阴道分泌物五联卡与常规手工检测BV的联合应用*

2015-05-16廖新梅

中国医学创新 2015年34期

廖新梅

阴道炎是一种妇科常见的疾病，正常健康妇女阴道由于解剖组织的特点对病原体的侵入有自然防御功能。例如阴道口的闭合，阴道前后壁紧贴，阴道上皮细胞在雌激素的影响下的增生和表层细胞角化，阴道酸碱度保持平衡，使适应碱性的病原体的繁殖受到抑制，而颈管黏液呈碱性，当阴道的自然防御功能受到破坏时，病原体易于侵入，导致阴道炎症。健康妇女阴道的酸碱度能保持平衡，阴道闭合状态良好，其自然防御机能也未遭到破坏。然而患有阴道炎的妇女阴道酸碱度失衡，从而无法抵御病原体的侵入，造成致病菌在体内大量繁殖[1]。长期患有阴道炎而未得到较好的治疗会影响妇女的身心健康，大大降低了妇女的生活质量和家庭的和谐[2]。对患者造成巨大的伤害。为此，及时检测出妇科炎症的症状对患者的治疗具有非常大的价值。常规的手工检测方法即湿片检测法，该检测手段对于滴虫菌以及念珠菌等引导病原体有较高的诊断价值，然而手工操作较为复杂，其诊断准确率容易受到检测者的自身水平影响[3]。若检测人员的专业水平欠佳，或因涂片均匀度、显微镜质量等客观因素造成较高的漏检率，不利于病情的及时诊断及治疗[4]。本次研究主要通过选取本院门诊进行阴道分泌物检测的286例女性患者作为研究对象，探讨阴道分泌物五联卡与常规手工检测的联合应用的临床价值，其具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2014年2月-2015年2月于本院门诊进行阴道分泌物检测的286例女性患者作为研究对象。分别对患者进行常规手工检测（A组）、阴道分泌物五联卡检测（B组）以及联合两种检测（C组）。其中A组患者年龄23~58岁，平均（37.6±4.6）岁；B组患者年龄24~53岁，平均（38.7±4.6）岁；C组患者年龄25~56岁，平均（39.1±3.6）岁。所选患者均主诉以白带增多、有异味、外阴瘙痒为主，用无菌拭子取阴道后穹隆分泌物，经期、性生活后以及行阴道灌洗后的标本除外。所有患者年龄、病程等基本情况均无统计学差异（P>0.05），具有可比性。所有患者均对本组研究内容充分知情，并在入组前自愿签署知情同意书，符合伦理学原则。

1.2 标本采集所有受检者均采用无菌拭子于阴道后穹隆处进行分泌物的采集，排除患者经期、行阴道灌洗后以及性生活后采集的样本，将纳入样本及时交由检验科进行检测。

1.3 试剂来源阴道五联卡检测试剂盒选取郑州安图绿科生物工程有限公司生产产品，严格依照使用说明书进行白细胞酯酶、过氧化氢、pH、唾液酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶以及脯氨酸苷酶的检测[5]。

1.4 检测方法

1.4.1 BV诊断标准采用Amsel临床诊断标准：（1）阴道的分泌物比较稀薄均匀；（2）阴道分泌物pH>4.5；（3）胺试验呈现阳性；（4）线索细胞。以上四项只需具备3项即可诊断为细菌性阴道炎，BV感染一般表现为白色或灰白色的分泌物。

1.4.2 常规手工检测采用Donders等提出的湿片法进行诊断，将分泌物滴加在载玻片上，用盐水进行稀释，再用×40倍的高倍镜观察分泌物中的乳酸杆菌、白细胞、背景菌落以及基地旁细胞等，再对观察项目的分级进行评分，若达到3分以上，则可诊断为需氧性阴道炎[6]。

