复方血栓通胶囊对下肢静脉血栓患者血清纤溶serpine1、α-serpine1蛋白及KLF2影响研究

张昌林，向勇，刘安德，徐菁昊，罗伍，龙双有

(贵州省安顺市人民医院 内镜科，贵州 安顺 561000)



复方血栓通胶囊对下肢静脉血栓患者血清纤溶serpine1、α-serpine1蛋白及KLF2影响研究

张昌林，向勇，刘安德，徐菁昊，罗伍，龙双有

(贵州省安顺市人民医院 内镜科，贵州 安顺 561000)

目的 探讨复方血栓通胶囊对下肢静脉血栓患者血清纤溶酶原激活物抑制剂(serpine1)、α-抗胰蛋白酶1(α-serpine1)蛋白及Kruppel样转录因子2(KLF2)的影响。方法 选取贵州省安顺市人民医院已确诊为下肢静脉血栓形成的患者44例，随机分为实验组和对照组，各22例，患者均给予常规抗血小板治疗，实验组在此基础上给予复方血栓通胶囊1.5 g/次，3次/天口服，对照组给予脉络舒通颗粒20 g/次，3次/天冲服。2周为1个疗程，治疗3个疗程。治疗前后检测2组患者血清serpine1、α-serpine1蛋白及KLF2含量、血液流变学、凝血功能指标。结果 与对照组比较，实验组患者的疗效更好，表现为：血清serpine1、α-serpine1蛋白含量显著降低(P<0.05)； KLF2表达量明显升高(P<0.05)；血液粘度、红细胞聚集指数、血沉速度明显降低(P<0.05)；FIB、D-D含量明显降低(P<0.05)。结论 复方血栓通胶囊可以降低下肢静脉血栓患者血清serpine1、α-serpine1蛋白含量，促进KLF2表达，降低血液粘度、血沉速度，改善患者的高凝状态，取得良好的临床疗效。

复方血栓通胶囊；下肢静脉血栓；纤溶系统

下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis，DVT)是临床常见疾病，是血液于深静脉腔内不正常的凝结，并阻塞静脉腔，导致下肢静脉回流障碍，多年来其发病率高达50%，在周围血管疾病中占40%左右[1]。欧美国家DVT发病率为1.0～1.6/1000[2]，近年来增加了33.1%，我国DVT的发病率目前认为稍低于欧美国家，但有逐年上升的趋势。DVT大多继发于手术、创伤、长期卧床、恶性肿瘤等疾病，容易引起肺栓塞等并发症[3]，严重危害人们的生命健康。目前，对于慢性DVT，现代医学多采用抗血小板抗凝药物，但此类药物容易引起消化道溃疡，导致消化道出血等发生，比较来说，中成药物的副作用较少。中医认为，DVT属于“股肿”、“脉痹”、“肿胀”的范畴[4]，与瘀血阻络有关，治疗应该活血化瘀为主。复方血栓通胶囊由活血行气的药物组成，具有活血化瘀的功效，已有研究显示具有活血化瘀，扩张血管，降低血黏度，促进血液循环，提高机体抗缺氧的能力抗血栓形成的作用，在糖尿病视网膜病变的治疗上取得了良好的临床疗效[5]；DVT也属于血栓形成性疾病，然而，目前关于复方血栓通胶囊治疗DVT的临床研究较少。因此，本研究通过对DVT患者血清serpine1、α-serpine1蛋白及KLF2、凝血功能、血流变的检测，探讨复方血栓通胶囊对DVT患者的影响及作用机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集贵州省安顺市人民医院2013年6月～2015年6月的确诊为下肢静脉血栓形成的患者44例。其中男性23例，年龄27～74岁，平均年龄(50.4±5.9)岁；女性21例，年龄25～75岁，年龄(52.2±6.1) 岁；临床类型中央型16例，周围型15例，混合型13例。

诊断标准：诊断依据根据2012深静脉血栓形成的诊断和治疗指南(第二版)[6]；排除标准：①病程<3周或病程>6个月；②伴有凝血功能障碍、再障等血液系统疾病；③合并恶性肿瘤；④合并严重的肝、肾功能衰竭或心脑血管疾病；⑤近期内服用任何抗凝药物；⑥妊娠及哺乳期妇女；⑦对研究中涉及药物过敏的患者。

1.2 方法

1.2.1 分组及治疗方法：将所有患者随机分为实验组和对照组，每组各22例。实验组男12例，女10例，年龄26～74岁，平均年龄(51.6±5.3)岁；对照组男性11例，女性11例，年龄25～75岁，平均年龄(52.1±6.4) 岁。2组患者的年龄、性别组成、临床类型、病程等一般资料无明显差异。所有患者均给予抬高患肢、卧床休息、镇痛、阿司匹林抗血小板聚集等常规治疗；实验组患者在常规治疗的基础上给予复方血栓通胶囊(广东众生药业股份有限公司，国药准字Z20030017)1.5 g/次，3次/天口服；在常规治疗的基础上给予脉络舒通颗粒(鲁南厚普制药有限公司，国药准字Z19991025)20 g/次，3次/天冲服。2周为1个疗程，治疗3个疗程。

