松弛素、盆底电生理与女性盆底功能障碍性疾病的相关性研究*

蔡柏岑 韩燕华 苏园园 石贺元 姚书忠

女性盆底功能障碍性疾病为中老年女性群体常见 病，以尿失禁及盆腔器官脱垂为主。根据相关资料调查结果，女性一生中出现盆底功能障碍性疾病的几率在11%左右，其中1/3患者修复手术次数超过1次[1-2]。目前，妊娠、绝经、阴道分娩、盆底肌肉薄弱、长期腹压偏大（肥胖，咳嗽）等被临床公认为该病最主要危险因素，此外营养性因素、医源性因素及遗传因素等也与该病有重要关系[3]。近年来，不少临床研究证实，松弛素、盆底电生理等与女性盆底功能障碍性疾病之间有着较大相关性[4-5]。本文选择本院收治行全子宫切除术妇科良性疾病患者进行研究，探析松弛素、盆底电生理与女性盆底功能障碍性疾病之间相关性，为疾病预防提供指导，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本次选择本院2012年5-8月收治的拟行全子宫切除术的妇科良性疾病住院患者100例进行研究，均经过详细盆底功能检查予以确诊。年龄34~56岁，平均（48.5±7.3）岁；体重54~73 kg，平均（64.5±12.4）kg；怀孕次数1~7次，平均（3.2±0.4）次。83例患者均已绝经，其中1例合并慢性咳嗽，4例合并糖尿病，8例合并便秘、痔疮，20例合并高血压，9例因工作原因需长期抬重物，均无吸烟史。其中4例为子宫内膜病变，7例为卵巢良性肿瘤，10例为子宫腺肌病，13例为盆腔脏器脱垂，66例为子宫肌瘤。13例行阴式全子宫切除，26例行腹腔镜切除，61例为开腹切除，平均手术时间（120.0±41.3）min，术中平均出血量（87.2±9.7）mL。

1.2 方法 于患者入院后了解基本病史并进行相关化验检查。术前1天行盆底POP-Q检测、常规妇科双合诊，同时手检盆底肌力明确盆底功能、盆腔脏器脱垂情况。

1.2.1 盆底肌力测定方法 应用广州杉山公司U8盆底康复治疗系统行盆底电生理检测并测定患者盆底肌力：将肌电位探头放进患者阴道内，另一端与治疗仪相连，记录测定结果。

1.2.2 血清采集方法 手术当天采集6 mL患者上肢静脉血，2000 r/min速度下离心20 min后保存于-80 ℃温度下待测。

1.2.3 组织标本收集方法 术中留取离体1 h内无菌组织标本，剪取子宫穹窿附近阴道壁组织，尽量选取未被电灼破坏部分，大小在1.0 cm×0.5 cm左右。若无多余阴道组织可剪取，可选择穹窿附近宫颈组织。生理盐水洗净剪取组织并将血液与杂质漂洗去，分成2个部分放置在冻存管中并尽量转移到液氮罐中保存。

1.2.4 血清松弛素H2的测定方法 用人松弛素H2（Relaxin H2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒测定血清松弛素H2。美国进口国内分装96孔及48孔各1组，试剂盒组成包括封板膜、密封袋、酶标包被板、1800 pg/mL标准品溶液、标准品稀释液、酶标试剂、样品稀释液、显色剂A液、显色剂B液、浓缩洗涤液及终止液。测定步骤：（1）稀释标准品与加样：酶标包被板上设10个标准品孔，在一、二孔中分别加入100 μL标准品，之后加入50 μL标准品稀释液后混匀。从一、二孔中各取100 μL溶液分别加入三、四孔，同时分别加入50 μL标准品稀释液后混匀，之后以此类推，最后在九、十孔中分别加入50 μL标准品稀释液混匀后各取50 μL弃掉。（即是说稀释后各孔加样量均为50 μL，浓度依次为1200、800、400、200、100 pg/mL）。（2）加样：分别设待测样品孔、空白孔，于待测样品孔中加入40 μL样品稀释液，之后加10 μL待测样品，确保加样样品不触及孔壁，混匀。（3）温育：封板膜进行封板，37 ℃温度下温育半小时。（4）配液：30倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释30倍备用。（5）洗涤：将封板膜揭掉，弃液体后甩干，孔内加满洗涤液，静置半分钟弃掉，重复5次，拍干。（6）加酶：除空白孔外每孔加入50 μL酶标试剂。（7）温育与洗涤：操作同上。（8）显色：每孔先加入50 μL显色剂A，之后加入50 μL显色剂B，震荡混匀后于37 ℃避光下显色15 min。（9）终止：每孔加入50 μL终止液以终止反应。（10）测定：用空白孔进行调零，加终止液15 min内450 nm波长依序测量各孔吸光度。之后计算标准物浓度、吸光度，绘制标准曲线并将样品吸光度代入方程中计算样品浓度乘以稀释倍数即可得到血清松弛素H2实际浓度。