1.4.3 阴道分泌物五联卡检测依据试剂盒使用说明书进行操作，首先，将6~8滴稀释液滴入试管中，将带有阴道分泌物的无菌拭子置入试管中，待分泌物充分溶于稀释液后取出拭子。再将液体摇匀，并使用加样滴管分别在联检卡上的每个孔内滴入1滴溶液，同时需将显色液滴加在唾液酸苷酶孔内[7]。保持37 ℃的温度，并于1 min后进行pH值的观察。将终止液滴加在乙酰氨基葡萄糖苷酶孔内，根据比色卡来进行结果的读取。将检测结果输入实际配套软件中进行统计分析。

1.5 观察指标（1）分别比较两种检测方式下白细胞、乳酸杆菌、滴虫菌、念珠菌以及BV的检出率。（2）比较五联卡检测与显微镜检测BV的符合率。

1.6 统计学处理所有数据均使用SPSS 17.0软件进行统计分析，计量资料用标准差（s）表示，计量资料组间比较采用独立样本t检验，计数资料以百分率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3种检测方式检出率的比较 A组和B组的白细胞与BV检出率均显著低于C组，比较差异具有统计学意义（P<0.05），而在乳酸杆菌、滴虫菌以及念珠菌的检出率上比较差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

表1 三组检测方式检出率的比较例（%）

2.2 不同检测方法对BV诊断结果的比较五联卡检测与显微镜对BV的检测结果符合率为77.0%（57/74），组间差异无统计学意义（字2=3.165，P>0.05），见表2。

表2 不同检测方法对BV诊断结果的比较例

3 讨论

细菌性阴道炎BV主要是阴道内厌氧菌的混合感染导致的阴道微生态失衡，通常表现出白带增多、白带带有鱼腥臭味以及外阴部位的瘙痒等症状[8]。阴道通常具有较多种类的厌氧菌，依据不同的病菌种类，又可将其分为棒状杆菌阴道炎、嗜血杆菌性阴道炎、加特纳菌性阴道炎等[9]。这类病菌感染可通过公共环境中的坐便器、浴池、卫生纸等进行传播，还可经由性接触传播，是临床常见的妇科病症之一。有资料统计，女性细菌性阴道炎的发病大约有10%源于男性的病症传播。该疾病可引起较高的宫颈炎、盆腔炎等疾病，甚至会造成患者的不孕病症。给患者带来了巨大的伤害。因此，为了避免病情的进一步恶化，需及时进行诊断并采取及时的治疗[10]。部分妇女错认为经常进行抗生素或药用溶液对阴道的清洗可减轻阴道炎症，然而过度使用药物则会导致阴道内的酸碱平衡紊乱，反而增加了细菌性阴道炎的可能性[11]。有研究对785例阴道炎患者进行了检测，结果显示AV感染率为13.0%，BV感染率为64.7%，合并BV+AV感染率为11.2%，其他类型感染率为46.5%，可见BV感染为最常见的阴道炎感染[12]。还有研究发现BV检测阳性率高达24.9%，患病率偏高；BV感染通常会引起剖宫产产妇的产褥感染发病率，严重威胁妇女的身体健康。例如由BV导致的患者早期流产现象主要是因为大量的厌氧性细菌产生过多的磷脂酶A2，导致子宫内局部细胞组织的磷脂分解，前列腺素的合成增加[13]。目前医学中在AV、CV等感染的研究方向偏多，因此常会忽略了BV的检测和治疗，为了保障妇女的优质生活，BV的检测与治疗同样不可忽视。为了降低妇女的BV感染，缓解其临床病症，需及时进行阴道分泌物的检测。临床上通常将pH试验、如染色镜检线索细胞、湿片镜检等检测方法作为主要的诊断标准，然而这类常规的手工检测手段却存在较大的局限性[14]。pH检验的敏感性及敏感性均有限，染色镜检线索细胞也容易受到样本材料的客观影响，此类检测手段均依靠工作人员的手工完成，操作熟练度以及专业操作水平均是影响检测结果的重要因素，大大影响了检测结果的准确性[15]。而五联卡检测法主要是通过阴道分泌物分别在白细胞酯酶、过氧化氢、pH、唾液酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶以及脯氨酸苷酶下的检测。白细胞酯酶是阴道宿主细胞反应酶的标志物，常存在于粒细胞内，只有在受到细菌侵袭时才会得到释放；过氧化氢一般可起到维持阴道微环境稳定的作用，其指标水平与乳酸杆菌成正比；唾液酸苷酶是在阴道受到BV感染时出现的一类胞外酶，其含量会随病菌数量的增加而上升，可通过测量该指标的含量来评估病菌在阴道内的繁殖状况；乙酰氨基葡萄糖苷酶属于念珠菌特异性酶，其指标水平直接反应了念珠菌的感染情况；脯氨酸苷酶的指标水平可在加德纳菌或动弯杆菌的侵蚀下发生一定程度的改变。总而言之，五联卡检测法是通过阴道分泌物与试剂之间的相互作用来进行阴道炎的评估，该诊断措施操作简单，无需手工进行，且用时较短，规避了检测员的主观因素以及样本、设备等客观因素对其诊断准确率的影响，大大提高了诊断的特异性及敏感性。

