尿液自动化分析复检规则的验证

陆清兰

(武夷山市立医院检验科，福建 武夷山354300)

尿液分析是对尿液中的某些化学和有形成分进行定性和定量检测，有助于泌尿系统疾病的诊断和病情监测[1，2]。随着自动化尿液检测技术的不断更新，尿液分析的参数也越来越多，如化学成分参数、有形成分参数等[3，4]，由于尿液标本的复杂性和自动化分析方法学的局限性，目前临床实验室使用的尿液自动化分析存在很多影响因素，导致检测结果出现假阳性或假阴性，必须用人工显微镜进行复检，并应该建立联合镜检规则[5]，以提高尿检结果的准确性，同时减少复检率，提高工作效率。本实验室制定了适合本实验室实际情况的尿常规分析的复检规则，并对该复检规则的有效性进行验证，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料 随机收集2014年6-7月本院门诊标本943例，住院标本708例，共1651例。所有标本均在2h内按标准化操作完成检测。

1.2 仪器和试剂日本爱科来AX-4280干化学分析仪和Sysmex公司UF-500i尿沉渣分析仪及配套的试剂、质控品和校准品；奥林巴斯CX21光学显微镜。

1.3 方法

1.3.1 仪器法 分别用AX-4280干化学分析仪和UF-500i尿沉渣分析仪对尿液进行分析。仪器法的操作步骤严格按照AX-4280干化学分析仪和UF-500i尿沉渣分析仪的标准操作规程。

1.3.2 显微镜检查 按《全国临床检验操作规程》第3版[6]推荐的尿沉渣离心沉淀检查法，取10ml新鲜尿液加于离心管中，以400G相对离心力离心5min，取0.2ml尿沉渣，轻摇离心管，使尿沉渣有形成分充分混匀，取尿沉渣0.02ml滴在载玻片上，用18×18mm的盖玻片覆盖，所有标本均在2h内检查完毕，显微镜检查由经验丰富的技师分析。

1.3.3 复检规则的建立的原则 按CNAS-CL41要求假阴性率<5%的标准；且能够符合实验室实际情况，复检率控制在30%左右；并参考其他实验室的经验制定标准，制定本实验室的复检规则如下：(1)规则一：当尿沉渣中WBC、RBC、分别与尿干化学LEU、BLD出现阴阳性不一致或且散点图异常时；(2)规则二：尿沉渣中出现管型、真菌、结晶、小圆上皮细胞中任一项出现阳性时；(3)规则三：临床医生提出要求者需镜检时。其他则为阴性标本无需镜检。

1.3.4 复检规则的验证 按照《临床检验操作规程》第2版[7]规定的RBC≥3个/HP，WBC≥5个/HP，CAST≥1个/LP为对应项目镜检阳性标本，真菌、结晶、小圆上皮细胞任一项出现阳性即为该项目镜检阳性标本，若上述项目均为阴性，则为阴性标本，以显微镜镜检结果为标准，通过四格表法对结果进行统计分析，评估复检规则筛选的真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率和复检率。

2 结果

2.1 一般情况 共检测尿液标本1651例，无需复检标本共1169例，其中WBC符合率为91.02%，RBC符合率为83.07%，CAST符合率为99.49%，具体统计见表1。需复检标本共482例，复检率为29.2%。

2.2 满足复检规则一 “WBC、RBC、分别与尿干化学LEU、BLD出现阴阳性不一致或且散点图异常时”的标本共计95例，WBC符合率为40.74%，RBC符合率为6.49%，具体统计见表2。

表1尿液分析无需复检标本统计(%)检测项目真阳性率假阳性率真阴性率假阴性率 符合率WBC RBC CAST真菌结晶小圆上皮细胞19.08 15.83 8.21 16.76 71.94 67.24 99.49 0.77 0.17 0.51 0.43 4.36 1.03 91.02 83.07 99.49

表2 WBC、RBC、分别与尿干化学LEU、BLD出现阴阳性不一致或且散点图异常时统计(%)

2.3 满足复检规则二 “出现管型、结晶、真菌、小圆上皮细胞”共计标本326例，WBC符合率为83.44%，RBC符合率为 61.96%，CAST符合率为66.56%，真菌符合率为29.27%，结晶符合率为95.95%，小圆上皮细胞符合率为14.71%，具体统计见表3。

表3 出现管型、结晶、真菌、小圆上皮细胞标本统计(%)

2.4 阴性标本统计 所有阴性标本共计487例，镜检假阴性6例，假阴性率为1.23%，其中WBC假阴性有5例，RBC假阴性有1例。

3 讨论

尿常规分析对健康人群普查，泌尿系统及其相关疾病的诊断、定位、鉴别诊断及预后判断均有重要意义。随着自动化分析仪的广泛应用，不仅提高检验效率，还促进了尿液常规分析走向自动化、标准化和定量分析。大量的临床应用发现，因尿液标本自身的复杂性和自动化分析方法学的局限性，工作中出现许多假阴性或假阳性结果，需要大量的人工进行复检。为此，许多学者对如何制定合理规范，假阴性率低，可操作性的复检规则做了大量的探讨。之前，马骏龙等[8]研究的UF-1000i尿液分析流水线复检规则只考虑到了干化学检测指标中的红细胞、白细胞、蛋白和有形成分分析中的红细胞、白细胞、管型这6个项目，经临床实际应用还存在许多问题。如真菌、结晶、小圆上皮细胞的漏检等，自动化分析结果显示这些项目的假阳性率较高，同时会对其他项目的分析产生干扰作用。为此，我们制定并修改了复检规则，其中包括32条无需复检和33条需要复检的规则，同时特别强调当WBC与LEU不符或RBC与BLD不符时，若散点图异常，则可能为细菌、结晶等干扰引起的假阳性，仍需人工镜检。

