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肺炎支原体肺炎患儿血清中IL-9、IL-17 水平

2015-04-28田洪伦

贵州医科大学学报 2015年7期
关键词:滴度支原体机体

何 军,张 姝,许 琦,尹 科,张 捷,田洪伦,祝 静,罗 洁

(贵州省第二人民医院 检验科,贵州 贵阳 50004)

肺炎支原体(my-coplasma,pneumoniae,MP)感染小儿可引起肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniapneumonia,MPP),在MPP 的发病过程中存在体液免疫、细胞免疫平衡紊乱,主要表现为T淋巴细胞免疫功能低下和B 淋巴细胞异常活化[1-2]。白细胞介素作为由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子,具有调节固有免疫和适应性免疫的作用,参与免疫细胞分化发育、介导炎症反应等。本研究通过检测支原体肺炎患儿血清中白细胞介素-9(IL-9)、白细胞介素-17(IL-17)水平来了解肺炎支原体感染对机体免疫功能的影响。

1 对象与方法

1.1 对象

收集2013 年8 月~12 月儿科门诊初诊因发热咳嗽、血液肺炎支原体抗体阳性的肺炎患儿60例纳入实验组,其中男35 例,女25 例,年龄(6±2.8)岁。所有病例均符合《实用儿科学》中肺炎支原体肺炎诊断标准,排除哮喘、并发症及免疫缺陷疾病患儿;入选患儿半年内无免疫制剂使用史。对照组20 例,均为健康查体儿童,男12 例,女8 例,年龄(5±3.1)岁。两组一般资料比较差异无统计学意义(P >0.05)。

1.2 主要试剂和仪器

MYCO Ⅱ肺炎支原体抗体诊断试剂盒(被动凝集法)为日本富士瑞必欧株式会社生产,试剂批号WP40418;IL-9、IL-17 试剂为上海瓦兰生物科技有限公司生产,批号分别为WK-E10253 及WKE10092。北京普朗(DNM-9602)酶标仪。

1.3 方法及检验指标

血样本为采集清晨空腹静脉血3 mL 于真空无抗凝采血管,经37 ℃水浴30 min,3 000 r/min 离心15 min,取血清1.5 mL 于EP 管,-80 ℃冰箱保存待测。肺炎支原体抗体IgM 检测:按1∶80、1∶60、1∶320作倍比稀释,以≥1∶80 稀释倍数滴度为肺炎支原体抗体阳性;根据最终稀释倍数分1∶80 倍、1∶160倍及≥1∶320 倍组,用ELISA 法检测每组血清IL-9、IL-17 水平,以门诊正常健康体检者血清样本为对照。

1.4 统计学方法

用SPSS 17.0 统计软件处理数据。计量数据以均数加减标准差)表示,组间比较用方差分析,LSD 法。以P <0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

肺炎支原体抗体阳性1∶80 倍和1∶160 倍患儿的IL-9 水平较正常对照降低(P <0.05);肺炎支原体抗体阳性从1∶80 倍组、1∶160 倍组及≥1∶320倍组逐渐升高,1∶80 倍组与≥1∶320 倍组比较有统计学意义(P <0.05);IL-17 水平,肺炎支原体抗体阳性各滴度组较正常对照降低(P <0.05),且组间变化不大(P >0.05)。见表1。

表1 各肺炎支原体抗体滴度组与对照组IL-9、IL-17 水平,(ng/L)Tab.1 Serum level of IL-9 and IL-17 in the different groups

表1 各肺炎支原体抗体滴度组与对照组IL-9、IL-17 水平,(ng/L)Tab.1 Serum level of IL-9 and IL-17 in the different groups

与正常对照比较,(1)P <0.05;与≥1∶320 比较,(2)P <0.05

细胞因子1∶80肺1炎∶1支60原 体抗体≥滴1∶度320正常对照IL-9 14.82±5.11(1)(2)16.37±6.0(1)18.94±5.86 21.09±4.23 IL-17 4.88±2.90(1) 4.71±2.38(1) 5.77±1.94(1)8.58±1.37

3 讨论

MP 是一种介于病毒和细菌之间的最小原核生物,无细胞壁,能自行繁殖,主要经呼吸道传染,MP 感染儿童机体后,血行播散释放毒物造成机体细胞损伤,MP 抗原还可刺激B 细胞产生免疫复合物而致机体免疫损伤而引起机体免疫功能变化。

IL-9 由CD4+T 细胞产生的新型Th9 细胞分泌,调节T 细胞和B 细胞参与应答,有学者认为IL-9 可作为Th17 的衍生因子对炎性疾病有促进作用[3]。Th17 细胞是近年发现的细胞亚群,IL-23 是维持Th17 存活的重要因子,Th17 能否能扩增和存活受IL-23 的影响[4],Th17 主要分泌的IL-17 可发挥抗细菌、抗真菌、抗寄生虫等作用[5],在抗感染免疫中的作用越来越受到重视[6]。本研究结果显示,在肺炎支原体肺炎患儿肺炎支原体抗体不同滴度组,血清IL-9、IL-17 水平较正常对照低,提示肺炎支原体感染可能导致机体血清IL-9 和IL-17水平降低。IL-9 和IL-17 同是前炎症因子,在感染炎症时二者本应表现升高,但在肺炎支原体肺炎患儿反而较正常对照组降低,IL-17 降低与王冬梅等[7]报道存在差异,也与国外学者利用小鼠动物模型,研究的结果存在差异[8],这是否与入组研究对象的采集时间、排除标准及研究方法等有关,尚需进一步研究。本研究发现IL-9 水平在肺炎支原体抗体高滴度时较低滴度时增高,作为前炎症因子,可能随肺炎支原体感染机体强度有关。本研究显示的IL-9 升高,IL-17 变化不大,可能在肺炎支原体肺炎患儿中IL-9 无关Th17 细胞分化[9],但此机制尚需进一步验证。

IL-9、IL-17 在肺炎支原体肺炎患儿血清中水平改变明显,肺炎支原体肺炎患儿感染肺炎支原体时机体IL-9、IL-17 水平降低,随着肺炎支原体抗体稀释滴度倍数阳性增大,IL-9 水平逐渐升高。证明肺炎支原体感染患儿,机体IL-17 可能未参与机体免疫清除肺炎支原体的作用,而IL-9 随感染程度加深,逐渐发挥免疫清除肺炎支原体的作用,为进一步认识肺炎支原体感染对儿童机体免疫功能的影响提供了理论依据。

[1]王娟,段全纪,张迎春.地塞米松对支原体肺炎肺外并发症患儿免疫指标的影响[J].贵阳医学院学报,2012(1):60-63.

[2]郭彦斌,尚莉丽,桂金贵,等.肺炎支原体肺炎患儿机体免疫功能变化[J].安徽医学,2014(7):913-915.

[3]Elizabeth C.Nowak,Casey T,et al.IL-9 as a mediator of Th17-driven inflammatory disease[J].Exp.Med,2009:1653-1660.

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[5]张玉侠.效应分子IL-17 的抗感染作用[J].国际免疫学杂志,2009(3):241-244.

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[8]Satoshi K,Takako O,Hideo O,et al.Role IL-17A and IL-10 in the antigen induced inflammation model by Mycoplasma pneumonia[J].BMC Microbiology,2014(14):156.

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