1.2.2 血液指标采集：治疗前后，所有患者均采集空腹12小时后静脉血10 mL，取5 mL分离血清，采用临床检验科Rayto雷杜RT-6000全自动酶标仪，通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中serpine1、α-serpine1蛋白及KLF2的含量；其余5 mL血液，采用LBY-N6COMPACT全自动血流变仪(北京普利生)，检测血流变相关指标高切全血粘度、低切全血粘度、血浆黏度、红细胞聚集指数、血沉等；采用CA1500全自动血凝分析仪(希森美康)，测定血液纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)等凝血功能相关指标。

2 结果

2.1 治疗前后2组患者血清serpine1、α-serpine1蛋白含量比较 治疗后2组患者的血清serpine1、α-serpine1蛋白含量均降低(P<0.05)，实验组患者血清serpine1、α-serpine1蛋白含量与对照组比较较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 治疗前后2组患者血清serpine1、α-serpine1蛋白含量比较Tab.1 Comparison of serpine1，α-serpine1 in serum of two ±s)

*P<0.05，与治疗前相比，compared with before treatment；#P<0.05，与对照组相比，compared with control group

2.2 治疗前后2组患者血清KLF2水平比较 治疗后2组患者的血清KLF2表达水平均升高(P<0.05)，实验组患者血清KLF2表达量较对照组较高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 治疗前后2组患者血清KLF2水平比较±s)Tab.2 Comparison of KLF2 in serum of two ±s)

*P<0.05，与治疗前相比，compared with before treatment；#P<0.05，与对照组相比，compared with control group

2.3 治疗前后2组患者血液流变学指标比较 治疗后2组患者血液流变学指除对照组红细胞聚集指数外，其余标均降低(P<0.05)，与对照组比较，实验组患者血液粘度、红细胞聚集指数、血沉速度较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 治疗前后2组患者血液流变学指标比较±s)Tab.3 Comparison of the hemorheology of two ±s)

*P<0.05，与治疗前相比，compared with before treatment；#P<0.05，与对照组相比，compared with control group

2.4 治疗前后2组患者凝血功能比较 治疗后2组患者的凝血功能均明显好转，实验组患者血液FIB、D-D含量与对照组比较均明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 治疗前后2组患者凝血功能比较±s)Tab.4 Comparison of the coagulation function of two ±s)

*P<0.05，与治疗前相比，compared with before treatment；#P<0.05，与对照组相比，compared with control group

3 讨论

近年来，随着外科手术技术的不断发展，下肢静脉血栓作为常见的手术合并症发病率不断增加，下肢静脉血栓导致的静脉瓣膜功能不全及并发的肺栓塞时患者劳动力及生命安全的一大危险[7]，有学者认为80%～90%的肺栓塞栓子来源于下肢静脉血栓[8]，给人们的生命带来很大威胁，因此，积极防治下肢静脉血栓形成是研究的重点。现代医学对于下肢静脉血栓的治疗主要为溶栓、抗血小板、手术等手段[9]，但是溶栓易导致栓子脱落，手术价格昂贵又可形成重复损伤，均非万全之策，而中医在防治下肢静脉血栓形成中有自己的特色，值得深入研究。中医认为，下肢静脉血栓是由于瘀血阻于阴脉，痹着不通，血行受阻，不通则痛所致，属于“股肿”、“瘀血”、“脉痹”，治宜养阴行气，活血化瘀。复方血栓通胶囊由三七、黄芪、丹参、玄参组成[10]，三七能化癖止血、消肿定痛，黄芪可补气升阳，利水消肿，丹参功在活血凉血，玄参长于滋阴凉血解毒，诸药合用，有行气，活血，化瘀之效。研究表明[11]，复方血栓通胶囊具有抑制血小板聚集、扩张血管、改善内皮细胞功能等作用，具有抗血栓形成的功效。但是，目前关于复方血栓通胶囊治疗下肢静脉血栓的临床研究较少，因此，本研究对治疗前后下肢静脉血栓患者血清serpine1、α-serpine1蛋白及KLF2、凝血功能、血流变等指标进行检测，试图探讨复方血栓通胶囊对下肢静脉血栓患者的影响。

