蒙药胡槐软肝片对CCl4所致大鼠药物性肝损伤的保护作用

阚俊明 智 慧 黄晓华 王秀兰 山 丹 奥·乌力吉*

1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040；2.长春中医药大学，吉林 长春 130117；3.呼伦贝尔职业技术学院，内蒙古 海拉尔 021000；4.内蒙古民族大学，内蒙古 通辽 028300

蒙药胡槐软肝片对CCl4所致大鼠药物性肝损伤的保护作用

阚俊明1,2智 慧3黄晓华3王秀兰4山 丹4奥·乌力吉4*

1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040；2.长春中医药大学，吉林 长春 130117；3.呼伦贝尔职业技术学院，内蒙古 海拉尔 021000；4.内蒙古民族大学，内蒙古 通辽 028300

目的：研究胡槐软肝片对CCl4所致大鼠药物性肝损伤的保护作用。方法：采用wister大鼠48只(雌雄各半)，随机分为四组，模型组和正常组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液，其余两组给予胡槐软肝片(简称蒙药组)和护肝片(阳性组)进行保护，每日1 次，连续15 d，第14天除正常组外灌胃CCl4造模。检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)的含量和肝匀浆中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的含量，并观察肝组织形态学特征。结果：胡槐软肝片明显降低血清中ALT、AST、ALP含量；明显增加肝匀浆中 SOD、GSH的含量；抑制MDA的升高；改善肝细胞变性、水肿以及炎性程度。结论：胡槐软肝片对CCl4所致大鼠药物性肝损伤的保护作用。

胡槐软肝片；药物性肝损伤；保护作用

药物性肝损伤(drug-induced liver disease，DILD)是由于药物代谢产物引起的肝脏损害性疾病。据文献报道，近年来由于药物联合运用、滥用及用药不当等导致肝损伤的发病率呈逐年上升趋势。胡槐软肝片对药物性肝损伤临床疗效较佳，本研究拟用该药观察药物性肝损伤大鼠血清中ALT、AST、ALP和肝匀浆的MDA、SOD、GSH的含量以及观察肝组织形态学变化，探讨该药对大鼠药物性肝损伤的保护作用。

1 材料与方法

1.1 试验药物 胡槐软肝片由内蒙古呼伦贝尔职业技术学院提供(蒙医专家验方)，试验时用蒸馏水配制成所需浓度备用；护肝片(批号：201306055)由黑龙江葵花药业提供。

1.2 动物 wister大鼠，体重180～220g，由吉林大学实验动物中心提供，许可证号为SCXK(吉) 2007-0004。

1.3 试剂 AST试剂盒(批号：14111101)、ALT试剂盒(批号：20140822)、ALP试剂盒(批号：140701)、MDA试剂盒(批号：20140619)、SOD试剂盒(批号：20140617)、GSH试剂盒(批号20140614)均由南京建成生物工程研究所提供；CCl4(批号：20130816)由天津市天力化学试剂有限公司提供。

1.4 仪器 B5-200全自动生化分析仪(深圳)；DY89-1电动匀浆机(宁波)； T6分光光度计(北京)；HZS-H水浴恒温振荡器(江苏)；AUY120电子分析天平(日本)；HMIAS-2000病理彩色图纹分析系统(日本)；RM2135 组织切片机(德国)；HG-941A电热恒温干燥箱(上海)。

1.5 方法 wister大鼠(雌雄各半)，实验前一周适应性饲养，自由进食进水，按体重随机分为4组，正常组和模型组每日灌胃10ml/kg的0.5%羧甲基纤维素钠溶液；蒙药组和护肝片组分别灌胃0.68g/kg、0.36g/kg相应药液，每次一次，连续15d，第14天除正常组外，其它组灌胃30% CCl4橄榄油溶液2 ml/kg灌胃造模，末次灌胃后禁食、不禁水24h。采样之前称体重，接着腹动脉取血，分离血清，测定ALT、AST和ALP的含量；取肝脏称重，计算其指数(肝脏指数=肝脏重量/大鼠体重×100%)[1-6]；准确称取新鲜肝左叶组织，制成10%的匀浆，离心15min，留取上清液，测定MDA、SOD、GSH含量；取同一部位肝右叶组织1块，放入10%甲醛溶液中固定，制备切片，HE染色，进行光镜观察。

1.6 统计学方法 数据采用SPSS 17.0统计软件进行分析，组间均数比较采用方差分析，P<0.05表示有统计学差异。

2 结果

2.1 胡槐软肝片对大鼠血清指标的影响 由表1、2可知，模型组各项指标与正常比较差异有统计学意义，说明造模成功。蒙药组各项指标与以模型组相比，数值明显降低，差异有统计学意义，说明胡槐软肝片对CCl4所致大鼠药物性肝损伤有一定的保护作用。

表1 胡槐软肝片对大鼠血清ALT、AST、ALP的影响

注：与正常组相比，△P<0.01，△△P<0.05；与模型组相比，*P<0.05。

2.2 病理切片比较 由图1可知，模型组的组织结构混乱，肝小叶不完整，有散在的点灶状坏死，肝细胞浊肿，排列紊乱，中央静脉周围肝细胞脂肪变，可见少数嗜酸小体形成及小灶性肝细胞坏死，汇管区有明显炎细胞浸润；阳性组肝小叶较完整，汇管区比较清晰，血管周围偶见少量炎细胞浸润，肝细胞变性、坏死与模型组相比有明显减轻；蒙药组肝小叶较完整，少量的细胞水肿和脂肪变，汇管区可见少量炎细胞浸润。

表2 胡槐软肝片对大鼠肝匀浆MDA、SOD、GSH的影响

注：与正常组相比，△P<0.01；与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01。

3 讨论

由表1、2看出，模型组AST、ALT、ALP、MDA的含量显著增加，SOD、GSH的含量明显减小，给药组以上指标明显有所改变；从肝组织病理切片图的结果得知，正常组肝细胞排列整齐，形态大小一致，肝索呈明显的放射状，汇管区无肿胀脂肪变坏死和血管周围无炎细胞浸润等病变；模型组的组织结构混乱，肝小叶不完整，有散在的点灶状坏死，肝细胞浊肿，排列紊乱，中央静脉周围肝细胞脂肪变，可见少数嗜酸小体形成及小灶性肝细胞坏死，汇管区有明显炎细胞浸润；阳性组肝小叶较完整，汇管区比较清晰，血管周围偶见少量炎细胞浸润，肝细胞变性、坏死与模型组相比有明显减轻；蒙药组肝小叶较完整，少量的细胞水肿和脂变，汇管区可见少量炎细胞浸润。表明胡槐软肝片对CCl4所致大鼠药物性肝损伤具有明显的改善作用。

研究结果表明，胡槐软肝片对药物性肝损伤有一定的保护作用，其药物性肝损伤保护作用机制有待于进一步探讨深入研究。

[1] 周鹏程．愈肝解毒汤对CCl4所致大鼠急性肝损伤的保护作用[D]．成都：成都中医药大学，2012．

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阚俊明(1974-)，男，副教授，博士研究生，主要从事中医养生学的教学与科研工作。E-mail：kjming21@163.com

奥·乌力吉(1961-)，男，主要从事蒙药新药研发工作。E-mail：wuliji@163.com

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1007-8517(2015)08-0028-02

2015.01.23)