胃复春联合维甲酸治疗胃癌癌前病变的疗效及对Rb、C-erbB-2表达的影响

苏秀丽，金建军，邢鲁奇



胃复春联合维甲酸治疗胃癌癌前病变的疗效及对Rb、C-erbB-2表达的影响

苏秀丽，金建军，邢鲁奇

目的 观察胃复春联合维甲酸治疗胃癌癌前病变的疗效及对Rb、C-erbB-2表达的影响，探讨二者干预胃癌癌前病变进展的可能机制，为胃癌的二级预防提供理论依据。方法 通过胃镜活检、病理检查确诊获取异型增生(dysplasia，Dys)伴或不伴胃黏膜肠化(intestinal metaplasia，IM)122例，随机分为治疗组63例，对照组59例。治疗组用药为维甲酸、胃复春；对照组用药为奥美拉唑、硫糖铝。服药3月后再次由胃镜活检获取病理标本，采用免疫组化法检测治疗前后Rb、C-erbB-2表达情况。结果 服药3个月后，治疗组有效率68.25%，对照组37.29%相比较有统计学意义(P<0.05)；能上调Rb表达强度(U=2.543,P<0.05)，下调C-erbB-2的表达(U=3.032，P<0.05)，与对照组相比，差别有统计学意义(P<0.05)，临床观察胃复春联合维甲酸无明显毒、副作用。结论 胃复春联合维甲酸可促进胃黏膜异型增生的逆转，降低癌变风险，可能的作用机制之一是上调抑癌基因Rb的表达、下调癌基因C-erbB-2的表达，可用作胃癌的预防治疗。

胃复春；维甲酸；胃癌癌前病变；抑癌基因Rb；癌基因C-erbB-2

目前较为肯定的胃癌前病变是指胃黏膜上皮细胞异型增生及肠型化生。研究证明，部分癌前病变可以逆转[1-2]，成为胃癌预防研究的重点。本文研究中成药胃复春联合西药维甲酸对胃黏膜异型增生及肠型化生的疗效及对抑癌基因Rb和癌基因C-erbB-2表达的影响，探讨这两种药物对胃癌癌前病变的治疗价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 患者来自2011年9月至2014年1月河南科技大学第一附属医院消化道门诊，胃镜检查为慢性胃炎，病理证实为胃黏膜慢性炎伴异型增生伴或不伴肠上皮化生共122例。慢性胃炎诊断标准及病理诊断标准符合慢性胃炎的中西医结合诊治方案及附录I慢性胃炎的病理诊断标准和分类[3]，依照就诊患者单日入治疗组，双日入对照组，随机分为治疗组63例(轻度异型增生15例，中度异型增生36例，重度异型增生12例，异性增生合并肠化生32例)，及对照组59例(轻度异型增生14例，中度异型增生35例，重度异型增生10例，异型增生合并肠化生31例)。两组性别、年龄及临床症状等一般资料均具有可比性(P>0.05)。

1.2 排除标准 ①合并恶性肿瘤者；②消化性溃疡者；③合并其他慢性疾病需长期服药者；④年龄低于14岁、超过65岁者；⑤禁忌服药的妊娠哺乳期妇女、过敏体质及需用药物过敏者；⑥合并精神神经症状及其他服药依从性差、资料不全、无法判断疗效者；⑦治疗前1周服用制酸剂及黏膜保护剂。

1.3 活检部位 取材部位为距幽门2.5 cm的胃窦部3、6、9点及胃角4个部位取材4块，标本足够大，达黏膜肌层,对可能或肯定存在的病灶另取标本，分开装瓶，病理申请提供病史、取材部位。标本由10%中性缓冲福尔马林溶液固定，石蜡包埋，注明姓名，按次序编号，常温保存。

1.4 治疗方法 治疗组口服胃复春片3片/次，3次/d；维甲酸片10 mg/次，3次/d，疗程为3个月；奥美拉唑20 mg/次，2次/d，硫糖铝0.75 g/次，3次/d，疗程为4周。对照组口服奥美拉唑20 mg/次，2次/d，硫糖铝0.75 g/次，3次/d，疗程为4周。所用药物均为固定厂家药品，治疗过程中停服其他药物。治疗前后采用问卷调查，详细记录患者病史、临床症状及一般情况，行放大内镜检查及病理活检，并化验血常规及肝肾功能。治疗期间定期随访临床变化及不良反应。