本研究结果发现，实验组患者血清serpine1、α-serpine1蛋白含量与对照组比较明显降低 (P<0.05)，提示复方血栓通胶囊能够使患者血清serpine1、α-serpine1蛋白含量降低。serpine1和α-serpine1都属于纤溶系统的成员，serpine1可以直接作用于内源性纤溶酶原激活物(PA)，降低PA活性，具有抑制纤维蛋白降解的作用，研究发现[12]，与健康者比较，未治疗的DVT患者serpinel水平显著升高；α-serpine1属于一种蛋白酶抑制剂，也可以作用于纤溶酶，具有抗纤溶作用。复方血栓通胶囊降低血清serpine1、α-serpine1蛋白含量，使得纤溶酶活性得到恢复，纤溶过程不受阻碍，可防止血栓形成。

KLF2是一种与血栓形成关系密切的转录因子，能够调控内皮抗凝基因eNOS等[13]，使其呈高表达状态，促进一氧化氮(NO)释放，抑制血小板活化、聚集，扩张血管，防止血栓形成；还能够通过抑制纤溶酶原激活物抑制剂-1来延长凝血时间，研究发现，KLF-2在大鼠DVT模型中出现显著下调，而在人血液中的表达情况类似。本研究结果显示，实验组患者血清KLF2表达量与对照组比较明显升高(P<0.05)，表明复方血栓通胶囊能够上调KLF-2基因的表达，发挥其扩张血管、抗血小板的作用。

血流变包括反应血液的流动性和粘滞性，高切全血粘度、低切全血粘度、血浆黏度和血沉体现了流动性，红细胞聚集指数体现了粘滞性[13]，这些指标数值上升表明血流缓慢，不能保证组织充足的血、氧供应，而且容易诱发血栓，本研究结果显示，实验组患者血液粘度、红细胞聚集指数、血沉速度与对照组比较均明显降低 (P<0.05)，表明复方血栓通胶囊能够改善血液粘度及血流速度，保持血流通畅。

FIB为纤维蛋白原，其浓度升高可以使血液粘度上升，损伤内皮细胞，利于血栓形成；D-D是纤溶过程的标记物，其水平增高与纤溶过程亢进有关，临床上，FIB和D-D同时升高，表明机体血液处于高凝状态，此时血液成分改变，凝血因子大量存在，各种原因引起的高凝状态是导致下肢静脉血栓形成的主要原因之一。本研究结果显示，实验组患者血液FIB、D-D含量与对照组比较均明显降低 (P<0.05)，表明复方血栓通胶囊能够降低血液中FIB、D-D含量，改善血液的高凝状态，防止血栓形成。

本实验通过对下肢静脉血栓患者血清serpine1、α-serpine1蛋白及KLF2、凝血功能、血流变进行检测分析，证实了复方血栓通胶囊可以降低下肢静脉血栓患者血清serpine1、α-serpine1蛋白含量，促进KLF2表达，降低血液粘度、血沉速度，改善患者的高凝状态，取得良好的临床疗效。在下一步研究中，将对本实验得出的结果进一步研究，探讨该结果出现的分子机制。

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(编校：谭玲)

Study on effect of Fufang Xueshuantong capsule on serpine1,α-serpine1 protein and KLF2 in patients with lower extremity venous thrombosis

ZHANG Chang-lin, XIANG Yong, LIU An-de, XU Jing-hao, LUO Wu, LONG Shuang-you

(Department of Endoscopy, The People’s Hospital of Anshun Province, Anshun 561000, China)

ObjectiveTo explore the effect of serpine1, α-serpine1 protein and KLF2 in patients with lower extremity venous thrombosis by Fufang Xueshuantong capsule.Methods44 patients were diagnosed with lower extremity venous thrombosis were collected, and randomly divided into experimental group and control group, 22 cases in each group, giving the conventional antiplatelet therapy, on the basis of this, the experimental group was given Fufang Xueshuantong capsule 1.5 g, three times a day orally, and the control group was given context Shutong granules 20 g, three times a day orally.2 weeks for a course of treatment, three courses of treatment.Before and after treatment in the detection of two groups of patients with serum serpine1, α-serpine1 KLF2 and protein contents, blood rheology, coagulation function, and carries on the analysis.ResultsCompared with the control group, experimental group patients has better curative effect, the performance of: serum serpine1and α-serpine1 protein content were significantly decreased(P< 0.05).KLF2 expression was significantly higher (P<0.05).Blood viscosity, erythrocyte aggregation index, erythrocyte sedimentation rate decreased significantly (P< 0.05).Fib, D-D content significantly decreased (P<0.05).ConclusionsFufang Xueshuantong capsule can reduce serum serpine1, α-serpine1 protein content and promote KLF2 expression, decrease the blood viscosity, erythrocyte sedimentation rate, improve patients with hypercoagulable state in patients with lower extremity venous thrombosis, so as to achieve good clinical efficacy.

Fufang Xueshuantong capsule; lower extremity venous thrombosis; fibrinolysis system

张昌林，男，本科，副主任医师，研究方向：下肢静脉血栓，消化，内镜治疗，E-mail：zcl956874@163.com。

R654.3

A

1005-1678(2015)07-0110-03