蒙药红花中羟基红花黄色素A 在大鼠体内含量变化的实验研究△

娜仁满都拉 白梅荣 乌日汉 桂 荣

(内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028000)

红花Carthamus tinctorius L 是蒙药临床常用的药材之一。2004年版《中华本草.蒙药卷》中收载，具有凉血，锁脉，调经，清肝，强身，止痛，消肿作用［1］。大量资料显示［2-10］，羟基红花黄色素A 有良好的抗脑缺血、神经细胞保护作用，抗血小板和抗心肌缺血作用，抗凝血酶诱导的血小板聚集活性，抗炎活性，细胞保护活性，抗肿瘤活性。

本实验通过红花测定不同时间点大鼠血清和肝组织的羟基红花黄色素A 含量，以期为红花保肝作用的研究奠定基础。

1 材 料

1.1 实验仪器：LC-20AT日本岛津高效液相仪，包括UV检测器，二元梯度泵，LC soLusion 色谱工作站;TD4 -I 型离心机(长沙);BS 224S 型电子天平(北京赛多利斯仪器有限公司)。

1.2 试剂与药品：甲醇(天津市科密欧化学试剂有限公司);磷酸(分析纯，天津市天力化学试剂有限公司);红花(由内蒙古民族大学提供)。

1.3 实验动物：雄性SD 种大鼠40 只，体重为200 ±10g ，由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供，SCKK(吉)-2011 -0004。

2 方 法

2.1 样品采集：按体重将大鼠随机分为10 组，每组6 只，实验前禁食不禁水的条件下，按3.87g/kg 灌胃给予大鼠红花溶液，分别于灌胃后10min，30min，45min，1h，1.5h，2h，3h，4h，8h 以10% 水合氯醛麻醉大鼠，腹主动脉取血，3000r/min 离心10min，分离血清，同时取出肝组织，用生理盐水冲净组织表面血迹及内容物，拭干，装入自封袋中，-80℃保存，备测组织中指标性成分。

2.2 血清和组织样品的处理及其供试品溶液的制备：准确称取肝脏重量，按重量(g)：体积(mL)=1：4 的比例加入4倍体积的生理盐水，冰水浴条件机械匀浆，3000r/min，离心10 分钟，取上清液，待测备用。

分别取空白及10min，30min，45min，1h，1.5h，2h，3h，4h，8h 的含药血清和肝组织匀浆液各2mL，加甲醇4mL［11］，涡旋混匀30s，10000r/min 的条件下离心10min，取上清液，吹干，残渣以200μL 甲醇溶解，过0.22μm 微孔滤膜，25μL进样分析。

2.3 色谱条件：色谱柱为VenusiL MP C18 (4.6mm ×300mm，5μm)，柱温为30℃，流速为1mL/min;进样量25μL，流动相为甲醇(A)-0.7%磷酸水溶液(B)，检测波长为390nm。洗脱程序10% ～25%A(0 ～10min)，25% ～40%A(10 ～15min)，40% ～45% A(15 ～20min)，45% ～50%A(20 ～30min)，50% ～55% A(30 ～40min)，55% ～70%A(40 ～60min)，70% ～75% A(60 ～65min)，75% ～85%A(65 ～70min)，80% ～100%A(70 ～75)。

3 实验结果

3.1 大鼠肝组织中羟基红花黄色素A 含量分析：肝组织中已检测到羟基红花黄色A。10min 时最低，3h 时最高，8h时也能检测到羟基红花黄色素A，不同时间的峰面积详见下表1。

10min 30min 45min 1h 2h 3h 4h 8h峰面积19052 20492 46655 49342 58966 154119 30873 15739时间

3.2 血清中羟基红花黄色素A 含量变化分析：血清中已检测到羟基红花黄色A。10min 最低，1h 时最高，8h 检测不到羟基红花黄色素A，不同时间的峰面积详见下表2。

10min 30min 45min 1h 2h 3h 4h 8h峰面积时间30617 42770 76174 344282 172378 74388 43382 -

4 结论与讨论

红花具有保肝作用的蒙药材之一，蒙医学是以三根学说(赫依、希拉、巴达干)(近似中医的气、热、寒)解释机体生理和病理现象，而蒙药是蒙医防治疾病的有力武器。大部分蒙药材来源与中药材相同。蒙药主要以蒙医基础理论和蒙药药性理论为指导，在加工制作和用法上具备了蒙药特色。即蒙药以十七种效能来补偏救弊，调整机体内部的“三根”的偏盛和偏衰，可达到防病、治病和健身的目的。红花虽然是中蒙药通用的药材，但在蒙药药性理论和蒙医基础理论的指导下，在肝脏疾病的治疗中发挥着重要的作用。因而被誉为“肝脏之好”的美名。大量的临床资料也均证实，红花为君药的蒙药复方制剂是肝脏的急性和慢性疾病的首选药物。

传统药多为口服给药，给药后药物从给药部位吸收进入血液后，有循环系统运送到体内各脏器及靶点而达到药效目的。据文献报道，羟基红花黄色A 是保肝作用的主要成分之一，有效成分通过血液分布到各脏器或主要靶点，才能发挥作用并达到药效作用。本实验通过动态观察羟基红花黄色素A 在肝组织和血清中含量变化，为设计红花保肝作用的给药方案及临床合理用药提供参考，并为进一步系统研究红花保肝作用药效物质基础奠定方法和思路。

［1］国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草.蒙药卷［M］.上海：上海科学技术出版社，2004.

［2］王玉芹，杨树东，李家实，等.红花黄色素对血小板活化因子介导的中性粒细胞功能的影响［J］.北京中医药大学学报，2001，23(4)：21.

［3］臧宝霞，金鸣，司南，等.羟基红花黄色素A 对血小板活化因子的拮抗作用［J］.药学学报，2002，37(9)：696.

［4］田京伟，傅风华，蒋王林，等.羟基红花黄色素A 对脑缺血所致大鼠脑线粒体损伤的保护作用［J］.药学学报，2004，39(10)：774.

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［7］陈志强，王万强，叶秀云，等.红花注射液对脑缺血/再灌注损伤家兔血清白细胞介素IL8 的影响［J］.中国急救医学，2005，25(2)：118.

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［10］孙云帆，王皓晨，范伟强，等.羟基红花黄色素A 对四氯化碳急性肝损伤的保护作用［J］.山东大学学报，2009(8).

［11］王喜军.中药血清药物化学［M］.北京：科学出版社，2010：352 -353.