维吾尔药材刺糖的体外抑菌效果

张倩+孟新源+张明君+耿文宁+刘恒戈

【摘 要】 目的：研究维吾尔药材刺糖醇提取物的体外抑菌作用。方法：制备刺糖95%的乙醇提取物，采用试管二倍稀释与琼脂平板法，对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌进行体外抑菌作用的研究，测定其最低抑菌浓度与最低杀菌浓度。结果：刺糖95%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌2种菌株均有抑菌作用，而对大肠埃希菌和白色念珠菌无抑制作用。结论：刺糖醇提物对细菌有一定的抑菌作用。

【关键词】 刺糖；体外抑菌；液体2倍稀释法

【中图分类号】R285-5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）18-0005-02

In Vitro Bacteriostasis Research of Exteacts from Uygur medicine Saccharum Alhagi

ZHANG Qian1 MENG Xinyuan1 ZHANG Mingjun2 GENG Wenning2 LIU Hengge1*

1-Depatment of Pharmacy，Affillated Tumor Hospotal of Xinjiang Medical University，Urumqi 830011，China；

2-Xinjiang Uygur Autonmous Region Institute For Food and Drug Control，Urumqi 830004，China

Abstract：Objective To study the in vitro antimicrobial activity of Uygur Medicine Saccharum Alhagi.Method To prepare the Saccharum Alhagi 95% ethanol extract，using tube dilution and agar plate method， Staphylococcus aureus， Candida albicans， Escherichia coli and Bacillus subtilis in vitro antibacterial study measured the minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration. Results The Saccharum Alhagi 95% ethanol extract antibacterial effects on Staphylococcus aureus and Bacillus subtills ，while no inhibitory effect on Escherichia coli and Candida albicans.Conclusion The Saccharum Alhagi alcohol extract had inhibitory effects on bacteria.

Keywords：Saccharum Alhagi；Bacteriostasis in vitro；Double dilution method

刺糖（Saccharum Alhagi）为豆科植物骆驼刺（Alhagi pseudoalhagi Desv）枝叶分泌的糖液凝结而成的颗粒，色黄白，味甜，略具粘性，是维吾尔医常用药材，可治疗痢疾、腹泻、血尿等疾病[1]。在《维吾尔常用药材》中早有记载，至今临床仍在使用，它具有滋补强壮、益精壮阳、涩肠止痛、祛痰止咳的功效[2]。然而多年来并未见刺糖的抑菌作用的研究报道。本试验以新疆地产刺糖为原材料，通过95%乙醇提取方法制备其不同浓度提取物，研究其对4种常见菌株的抑制作用，为开发利用这一野生资源提供科学依据。

1 材料和试剂

刺糖500g，购自新疆自治区维吾尔医院，药材经新疆医科大学药学院鉴定；95%乙醇；甲醇；水为纯化水，其他试剂均为分析纯。菌株和培养基：金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠埃希菌，枯草牙胞杆菌均购自新疆维吾尔自治区食品药品检验所。肉汤培养基、琼脂培养基、改良马丁培养基、玫瑰红纳琼脂培养基等加蒸馏水经121℃高压蒸汽灭菌20min后冷却备用。主要仪器设备：旋转蒸发仪；电热恒温培养箱；生化培养箱；生物安全柜。

2 方法

2-1 药液的制备 取刺糖药材200g，粉碎，加入3倍量95%乙醇加热回流2h，过滤；滤渣加入2倍量95%乙醇加热回流2h，过滤；滤渣再加人2倍量95%乙醇加热回流1h，过滤，合并三次滤液。旋转蒸发仪浓缩成浸膏（25-00g）。加甲醇4ml溶解，再加蒸馏水稀释至20ml，配成浓度为20%的醇提液混悬液（最大浓度），即得刺糖醇提物，药物浓度为1-25g/ml。

2-2 菌液的制备 将冻存于-80℃的实验用菌株取出，活化后根据试验的需要配制成含菌数为103～105 CFU/ml的菌悬液，备用。

2-3 液体培养基连续稀释法 分别取10支灭菌试管，将刺糖提取浓缩液（1-25g/ml的刺糖醇提物和醇后水提物药液）1ml采用试管2倍稀释法[3]，以营养肉汤或改良马丁液体培养基倍比稀释后（原液，1∶ 2，1∶ 4，1∶ 8，1∶ 16，1∶ 32，1∶ 64，1∶ 128），使营养肉汤或改良马丁液体培养基含药浓度分别为625mg/ml、312-5mg/ml、156-3mg/ml、78-2mg/ml、39-1mg/ml、19-6mg/ml、9-8mg/ml，分别加入含菌数为103～105 CFU/ml的菌悬液（大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌）0-1ml。另在营养肉汤或改良马丁液体培养基接种相同菌种的菌悬液作为阳性对照；以0-5ml营养肉汤或改良马丁液体培养基与0-5ml蒸馏水或20%甲醇溶液作为稀释剂对照，以有药液不加试验菌液的为空白对照。

2-4 最低抑菌浓度的测定 将上述试管用橡皮塞封口，放入37℃恒温培养箱中培养24 h。因药材提取液颜色较深并且澄明度差，影响试验结果的观察，肉眼不易辨明其生长情况，从各管取一环转接于营养琼脂平板或玫瑰红钠琼脂平板上，观察有无菌落生长。以无菌落生长的最低药液浓度为该药材的最低抑菌浓度（Minimal Inhibitory Concentration，MIC）。

2-5 最低杀菌浓度的测定[4] 从每个试管中各取0-1ml培养液接种于营养琼脂平板或玫瑰红钠琼脂平板上，放人37℃恒温培养箱中培养24 h，观察各琼脂平板上菌落生长情况，以平板上计数少于5个菌落的药液浓度作为该药材的最低杀菌浓度（Minimum Bactericidal Concentration，MBC）。

3 结果与讨论

3-1 刺糖不同提取物对各供试菌的影响 刺糖95%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有抑菌作用，其中对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC为78-2mg/ml；对枯草芽孢杆菌的MIC和MBC为78-2mg/ml；刺糖的醇提物对大肠埃希菌和白色念珠菌均无抑菌作用。结果见表1。

表1 刺糖醇提取物对受试菌的MIC和MBC测定结果

注：“ + ”表示有菌落生长，“ -”表示无菌落生长，“①”表示最低抑菌浓度（MIC），“②”表示最低杀菌浓度（MBC）。

3-2 讨论

刺糖可以滋补强壮、整肠止痛[5-6]。《本草纲目》载：“甘平无毒，清热解毒，消肿止痛”，主治“痰嗽下血”。还可治腹胀腹痛、口舌生疮[7-8]。虽然目前在刺糖药理学研究方面做了许多工作并取得了一定成果[9-10]，但对其在抑菌试验方面的报道却很少。本试验结果表明，刺糖95%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有抑菌作用；对大肠埃希菌和白色念珠菌均无抑菌作用。对刺糖的抑菌效果及MIC、MBC的测定，对于了解刺糖抗菌效果具有一定的意义，同时有利于促进该植物的合理开发。但是对其抑菌成分、抑菌机理等方面还有待于进一步研究。参考文献

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（收稿日期：2015-05-19）