对环磷腺苷葡胺注射剂含量测定方法的探讨

赵悦辉 周立云

摘 要：本文主要对环磷腺苷葡胺注射剂中的有效成分含量进行了测定，因此，本文重点对环磷腺苷葡胺注射剂含量测定方法进行了探讨分析，从而总结出以下相关结论，以供参考交流。

关键词：环磷腺苷葡胺；注射剂；含量；测定方法

中图分类号：R927 文献标识码：A

环磷腺昔注射剂是我国研发出的一种新型制剂，在国外并不任何相关产品以及标准体系。在环磷腺苷葡胺注射剂中，主要存在了两种单一的化合物，一种是环磷腺昔，另一种则是葡甲胺，在目前环磷腺苷葡胺注射剂的制剂说明书中，生产厂家已经明确标识出了该类制剂中的主要成分是环磷腺苷葡胺，我国现行相关规范标准中已经对环磷腺苷葡胺含量有着明确的规定，普遍认为葡甲胺和环磷腺芬为同一类的化合物，同归对目前含量测定方法进行研究分析之后，从而提出更加准确、高效的含量测量计算方法，充分保障测定结果的精确合理性。

1 检验目的

我们在对产品质量进行检查分析过程中，发现以下几点问题：第一，在对制药企业进行调研时，观察到各制药企业普遍是将环磷腺苷和葡甲胺作为生产原材料，通过按照一定量的比例投入生产，其中，并没有任何一家制药企业将单独的环磷腺苷葡胺作为原料。第二，目前我国尚未存在关于环磷腺苷葡胺的理化性质的研究文献。因此，针对这一点问题，我们需要对现行环磷腺苷葡胺注射剂含量的测定方法进行考察，得出葡甲胺和环磷腺苷在色谱条件下产生的色谱行为，同时判断出使用的含量计算方法是否准确。

2 仪器与试剂

Waters 2695液相色谱仪，配2487紫外检测器与2414示差检测器；Sartorius BP211D电子天平；Sartorius PB一21。环磷腺昔标准品来自中国生物制品检定研究院，葡甲胺、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、氨水、磷酸、构株酸、冰乙酸、氢氧化钠、三乙胺、四丁基澳化按等来自市售分析纯，乙睛、甲醇为市售色谱纯，水为纯化水。环磷腺昔葡胺注射液与注射用环磷腺昔均为市场抽验获得的上市药品。

3 方法

3.1 色谱条件

本次环磷腺昔葡胺制剂抽验涉及到的现行标准检验标准共29份，其中23份采用H PLC法，流动相种类共有10种视表。用一八烷基硅烷键介硅胶为填充剂采用紫外检测器与示差检测器串联，检测波长为257nm或259nm，柱温30℃。

3.2 供试品溶液的配制

精密称取出适量的环磷腺和葡甲胺，其中，环磷腺苷将作为对照品。通过加水之后，制成相应比例的溶液，用作定位。然后，分别称取适量的环磷腺苷葡胺注射液，加水制成含有环磷腺苷成分的溶液，作为供试品溶液。

4 结果

在对环磷腺苷葡胺注射剂含量进行测定时，通常都会采用液相色谱法，我们在对检测器色谱图示差进行查看过程中发现，葡甲胺与环磷腺苷有着单独的色谱峰。并且，在所有的流动相体系中，也并未出现过单独的无环磷腺苷葡胺色谱峰，以下重点列举了环磷腺苷葡胺色谱峰的流动相图，如图1、图2、图3所示。

5 讨论

环磷腺苷属于一种蛋白激酶致活剂，并且具有易用于水的物理性质，我国相关医药学家在对环磷腺苷葡胺注射液进行深入分析之后，重点对其溶解性问题进行了改善。并在后期的临床应用过程中将环磷腺苷葡胺上市，其中主要是将环磷腺苷当做对照品，同时对环磷腺苷葡胺注射剂中的环磷腺苷葡胺含量进行准确的计算，具体表现在以下几个方面：

（1）由于环磷腺苷易于在水中微溶，但在加入少量的葡甲胺之后，对溶解性问题进行了有效的抑制，使其理化性质产生了明显的变化，因此使得相关研究人员误认为生成了新的化合物。而葡甲胺属于一种增溶剂，可以加大环磷腺苷的溶解浓度，这是因为当葡甲胺浸泡在水溶液中时，将会与环磷腺苷迅速结合在一起，从而形成复盐。但是，以往内这两者的结合较为松散，很难形成稳定性较高的化合物，因此无法获取的高纯度的环磷腺苷和葡甲胺反应固体成品。

（2）在反向的色谱条件下，葡甲胺并未产生任何紫外信号，也没有保留反相色谱柱。所以，在对液相色谱方法学进行建立时，若是将十八烷基键合硅胶柱当做主要的分析柱，紫外检测器一般无法采集到紫外检测器环磷腺苷葡胺注射剂中有关葡甲胺的信息。这就导致很多实验研究人员认为制剂中的环磷腺苷峰就是环磷腺苷葡胺峰。并将现行的环磷腺苷作为对照品，同时计算出环磷腺苷葡胺含量。

从上面的检测结果中我们可以看出，当前很多含量测量方法是将环磷腺苷作为对照品，而采用环磷腺苷葡胺含量的计算方法并不合理，需要分别对环磷腺苷和葡甲胺进行计算。

参考文献

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