酶联免疫吸附测定常见问题的分析及对策

严 莉　雷 江

（四川省宜宾市第一人民医院，四川 宜宾 644000）

酶联免疫吸附测定常见问题的分析及对策

严 莉雷 江

（四川省宜宾市第一人民医院，四川 宜宾 644000）

目的 对酶联免疫吸附测定常见问题分析及对策进行分析。方法选取2011年5月至2014年5月在我院采用酶联免疫吸附测定患者200例，随机进行分组，手工组100例患者，进行手工酶联免疫吸附测定，自动组患者100例，进行全自动酶联免疫吸附测定，对两组患者在检测中存在的问题进行总结和分析。结果全自动组患者准确诊断比例、操作时间、重复性、污染比例对比手工组患者，无显著性差异，无统计学意义（P＞0.05）。两组监测方法常见的问题均为凝血、较差污染、检测结果误差、环境问题，对其实施针对性的应对策略。结论对于酶联免疫吸附测定，应用全自动生化仪进行酶联免疫吸附测定和手工酶联免疫吸附测定，准确诊断率和重复性、较差污染的比例无明显的差异性，其中酶联免疫吸附测定主要存在的常见的问题均为凝血、较差污染、检测结果误差、环境问题，无明显的差异，针对上述问题进行针对性的处理措施，可有效的增加临床准确诊断率和酶联免疫吸附测定准确率。

酶联免疫吸附测定；常见问题分析；对策；全自动生化分析；手工分析

酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）是20世纪70年代在免疫酶技术的基础上发展起来的一种免疫测定技术，目前在临床诊断中应用较为广泛，主要是进行临床疾病的诊断，为治疗提供可靠的依据［1］。本文中对在我院进行酶联免疫吸附测定患者200例分别进行全自动分析和手工分析，现将结果报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料：选取2011年5月至2014年5月在我院采用酶联免疫吸附测定患者200例，其中男117例，女83例，年龄16～76岁，平均年龄（55.37±2.37）岁。将200例患者随机分为两组，手工组100例患者，其中男58例，女42例，年龄16～76岁，平均年龄（55.50±2.00）岁，自动组患者100例，其中男59例，女41例，年龄18～75岁，平均年龄（55.00±2.50）岁，对比两组患者的性别比例和平均年龄，差异无统计学意义（P＞0.05）。患者酶联免疫吸附测定方法为患者自愿选取。

1.2检测方法：手工组100例患者，首先对患者的情况进行准确的掌握，对患者的病史进行详细的询问，后进行静脉血采集，将血液标本置于专用试管内，后依据酶联免疫吸附测定方法和试剂盒说明，进行手工酶联免疫吸附测定，同时对检测结果进行分析［2］。

自动组患者100例，患者成功采集标本后，进行处理，后将标本置于自动分析仪上进行全自动酶联免疫吸附测定，对使用过后的血液标本丢弃子专用的垃圾筒内。

1.3统计方法：统计学分析选用SPSS11.0软件，计数资料采用χ2检验表示，采用t检验，差异有统计学意义为P＜0.05。

2　结　果

2.1对比两组患者的检测情况：全自动组患者准确诊断比例、操作时间、重复性、污染比例对比手工组患者，无显著性差异，无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2.2酶联免疫吸附测定常见问题：常见的问题为凝血、交叉污染、检测结果误差、环境问题，对其实施针对性的应对策略。主要措施为，定期进行科内人员的技术培训，提高检验人员操作的熟练程度，对流程熟练掌握，并且能够准确的进行；提高标本的管理，降低操作过程中污染的发生，对检验机器和环境严格消毒和定期进行清理，减少其他标本的残留和污染，并且实施有效的管理措施，降低误差。对检验处存在传染性疾病的标本进行针对的处理和销毁，防治交叉污染发生，导致检验结果发生误差［3］。

3　讨　论

ELISA是一种利用免疫学原理检测抗原或抗体的技术，可用于定量测定，测定的对象可以是抗体或抗原。ELISA是将酶与抗原或者抗体相结合形成酶标志物，或者将酶与酶抗体相结合形成免疫复合物，这种酶标志物或免疫复合物检测与一般上午临床化学或临床血液学检验不同，它具有高度的特异性和敏感性，且操作简单，避免了因标本和试剂分配时间或分配量的不一致造成的检测误差。随着医院免疫检测仪器的不断更新和发展，目前医院的许多检验科免疫室都有半自动酶标仪和全自动酶联免疫仪［4］，由于检测系统的不同，两种仪器被同时使用，用于衡量检验科免疫室的检测质量。因此每年都应进行仪器之间的比对。本研究通过比对［5］，同时对两种操作方法的常见问题进行分析。

本文对TECAN FREEDOMEVOLYZER-2200全自动酶联免疫仪的性能进行评价，结果表明该仪器可满足临床工作需要，但手工操作方法与全自动酶联免疫分析系统操作方法存在一定的预期偏差，处于值附近临床意义可疑的称之为灰区的检测结果不易判定时，需要考虑两种操作方法间的预期，偏差使同一份标本在不同操作系统的检测，结果保持一致保证检测结果的准确稳定［6-7］。

本文中对在我院进行酶联免疫吸附测定患者200例分别进行全自动分析和手工分析结果显示，全自动检查分析患者准确诊断比例、操作时间、重复性、污染比例对比手工检测患者，无显著性差异，无统计学意义（P＞0.05）。常见的问题为凝血、较差污染、检测结果误差、环境问题，对其实施针对性的应对策略［8］。

表1　对比两组患者的情况（n=100）

综上所述，对于酶联免疫吸附测定应用全自动生化仪进行酶联免疫吸附测定和手工酶联免疫吸附测定，准确诊断率和重复性、较差污染的比例无明显的差异性，其中酶联免疫吸附测定主要存在的常见问题为凝血、较差污染、检测结果误差、环境问题，针对上述问题进行针对性的处理措施，可有效的增加临床准确诊断率和酶联免疫吸附测定准确率［9］。

［1］柳其芳.酶联免疫检测技术在食品卫生理化检验中的应用［J］.食品安全与检测，2004，6（2）：60-61.

［2］江枫，肖明兵，倪润洲，等.血清检测法的建立及初步应用［J］.临床检验杂志，2011，29（4）：244-246.

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［4］邹晓萍，骆展鹏，黎美君，等.大型酶免实验检测系统厂家校验后确认方法的建立及应用［J］.中国卫生工程学，2011，10（2）：124-129.

［5］Guethoff S，Meiser BM，Groetzne R.Ten-years results of a randomized trial comparing tacro limus versus cyclosporine a in combination with mycophenolate mofetil after heart transplantation［J］.Tramsplantation，2013，95（4）：629-634.

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1671-8194（2015）11-0134-02