天麻超微粉体外溶出度比较

摘 要： 目的：通过高效液相色谱法对天麻的普通粉体和不同粒径的超微粉体中有效成分天麻素进行溶出度的比较，为天麻超微粉体在临床上的实际应提供更有参考性的实验依据。

关键词：天麻；超微粉；天麻素；溶出度；高效液相色谱法

天麻始载于秦汉时期的《神农本草经》，为兰科植物天麻（Gast rodia elataB lume） 的干燥块茎， 古名赤箭[1]。传统本草多记载，天麻有治疗肝风内动，惊痫抽搐、头痛眩晕、肢体麻木、手足不遂及风湿痹痛等症。天麻的主要有效成分是天麻素，其药动学研究表明，健康人静脉注射天麻素后，血药浓度与时间曲线与其在动物体内的药动学研究结果具有一致性[2]。

通常临床上认为，药物在人体内的生物利用度和其药物其主要治疗作用成分的溶出量和主要成分的溶出速率方面，存在着在一定程度的相关性。而当药物在体内的吸收限制因素是其溶出速率时，通过合理适当的制药工艺改革来提高药物的溶出速率，可从一定程度上提高药物的临床疗效[3]。从理论角度上，排除其他体内外因素，药物的溶出快慢主要跟与颗粒表面积与液体溶剂的接触大小有关、而表面积大小与颗粒粒度成反比[4]。所以有效成分溶出速度常与药物粉碎度相关， 改善药物的粉碎度， 能一定程度地提高中药有效成分的溶出速率。

本实验主要通过对天麻进行不同粒径大小的制备，而后对制备所得不同粒径溶出情况进行比较研究，初步讨论不同粒径天麻的溶出特点，为天麻超微粉体的临床应用提供相应的实验依据。

1.药料、仪器

1.1药材：天麻药材采用购于云南的散天麻片（20090502）

天麻普通粉：天麻药材用微型植物粉碎机粉碎5min，过100目筛。编号天麻普通粉体待用。天麻超微粉：取天麻药材经微型植物粉碎机粉碎10min后用TC-10进行超微粉碎，调节转速大小分别制得4种天麻超微粉体，分别编号天麻超微粉A、天麻超微粉B、天麻超微粉C和天麻超微粉D，待用。

将天麻普通粉和4种天麻超微粉分别用欧美克激光粒度分析仪（LS-POP（VI））测定其粒径大小，结果见表1。

表1 天麻普通粉体和超微粉体粒径大小

[项目＼&天麻普通粉体＼&天麻超微粉体A＼&天麻超微粉体B＼&天麻超微粉体C＼&天麻超微粉体D＼&D50（μm）＼&66.82＼&29.33＼&22.42＼&12.71＼&6.92＼&D90（μm）＼&152.15＼&68. 02＼&35.10＼&21.14＼&10.40＼&]

注：D50为占50%的粒径颗粒所对应的粒径；D90为占90%的粒径颗粒所对应的粒径。

1.2仪器：Agilent1100高效液相色谱仪、微型植物粉碎机、ZRS-8G、TC-10、欧美克激光粒度分析仪（LS-POP（VI））

1.3试剂：溶出介质采用超声脱气的纯化水、配制对照品乙腈为色谱纯、其余溶剂皆为分析纯。 天麻素对照品购自中国药品生产制品鉴定所（1112635-200806）

2.实验方法与结果

2.1 天麻普通粉体和超微粉体得天麻素溶出试验

2.1.1天麻素的含量测定方法[5]

色谱条件：Diamosil C18（2）（5um，4.6mm×150mm）色谱柱、柱温25℃；流动相用乙腈：0.05%磷酸溶液（3：97），流速为1.0ml/min，检测波长为220，理论板数按天麻素峰计算应不低于5000。

2.1.2 标准贮备液制备

精密称取在80℃减压干燥1小时的天麻素对照品适量加流动相制成每1ml中含0.108mg天麻素的标准贮备液。

2.1.3 线性关系考察

精密吸取以上标准贮备液0.2、0.6、1.0、1.2、1.4 ml，分别置于10 ml量瓶中，加蒸馏水定容，摇匀。进样，测峰面积，横坐标为进样量（μg），纵坐标为峰面积，用Excel做回归性分析，得回归方程式： Y = 2 411 014X + 40 326 （ r = 0. 999 ） ，结果可见：天麻素的浓度在本实验范围内线性关系良好。

