方法精确度实验

在同一产品中准确称取5 个试样，在上述色谱操作条件下进行分析，测得虱螨脲的标准偏差为0.02，变异系数为0.60%；测得阿维菌素的标准偏差为0.013，变异系数为0.69%（表2）。

表2 分析方法的精密度试验结果

2.4 分析方法的准确度实验

在已知含量的样品中，加入1.4.1 中配制的标准溶液5mL，在上述方法和操作条件下进行定量分析，测得虱螨脲的平均回收率为99.93%；阿维菌素的平均回收率为99.96%（表3）。

3 结论

综上所述，该方法具有操作简便、快速、准确、分离效果好的特点，准确度和精确度均能达到定量分析要求，可以作为企业生产过程质量控制和质检机构质量检测的参考方法。

表3 分析方法的准确度试验结果

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