1.5 疗效判定标准 参照中国中西医结合学会消化系统专业委员会慢性胃炎疗效判定标准[3]。肠化或异型增生减轻达两个级度以上(含两个级度)为显效，肠化或异型增生减轻达一个级度为有效，无明显改变或改变未达到一个级度为无效(注：轻、中、重度异型增生依次为相差一个级度)。

1.6Rb、C-rebB-2表达检测

1.6.1 试剂 采用MaxVisionTM快捷免疫组化法，检测基因Rb、C-erbB-2表达产物，试剂盒均购于福州迈新生物技术公司。

1.6.2 结果判定 以试剂盒提供阳性片作阳性对照，用PBS置换一抗作为空白对照。细胞内棕褐色颗粒为Rb蛋白阳性着色，定位于胞核，少数见于胞浆，仅胞浆着色为非特异性，Rb阳性判断标准参照Mark Kelley[4]实验室标准，采用半定量积分法分级，计数随机10个高倍视野，计数100个细胞中的阳性细胞百分率及显色深浅。依据着色深浅评分：①基本未着色0分，浅色为1分，中度着色为2分，深色为强阳性，计3分。②按阳性细胞百分率分为:染色细胞数0～5%计0分，6%～25%计1分，26%～75%计2分，>75%为3分。两项相加最终结果评定:0～1分阴性(-)，2～3分弱阳性(+)，4～5分中度阳性(++)，>5分强阳性(+++)。C-erbB-2阳性着色为棕黄色，定位于胞膜，结果判定参照美国Hercept Test评价标准[5]：阳性细胞数<10%、仅有胞浆着色者为阴性，阳性细胞数>10%，显色弱且不连续为阳性(+)，阳性细胞数>10%，连续胞膜染色，强度中等为(++)，阳性细胞数>10%，胞膜连续着色呈强阳性为(+++)。

1.7 统计学处理 所得结果采用SPSS 17.0软件包统计分析，等级资料用秩和检验统计处理。

2 结果

2.1 治疗前后内镜检查及病理活检结果 治疗组病理结果有效率为68.25%，与对照组37.29%相比，差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 两组治疗后病理疗效的比较 例(%)

注：两组比较U=4.241,P<0.01。

2.2 治疗前后Rb及CerbB-2的表达 结果见表2、表3。Rb表达定位于细胞核，胞质着色无意义，Rb表达阳性率治疗组治疗前为74.60%与治疗后88.89%相比，差异明显(χ2=4.308，P=0.038)，表达强度明显上调(U=2.543，P=0.012)；对照组治疗前后Rb表达阳性率无明显变化，分别为74.58%和76.27%，差异无统计学意义(χ2= 0.046，P>0.05)，表达强度亦变化不明显(U=0.319，P>0.05)。C-erbB-2表达定位于胞膜，治疗组治疗前后阳性率分别是34.92%、12.70%，差别有统计学意义P<0.05，提示C-erbB-2表达在治疗后表达下调，表达强度也明显下降(U=3.032，P<0.05)。对照组阳性率及表达强度治疗前后无明显差异(P>0.05)。治疗后与对照组相比，治疗组Rb表达明显增强(P<0.05)，C-erbB-2表达明显减弱(P<0.05)。

表2 治疗前后Rb表达强度变化 例

注：治疗前治疗组与对照组相比U=0.237，P=0.692；治疗后治疗组与对照组相比U=2.201，P=0.03。

表3 治疗前后C-erbB-2表达强度变化 例

注：治疗前治疗组与对照组相比U=0.159，P=0.874；治疗后治疗组与对照组相比U=-2.527，P=0.013。

2.3 药物不良反应 治疗期间治疗组、对照组均无明显不适，不影响继续治疗。服药前后，两组患者心电图、血尿常规及肝肾功能均无异常。

3 讨论

胃癌是环境因素与遗传因素共同作用的结果，胃黏膜在癌变之前，存在较长期的癌前病变。本研究结果表明，胃复春联合维甲酸能有效改善胃癌前病变病理表现，有效率优于对照组，提示联合应用胃复春联合维甲酸对胃癌癌前病变有较好的治疗作用。研究还发现治疗后胃黏膜肠化生镜检及病理均无明显改变，建议病人长期随访，原因需进一步探讨。

