正交试验优选金钗石斛含片提取工艺

安凤娟，何宇新

(西华大学食品与生物工程学院，四川 成都 610039)

·基础学科·

正交试验优选金钗石斛含片提取工艺

安凤娟，何宇新*

(西华大学食品与生物工程学院，四川 成都 610039)

为找到金钗石斛含片的最佳提取，采用正交试验方法，以总多糖含量、总皂苷含量和干浸膏得率为评价指标，对提取工艺参数进行优化。结果表明：金钗石斛含片的最佳提取条件为提取溶媒体积为金钗石斛质量的8倍，提取次数3次，提取时间1.5 h。在最佳提取条件下，总多糖质量分数为78.85 mg/g，总皂苷质量分数为4.87 mg/g，干浸膏得率为18.43%。

总多糖；总皂苷；正交试验；金钗石斛含片

金钗石斛含片是由金钗石斛、人参等药材经提取加工而制成的含片，具有免疫调节、延缓衰老作用，适用于亚健康以及患糖尿病、肿瘤、心血管、胃肝病等免疫功能低下者。金钗石斛具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、抗白内障等作用[1-5]。我国的金钗石斛及其他石斛，在东南亚，美国、韩国、日本等也有广阔的市场[6]。目前很多产品开发处于低水平重复建设阶段，新产品及深加工产品缺乏，且市场上鱼龙混杂[7]；因此按照中医药理论和石斛的特点来科学研发出具有较高科技含量的石斛保健品，具有巨大的市场空间[8]。生产工艺是中药保健品生产过程中的一个重要环节，而稳定的工艺是质量标准、稳定性、安全独立性、功能学等的可靠保证。本研究以总多糖含量、总皂苷含量及干浸膏得率为考察指标，采用正交试验设计对金钗石斛含片的提取工艺进行了优选。

1 材料与方法

1.1材料与仪器

金钗石斛、人参、灵芝(四川省中药饮片厂)；人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检验所)；葡萄糖、浓硫酸、苯酚、乙醇、香草醛、冰醋酸、高氯酸等化学试剂均为分析纯。

D101大孔树脂，10 mL注射器，752型紫外可见分光光度计。

1.2总多糖的质量分数测定

采用苯酚-硫酸显色法[9]测定总多糖质量分数。通过测定488 nm波长下不同浓度葡萄糖溶液的吸光度绘制得到标准曲线：y=0.009 4x-0.021 4，R2=0.998 6，线性范围：12～84 μg。取样品溶液适量，用水适当稀释，采用苯酚-硫酸显示法处理得到供试品溶液，测定吸光度，计算样品总多糖质量分数。

1.3总皂苷的质量分数测定方法

采用保健品中总皂苷测定法[10-11]测定总皂苷质量分数。通过测定560 nm波长下不同浓度人参皂苷Re溶液的吸光度绘制得到标准曲线：y=0.004 2x-0.093 2，R2=0.998 0，线性范围：40～200 μg。取样品溶液适量，用水适当稀释，采用保健品中总皂苷测定法处理得到供试品溶液，测定吸光度，计算样品中总皂苷质量分数。

1.4精密度考察

分别精密量取同一对照品溶液6份，随行做空白，依法测定吸光度，计算RSD值，总多糖RSD为2.49%，总皂苷RSD为2.91%，说明精密度良好。

1.5浸膏得率的测定

分别吸取定容后样品液20 mL，置已干燥至恒质量的蒸发皿中，水浴蒸干，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速称质量，计算干浸膏得率，以药材干质量计。

1.6工艺条件及参数的优选

根据预试验结果，提取溶媒用量(A)、提取次数(B)、提取时间(C)是影响煎煮效果的主要因素，因此对此三因素进行考察，按L9(34)正交表进行实验，以总多糖的质量分数(mg/g)、总皂苷的质量分数(mg/g)、浸膏得率(%)作为考察指标，对提取工艺进行综合评价。因素水平表见表1。

表1 正交试验因素水平表

2 结果

由表2、表3可知：提取次数对总多糖含量有显著的影响(P<0.05)，提取溶媒用量和提取时间对总多糖含量的影响不显著；各因素对总皂苷含量的影响不显著(P<0.05)，但提取次数对总皂苷含量影响最大；提取次数对干浸膏得率的影响是极显著的(P<0.01)，提取溶媒用量对干浸膏得率有显著的影响(P<0.05)，而因素C(提取时间)对干浸膏得率的影响是不显著的。所以在确定最佳工艺时应主要考虑提取次数和提取溶媒用量。各个因素对提取过程的影响依次为B>A>C。由表3可知提取次数对金钗石斛含片的提取工艺有显著影响。由表2正交试验直观分析结果可知，金钗石斛含片的最佳提取工艺是A2B3C2，即最佳提取溶媒用量应该为金钗石斛质量的8倍，最佳提取次数为3次，最佳提取时间是1.5 h。

表2 正交试验设计及试验结果

表3 正交试验方差分析

注：F0.05(2,2)=19.00；F0.01(2,2)=99.00；“*”表示显著；“**”表示极显著

3 结论

为了验证最佳工艺的准确性，保证生产工艺的合理性和稳定性，按照上述工艺进行3次验证实验，3次验证的结果基本一致，总多糖平均质量分数为78.85 mg·g-1，总皂苷平均质量分数为4.87 mg·g-1以上，干浸膏平均得率为18.43%。说明此工艺条件合理可行，稳定可靠，具有可操作性和重现性。

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(编校：叶超)

OptimizationoftheExtractingTechnologyforJinchaiShihuBuccalTabletBasedonOrthogonalTest

AN Feng-juan1, HE Yu-xin*

(SchoolofFoodandBioengineering,XihuaUniversity,Chengdu610039China)

Taken the content of total polysaccharides and sapoins and the yield of dry extract as indicators, the extracting technology for Jinchai Shihu Buccal Tablet was studied based on orthogonal test. The optimal extraction conditions are as follows: 8 times of the extraction solvent, extracting one half hour and three times. Under optimum conditions, the content of total polysaccharides is 78.85mg/g, the content of total saponins is 4.87mg/g, dry extract yield is 18.43%.

total polysaccharides; total sapoins; orthogonal test; Jinchai Shihu buccal

2014-03-21

：何宇新(1976—)，男，教授，博士，主要研究方向为中药新制剂。E-mail:524225843@qq.com

R284.2

：A

：1673-159X(2015)03-0101-03

10.3969/j.issn.1673-159X.2015.03.021

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