藏药牙膏配方工艺与抗炎作用研究

许凉凉 伊 辛 尹雪雁 魏文浩 蔡程科

(1北京中医药大学中药学院，北京，100102;2北京中医药大学研究生院，北京，100029)

牙膏作为人们的生活日常用品，在清洁口腔、预防口腔疾病中有着重要的作用。目前功效性牙膏越来越受到人们的青睐［1-2］，它既起到了普通牙膏的清洁作用，又对口腔疾病如牙龈炎等起到一定的预防和治疗作用［3-4］。

我国中药资源丰富，诃子、寒水石、白矾等主要分布于云南、西藏等地，是当地的常用藏药。诃子具有涩肠止泻、敛肺止咳、降火利咽之效，在藏药中甚至被视为“药中之王”，民间多用于口腔等多种疾病的治疗，现代药理学研究表明，其具有广泛的抗菌和抗炎镇痛作用［5-6］，部分研究表示酚酸类、黄酮类、三萜类是诃子药理活性的主要有效物质［7］。寒水石为碳酸盐类矿物方解石族方解石或硫酸盐类矿物红石膏的矿石，在西藏地区使用的寒水石一般为碳酸盐类矿物方解石的晶体［8］，具有清热降火、利窍、消肿，治积热烦渴、齿衄、烫伤等，治疗牙齿内出血等［9］。白矾性寒，味酸涩，具有祛痰、燥湿止血、止泻功效，经研究证明其具有消炎、止血、抑菌等药理作用，临床上可用于口疮等疾病的治疗［10-11］。该方来源于著名藏医学家，藏学五明学大师局麦彭朗杰嘉措文集，该文集是目前藏区乃至全世界的藏学界最珍贵的文集，藏医典籍里关于牙的保健、卫生、防治害虫等方面有了很丰富的具体内容，但目前藏区没有成熟的藏药牙膏产品，所以本实验室利用本方抗菌、消炎止血的作用，将其提取物与牙膏体系结合制成藏药牙膏。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 仪器 IKA-RT1010点加热磁力搅拌器(广州仪科实验室技术有限公司);IKA RW 20 digital机械搅拌仪(广州仪科实验室技术有限公司);DT-200A电子天平(常熟市金羊砝码仪器有限公司);00000249万分之一电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);制膏机(自主设计制作)

1.1.2 药品与试剂 诃子(西藏林芝采集，经西藏藏医学院尼玛次仁教授鉴定为使君子科植物诃子(Terninaliachabula Retz)的干燥成熟果实);白矾(西藏林芝采集，经西藏藏医学院尼玛次仁教授鉴定为硫酸盐类矿物明矾经加工提炼制成);寒水石(西藏林芝采集，经西藏藏医学院尼玛次仁教授鉴定为南寒水石);二氧化硅(磨擦型，牙膏级，山东省寿光市昌泰微纳化工厂，批号20130611);非离子瓜尔胶(食品级，河南冠华化工产品有限公司，批号20130613);山梨醇(食品级，北京市津同乐泰化工产品有限公司，批号20131105);甘油(分析纯，北京化工厂，批号20140106);十二烷基硫酸钠(K12，分析纯，天津市福晨化学试剂厂，批号20130325);尼泊金乙酯(分析纯，天津市福晨化学试剂厂，批号20130517);尼泊金丙酯(分析纯，天津市福晨化学试剂厂，批号20130517);糖精钠(食品级，天津长捷化工有限公司，批号20121203);薄荷油(药用级，安国市天下康制药有限公司，批号20131122);去离子水;二甲苯(分析纯，北京化工厂，批号20120312);云南白药牙膏(薄荷清爽型，云南白药集团股份有限公司，批号20131009);藏药(诃子浸膏、结血蒿浸膏、白矾、寒水石、结血蒿挥发油溶于50 mL去离子水中，相当于同等质量藏药牙膏配方中添加的药量3.3 g)，藏药牙膏(批号20140329)，空白基质牙膏(批号20140328)，均由本实验室自制。

1.1.3 动物 健康昆明种小鼠，体重:18～20 g，雄性，SPF级，均由北京中医药大学实验动物中心提供，许可证号:SCXK(京)2011-0004。试验前于实验室适应性饲养7 d。按组分笼饲养鼠颗粒饲料，每笼10只，自由进食进水。

1.2 方法

1.2.1 配方工艺研究

1.2.1.1 配方原料的选择 藏药牙膏配方的主要原料为:磨擦剂用二氧化硅;粘合剂用非离子瓜尔胶;发泡剂用十二烷基硫酸钠;保湿剂用甘油和70%山梨醇复配;甜味剂用糖精钠;香精用薄荷油;防腐剂用尼泊金乙酯和尼泊金丙酯;功效成分添加剂藏药(诃子、白矾、寒水石等)。通过预实验研究发现影响牙膏成型的因素主要为磨擦剂、增粘剂、保湿剂等的配比，因此试验设9个配方比如表1所示，调整甘油、山梨醇、非离子瓜尔胶、二氧化硅的加入量，制备成藏药牙膏。