本研究用1651例标本进行上述复检规则的临床验证，结果显示，无需镜检的标本各项目符合率均大于83%，假阴性率均小于5%，满足复检规则评价假阴性率应小于5%的标准[9]。尿干化学各项目符合率均大于83%，假阴性率均小于5%；尿沉渣各项目符合率均大于92%，假阴性率均小于5%。阴性标本假阴性率为1.23%，与徐卫益等[10]的1.5%相近，低于黄玉霞等[11]的4.7%和马俊龙等[12]的2．43%。同时，我们的复检率为29.2%，低于徐卫益等[6]的58.8%和陈雨等[12]的53.74%，与黄玉霞等[11]的29.0%一致，高于马俊龙等[8]的18.28%。提示如果未考虑尿液结晶、真菌、小圆上皮等对检测结果的影响，其复检规则将不够完善，复检率会相差很大。

本实验中，当WBC与LEU不符或RBC与BLD不符且散点图异常时，标本WBC符合率为40.74%，RBC符合率为6.49%，其中尿干化学WBC符合率为59.26%，RBC符合率为92.21%，尿沉渣WBC符合率为40.74%，RBC符合率为7.79%。可见当WBC与LEU不符或RBC与BLD不符且散点图异常时，WBC与RBC的符合率较低，尤其是红细胞，相对而言，尿干化学红细胞检测结果准确性较高，而尿沉渣红细胞检测结果假阳性率较高，主要是由于大量细菌、草酸钙结晶、精子、真菌、破坏的白细胞或其他杂质的干扰所致。CAST假阳性较高，主要原因有(1)黏液丝形态与管型形态较相似，易被仪器误认为透明管型，当其黏附细胞、细菌或其他杂质时，仪器误认为病理管型。(2)大量细胞或非晶型结晶聚集，有时也呈管状，也可导致假阳性。实验结果显示CAST真阳性标本大多为颗粒管型。流水线CAST阳性标本RBC假阳性率偏高，大多是由于标本中粘液丝黏附杂质导致仪器误认为红细胞。出现结晶，真菌，小圆上皮的标本，各项检测项目的假阴性率均小于5%，真菌符合率为29.27%，结晶符合率为95.95%，小圆上皮细胞符合率为14.71%，RBC符合率为61.96%，由于草酸钙结晶和红细胞具有相似的形状、真菌孢子的体积与红细胞差别不是很大，所以存在真菌、结晶的标本易导致红细胞的假阳性[13-15]。因部分白细胞体积偏大，仪器敏感度较高，也易导致小圆上皮细胞假阳性。

综上所述，本实验室制定的尿常规复检规则假阴性率<5%，复检率控制在30%左右，可以适用于临床。

[1]Dos SantosJC,Weber LP,Perez LR.Evaluation of urinalysis parameters to predict urinary-tract infectionJ.Braz[J].Infect Dis,2007,11(5):479-481.

[2]Delanghe J.New screening diagnostic techniques in urinalysis[J].Acta Clin Belg,2007,62(3):155-161.

[3]Mayo S,Acevedo D,Quinones Torrelo C,et al.Clinical laboratory automated urinalysis:comparision among automated microscopy,flow cytometry,two test strips analyzers,and manual microscopic examination of urine sediments[J].J Clin Lab Anal,2008,22(3):262-270.

[4]Ottiger C,Sawca R,Yurtsever H,et al.Increased sensitivity in detecting renal impairments by quantitative measurement of marker protein excretion compared to detection of pathological in urine sediment analysis[J].Clin Chem Lab Med,2006,44(12):1347-1354.

[5]王蕾.三种方法联合检测尿液有形成分的比较和评价[J].实验与检验医学,2012,30(1)83-85.

[6]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:275-276.

[7]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].第2版.南京:东南大学出版社,1997:133.

[8]马骏龙,丛玉隆,陆玉静,等.尿干化学和流式细胞术联合用于尿液有形成分镜检筛选的研究与应用 [J].中华检验医学杂志,2011,34(6):494-500.

[9]Barnes PW,WcFadden SL,Machin SJ,et al.The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis[J].Lab Hematol,2005,11(2):83-90.

[10]徐卫益,陈保德,许青,等.尿液自动化分析显微镜复检规则的建立及应用[J].国际检验医学杂志,2013,34(12):1589-1591.

[11]黄玉霞,黄珣钡,邓山鹰,等.尿液分析系统复检规则的建立及流程优化[J].临床检验杂志,2012,8:567-569.

[12]陈雨,程闽,李薇,等.自动化尿液干化学和有形成分分析复检规则的制定和应用[J].中华检验医学杂志,2011,34(6):501-506.

[13]丛玉隆,马骏龙,张民,等.现代尿液分析技术与临床[M].北京:人民军医出版社,2007:57.

[14]翁厚光.尿沉渣分析仪假阳性结果分析在临床中的应用[J].医学理论与实践,2008,21(11):1334-1335.

[15]黄松音,黄雪琼,谢文锋,等.菌尿对两种全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞的影响[J].检验医学与临床,2010,7(14):1440-1442.