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可视化凝胶酶联免疫吸附分析法检测牛奶中庆大霉素和卡那霉素

2015-06-18徐飞栗静雅周洁刘茂林刘义明王建芬丁双阳李秀波

分析化学 2015年6期

徐飞 栗静雅 周洁 刘茂林 刘义明 王建芬 丁双阳 李秀波

摘 要 建立了牛奶中同步测定庆大霉素和卡那霉素的可视化凝胶ELISA方法。在凝胶检测柱的两个检测层中填充CNBr活化的Sephrose 4B凝胶羊抗鼠IgG作为固相载体,加入药物的单克隆抗体与载体结合,酶标抗原和待测样本中的药物共同竞争有限的单克隆抗体,通过3,3′,5,5′四甲基联苯胺(TMB)底物显色定性判断药物的存在。本方法采用一步法,检测时间仅为15 min,对庆大霉素和卡那霉素的灵敏度为2.0 μg/L,对牛奶中的两种药物检出限(Cutoff值)均为5 μg/L。牛奶盲样比对实验表明,本方法与超高效液相色谱串联质谱 (UPLCMS/MS) 法测定结果相符。

关键词 凝胶酶联免疫分析; 庆大霉素; 卡那霉素; 同步测定; 牛奶endprint