1.2.1.2 制备工艺 称取非离子瓜尔胶，加入甘油、70%山梨醇，置磁力搅拌器上搅拌，调节温度75～85℃，使其均匀分散，再加入水溶液(糖精钠、部分藏药浸膏、白矾、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯预先分散于去离子水中)，搅拌使胶溶，贮存陈化2 h。在300 r/min机械搅拌下加入二氧化硅、寒水石、K12，再调节转数在650 r/min搅拌2 h，加入薄荷油，在真空下高速搅拌30 min，贮存陈化。

表1 藏药牙膏配方

1.2.2 二甲苯致小鼠耳肿胀实验［12］分组和给药:取昆明种小鼠50只，随机分成5组，每组10只，分别为模型组、牙膏空白基质组、阳性组(云南白药牙膏)、藏药牙膏组、藏药组。于小鼠右耳两面涂以二甲苯，每只50μL致炎，左耳不加处理作自身空白对照，30 min后牙膏空白基质组、阳性组、藏药牙膏组分别在右耳涂以相对应的牙膏约每只0.1 g;藏药组在右耳涂以藏药每只约0.05 mL。模型组致炎，90 min后脱颈椎处死小鼠，其他组涂药1 h后脱颈椎处死小鼠，擦净耳部所涂药物，沿耳廓基线剪下两耳，用6.5 mm打孔器冲下左右两耳同一部位的圆片，于分析天平称重，精确到0.0001 g。用右耳片重量减去左耳片重量为肿胀度，计算肿胀抑制率。

肿胀抑制率=(空白对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/空白对照组平均肿胀度×100%

1.2.3 统计学方法 采用SPSS 16.0统计软件进行处理。肿胀度用(¯x±s)来表示，组间比较采用方差分析，P＜0.05时，差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 最佳配方 采用感官评价法［13-14］进行评价，以外观性状、拉丝现象为评价指标。由表2可知，牙膏的拉丝现象受瓜尔胶用量的影响最大，其次二氧化硅、甘油、山梨醇的用量对其也有一定的影响;保湿剂甘油和山梨醇的用量对膏体的光滑细腻程度影响最大。9个配方中配方9效果最好，制备所得的藏药牙膏膏体细腻光亮，呈半透明棕绿色，气味清凉，黏稠度适中，拉丝现象较明显。

表2 藏药牙膏不同配方的感官评价

2.2 抗炎作用实验结果 由表3可知，藏药牙膏组、云南白药牙膏组、藏药组与模型组相比，均能抑制二甲苯引起肿胀的作用(P＜0.01)，其中藏药牙膏组、藏药组抗炎效果优于云南白药牙膏组;牙膏空白基质组与模型组相比，差异无统计学意义(P＞0.01);藏药牙膏组与牙膏空白基质组相比，差异具有统计学意义(P＜0.01)，对小鼠耳肿胀具有良好的抑制作用。

表3 藏药牙膏对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用(¯x±s，n=10)

3 讨论

实验结果表明，粘合剂的用量对于牙膏的拉丝现象具有至关重要的影响，加入量应合理，过少膏体疏松松散，不成形，过多则膏体过于黏稠。当确定了粘合剂的用量的情况下，通过调节保湿剂和水、磨擦剂的用量也可对膏体的黏稠度进行调整。同时应注意K12和香精的加入量，K12加入会使膏体稠度减小，但是香精的加入会使膏体的黏稠度增加且影响发泡量，因此两者的加入量也应该加以考虑，通常两者加入量比为2∶1［15］。本实验最佳配方为甘油20 g、山梨醇40 g、二氧化硅22 g、非离子瓜尔胶0.7 g、藏药3.3 g、薄荷油1.1 g、十二烷基硫酸钠(K12)2.2 g、尼泊金乙酯0.1 g、尼泊金丙酯0.05 g、糖精0.35 g、水适量。制备所得的藏药牙膏膏体细腻光滑，呈半透明深棕色，气味清凉，黏稠度适中。

二甲苯致小鼠耳肿胀抗炎实验结果表明，所研制的藏药牙膏与云南白药牙膏对比，抗炎效果优于云南白药牙膏，具有良好的抗炎作用。藏药牙膏与藏药对比2组的抗炎作用没有统计学意义(P＞0.05)，而藏药牙膏与牙膏空白基质对比抗炎作用的差异具有统计学意义(P＜0.01)，说明所添加的功效成分藏药与牙膏体系具有良好的配伍性，牙膏基质不会对藏药的功效成分产生影响。

我国医学历史悠久，拥有着丰富的防治口腔疾病的经验，中药牙膏将中药与牙膏相结合是我国牙膏产业的一大特色，也是对祖先宝贵的防治口腔疾病经验的弘扬［16-18］。本实验室将诃子、白矾等藏药与牙膏体系结合，研制成藏药牙膏，使其能达到清洁口腔作用的同时能够预防牙龈炎等口腔疾病。根据前人的研究发现，诃子对口腔致病菌如变形链球菌等有着良好的抑制作用和抗糖蛋白的黏附作用［19-20］，因此本实验室也将进一步对所研究制备的藏药牙膏进行抗菌实验的研究。该研究制备的藏药牙膏是对祖先宝贵的治疗口腔疾病经验的弘扬，也是对现代中药的发展，具有广阔的市场发展前景。

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