2.1.4对照品溶液制备

精密量取天麻素标准储备液配制成每1ml含50μg的贮备液，即得。

2.1.5供试品溶液的制备

将天麻药材的普通及不同粒径的粉体分别精密称定0.8g，移置具塞的锥形瓶，精密量取50ml稀乙醇50ml，加热回流，3小时，放冷后再称定重量，用稀乙醇补足其减失重量，滤过，并取滤液10ml，浓缩至近干，残渣加乙腈-水（3：97）混合溶液溶解，并移至10ml容量瓶，用乙腈-水（3：97）稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.1.6样品测定

将对照品溶液与供试品溶液，分别精密吸取10ml，进样于液相色谱仪，测定。结果为：普通粉0.72g/100g，超微粉体A 0.79g/100g，超微粉体B 0.84g/100g，超微粉体C0.89g/100g，超微粉体D 0.91g/100g。

2.1.7各粒径天麻素溶出度检测

图一 天麻各种粉体的天麻素累计溶出变化曲线

利用浆状搅拌器法，以200ml水为溶出介质，溶置杯内，加温使溶出介质恒温于37℃（±0。5℃）后，转速为60r/min，各个不同大小粒径的粉末取样2g，精密称定，自粉末接触溶出介质起立即计时采样。（2min、5min、10min、20min、30min）各时间点采样8ml，补充溶出介质，过滤，精密量取5ml过滤液，加热水浴蒸干，用适量稀乙醇溶解残渣，置5ml量瓶，加稀乙醇至刻度，摇匀，用0.45nm滤膜滤过后按前述条件测定。见图一。

2.2 数据处理

采用威布尔分布函数处理数据。以㏑t、㏑[-㏑（1-F）]为变量得出相应回归方程，参数见表2。

表2 天麻各种粉体的天麻素溶出度参数

[参数＼&普通粉体＼&超微粉体A＼&超微粉体B＼&超微粉体C＼&超微粉体D＼&Td＼&19.38＼&11.71＼&7.91＼&5.83＼&5.44＼&M＼&0.3979＼&0.3583＼&0.4000＼&0.4423＼&0.4532＼&]

注：以超微粉体D的天麻素溶出量测定结果为100%溶出。Td为累积溶出63.2%的时间，m为曲线的形状参数。

3.讨论

3.1 天麻普通粉体和超微粉体的溶出情况

临床使用的常见情况是由于细胞屏障很多植物药细胞中的化学成分都很难完全提取。

本实验中天麻有效成分的溶出度，普通粉体为0.72%，超微粉体为0.79%、0.84%、0.89%和0.91% 。可见超微粉中的天麻素的溶出量比普通粉的溶出量明显增加。由此可推论由于受到细胞壁的限制，天麻素的溶出难度大，细胞内部的天麻素更是难以被提取。采用新型制备工艺，将天麻制成超微粉后，破坏了药物的细胞壁，有效成分的溶出不再受到其的阻碍，有效成分溶出量明显增多。当然，本实验中四种天麻超微粉细胞壁受到的破坏程度也可能存在不同，但只要细胞壁被破坏，则其溶出限制被解除。本实验利用加热回流促使细胞内的天麻素被充分提取，故此4种不同粒径的超微粉体在提取时其溶出量差异并不大。

试验结果可见将天麻常规粉末制备成超微粉后，其溶出速率增高。中药材有效成分的释放、溶出及吸收过程都与粉体颗粒大小密切相关。因此，利用超微技术可使中药粉末有效成分的溶出发生有效的改变，从而有利于人体对药物有效成分的吸收利用。

参考文献

[1]谢宗万.中药材品种论述（上册） [M ].上海：上海科学技术出版社， 1990：367- 368.

[2]罗军，吴中亮，王惠先.天麻素注射液人体药动学的研究[J].解放军药学学报，2006，22 （5） ：39123931.

[3]奚念朱..药剂学[M] .北京：人民卫生出版社，1994， 3.

[4] 宋辉，张周萍. 粉碎度对中药煎出量影响的探讨[J].中国药房，1994，5 （1） ：48.

[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].，北京：化学工业出版社，2010版（一部）：103.

作者简介：谢斯莹（1987-），女，广东广州人，本科，广州科技职业技术学院助教，从事中药学研究。endprint