1.3 判定标准 盆底肌力分级标准：肌肉收缩持续时间为0 s，肌力为0级，持续1 s为I级，持续2 s为Ⅱ级，3 s为Ⅲ级，4 s为Ⅳ级，5 s或以上为V级；盆腔器官脱垂分度参照POP-Q分度标准：脱垂脏器最远端位于处女膜内，距处女膜距离大于1 cm，为1度[6]；脱垂脏器最远端在处女膜边缘1 cm内，为2度；脱垂脏器最远端在处女膜外，与处女膜边缘距离超过1 cm但小于+（TVL-2 cm），为3度；下生殖道完全脱出，脱垂最远端超过+（TVL-2 cm），为4度。

1.4 统计学处理 使用统计学软件SPSS 19.0对所得数据进行分析与处理，计量资料以（x-±s）表示，比较采用t检验，计数资料用率（%）表示，比较采用 字2检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清松弛素H2水平与患者年龄及绝经情况相关性分析结果 83例绝经患者所测得血清松弛素H2水平为（157.4±263.9）pg/mL，17例未绝经患者为（212.9±355.8）pg/mL，差异无统计学意义（t=0.742，P=0.460）；患者年龄（X）与血清松弛素H2水平（Y）相关性回归方程为：Y=2.987X+22.118，R2=0.006，差异无统计学意义（P>0.05）。

2.2 不同盆腔器官脱垂分度患者松弛素水平的比较 轻度（1、2度）松弛素水平为（175.5±69.9）pg/mL，重度（3、4度）松弛素水平为（227.6±93.4）pg/mL（t=4.023，P=0.000），分度越高，血清松弛素水平越高，提示患者血清松弛素水平与盆腔器官脱垂分度存在一定相关性。

2.3 血清松弛素H2水平与盆底电生理各参数相关性分析结果 患者血清松弛素H2水平与POP各径线、盆底肌力等参数之间无明显相关性，见表1。

表1 血清松弛素H2水平与盆底电生理各参数相关性

3 讨论

盆腔器官脱垂主要原因为盆底支持结构缺陷、损伤进而导致功能障碍所造成，近年来有临床研究针对其与盆底功能障碍性疾病展开分析，以妊娠期及产后妇女作为研究对象，证实松弛素与女性盆腔脏器脱垂存在一定相关性。国内妇产科中，RLX相关研究也均与妊娠有关[7]。例如，有学者对比盆腔器官脱垂患者与正常妇女，发现前者血清松弛素质量浓度为（406.7±311.2）ng/L，明显比对照组（199.4±208.7）ng/L更高（P<0.05），同时绝经女性血清松弛素质量浓度为（172.0±197.5）ng/L，也明显比未绝经妇女（587.5±716.8）ng/L更高（P<0.05）[8]。

松弛素在体内广泛分布，为参与多种功能调节活性多肽，具有抗纤维化、稳定心血管系统环境、抑制肺胶原沉积、促进子宫新生血管形成、促进肌肉再生及抗炎等作用，松弛素与其受体耦联可在盆底胶原降解过程中发挥主导作用，加快机体阴道胶原降解速度，胶原含量降低之后就会引发阴道壁松弛，支持作用随之减弱，终而引发盆底功能障碍性疾病[9-10]，这是不少临床专家认为其与盆底功能障碍性疾病存在相关性理论基础。而有关研究显示，孕晚期血清松弛素水平与产后盆底肌综合肌力存在一定相关性[11]，检测产后妇女进行盆底肌肉肌力后予以盆底康复治疗，治疗后康复组盆底肌力复测结果显示，Ⅰ、Ⅱ类肌纤维正常率显著高于对照组[12]。但本研究中，绝经与未绝经女性之间血清松弛素水平的比较并无显著差异，且患者年龄与血清松弛素H2水平之间也无显著相关性。但在盆腔器官脱垂分级方面存在一定相关性，其中轻度（1、2度）脱垂患者松弛素水平显著低于重度（3、4度），分度越高，血清松弛素水平越高。另外，血清松弛素H2水平与患者盆底电生理Aa、Ba、C、GH、PB、TVL、肌力深Ⅰ、肌力深Ⅱ、肌力浅Ⅰ、肌力浅Ⅱ等各参数逐一进行分析，发现两者之间也无显著相关性。

这一结论与其他研究结果有所不同，推测原因有以下几种：（1）血清松弛素水平与妊娠有密切关系，孕期及非孕期患者该激素水平存在较大差异，可比性低。（2）盆底功能障碍性疾病致病因素较多，单独用血清松弛素水平进行评估难以获得想要结果。（3）样本本身盆腔脏器脱垂程度、BMI的不同也可能影响实验结果[13-14]。

综上所述，松弛素及盆底电生理与盆底功能障碍性疾病之间无显著相关性，无法全面反映患者盆腔松弛程度，但与患者盆腔器官脱垂分度有一定关系，需进一步行大样本研究予以证实。

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