徐建英等[16]对1015例妇女的阴道分泌物进行了检查，并对检查结果进行了统计学分析，分别采用五联卡试剂以及传统的湿片镜检方法对患者的阴道分泌物进行检测，对白细胞、念球菌以及细菌性阴道炎的检出率进行比较，其中五联卡检测对于乳酸杆菌的检测率为99.6%，对白细胞的检出率为89.0%，对细菌性阴道炎的检出率为99.6%，对滴虫性阴道炎的检出率为97.1%，相较于传统的手工检测法，五项指标同时检测可更加全面的反应阴道的感染情况，同时，将检测结果输入配套的软件系统，可直接进行智能分析，并打出检测报告，效率更高，具有较高的临床推广价值。五联卡中的试剂过氧化氢可在检测中充分反应阴道内乳酸杆菌的生态情况，可直接观测阴道的微生态环境是否存在异常。由于细菌性阴道炎BV的部分厌氧性细菌存在较高的唾液酸苷酶活性或脯氨酸氨基肽酶活性，据大量临床学者的研究发现，在漏检的BV中大约11.4%具有唾液酸苷酶活性，大约4.6%具有脯氨酸氨基肽酶活性。若采用多种酶联合的检测，例如采用五联卡进行检测，可以更加全面的诊断及判定BV病症，及时对患者做出适当的治疗方案。秦泽鸿等[17]对143例妇女的阴道分泌物分别进行了五联卡与传统检测方法的对比研究，结果可见五联卡对于BV、白细胞以及念球菌的检出率均明显高于传统检测组，可见五联卡的检测较传统的检测方式具有十分明显的优势，大大提高了病菌阳性率的检出率，在两种检测方式联合应用的情况下可提高阴道炎病原体诊断的准确性。

本次研究通过对286例门诊妇科检测的患者作为研究对象，分别对患者进行了3种检测方式的对照实验，结果常规手工检测时的白细胞与BV检出率均显著低于阴道分泌物五联卡与常规手工联合检测的检出率，而在乳酸杆菌、滴虫菌以及念珠菌等病菌的检出率上比较差异不显著。可见采用阴道分泌物的五联卡检测大大提高了BV阴道炎的检出率，有助于患者及时采取相应的治疗措施，避免病情的进一步恶化。同时，为了探究常规手工检测与阴道分泌物五联卡检测的优劣性，对两种检测手段的检测结果进行了对比分析，结果五联卡检测与显微镜对BV的检测结果符合率为77.0%（57/74），组间差异无统计学意义，然而五联卡检测与联合检测结果的符合率为94.9%（74/78）。由此可见，五联卡检测的符合率更高，更有利于疾病的诊断及治疗，有效降低了BV感染的漏诊率。

综上所述，阴道分泌物的五联卡检测与常规手工检测的联合应用可明显提高BV感染的诊断准确性，并且操作简便，精确度高，对于妇科炎症的治疗具有显著价值，值得临床积极推广。

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