细胞周期的调节与肿瘤发生密切相关。Rb基因是最早发现的抑癌基因，位于G1/S调控点的中心，低磷酸化的Rb蛋白与转录因子E-2F结合成复合物，使E-2F失去转录激活功能，调控细胞分裂增殖。Rb基因突变见于约一半以上人类肿瘤[6]，转录因子E-2F的活性明显增强，导致细胞分裂增殖活跃，促使肿瘤的发生[7]。Rb在胃癌癌前病变中的表达率为74.60%。胃复春、维甲酸治疗后，抑癌基因Rb表达较前增加。原癌基因C-erbB-2是细胞基因组的正常成分，其表达产物具有酪氨酸蛋白激酶活性，调控细胞增殖及分化，正常情况下处于失活状态，可因点突变、获得启动子增强子、基因扩增与重排等被活化, 表现为基因的扩增和产物的高表达,具有致癌变活性。研究发现，在胃癌前病变中，C-erbB-2呈高表达[9-11]，本研究结果示，中、重度异型增生C-erbB-2表达明显增加，与文献报道一致，提示C-erbB-2活性增加参与了胃癌癌变过程，经胃复春合并维甲酸治疗表达明显下降。提示该两种药物能降低基因C-erbB-2的表达。

胃复春(SFDA)被国家食品药品监督管理局批准用于治疗胃癌前病变，组成包括三七、香茶菜、红参、枳壳等多味中药，多味中药互相协同，有行气活血、 清热解毒、 散瘀消肿、抑菌消炎来改善病变血循环、促进黏膜再生、恢复正常功能的功效，其健脾补血成分尚能增强单核巨噬细胞系统吞噬功能，提高机体免疫功能、清除自由基，发挥标本兼治的作用[12]。维甲酸是肿瘤细胞的诱导分化剂，借助于维甲酸受体调控基因的表达，改变肿瘤细胞表型及分化，同时调节细胞凋亡基因，如P53、Bcl-2基因的表达，诱导细胞在G1/S节点前凋亡，灭活某些癌基因和细胞因子的表达[13]。胃复春联合维甲酸用于治疗胃癌前病变，把传统医学的扶正祛邪与西医治疗的针对性强、起效快、疗效确切相结合，具有双向调节和多靶点作用的特点，为肿瘤的化学预防开辟了新途径。

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Weifuchun Tablets Combination with Retinoic Acid in Treatment of Gastric Precancerous Lesions and its Effect on Expression ofRbGene andC-erbB-2 Gene

SU Xiu-li,JIN Jian-jun,XING Lu-qi

(First Affiliated Hospital, Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003,China)

ObjectiveTo investigate the effect of the Weifuchun tablets with combination Retinoic Acid tablet on gastric precancerous lesions and its regulative effect on the expression of theRbgene and theC-erbB-2 gene.MethodsOne hundred and twenty-two patients with gastroscopy and pathology confirmed dysplasia(DYS) with or without intestinal metaplasia(IM)were classified randomly into treatment group and control group .The treatment group consisting of 63 patients was treated with a Weifuchun tablets，Retinoic Acid tablet,Omeprazole tablet and Sucralfate tablet.The other 59 patients were treated with Sucralfate tablet and Omeprazole tablet as control.RbandC-erbB-2 protein were detected by the immunohistochemical method before and after the treatment.ResultsCompared with the control group 37.29% of effective power, the treatment group 68.25% was significantly improved after three months of treatment(P<0.05). The abnormal expression of the Rb Gene and the C-erbB-2 Gene was found in both groups and effectly regulated by Weifuchun tablets and Retinoic Acid tablet.ConclusionThe combination of Weifuchun tablets and Retinoic Acid tablet was effective in treating gastric dysplasia and intestinal metaplasia.It could reduce the risk of carcinogenesis of gastric precancerous lesions by reversing the gastric mucosa lesions and regulating the expression of tumor suppressor genesRb, oncogeneC-erbB-2. The combination of Weifuchun tablets and Retinoic Acid tablet could effectly be used in the treatment of precancerous lesions.

Weifuchun tablets；Retinoic Acid tablet；precancerous lesions of gastric carcinoma；tumor suppressor genesRb；oncogeneC-erbB-2

2015-01-20

河南科技大学第一附属医院，河南洛阳 471003

苏秀丽(1972-)，女，河南扶沟人，主治医师，从事消化内科临床工作。

金建军，男，教授，主任医师，E-mail：jinjjhn@yahoo.cn

R735.2

A

1672-688X(2015)02-0090-04