三七粉对小鼠免疫调节功能的影响

2015-04-26刘成明宁俞媛

亚太传统医药 2015年23期

关键词：泼尼松醋酸灌胃

刘成明，王丽，宁俞媛

(昆明圣火药业集团有限公司，云南昆明 650217)

三七粉对小鼠免疫调节功能的影响

刘成明，王丽，宁俞媛

(昆明圣火药业集团有限公司，云南昆明 650217)

目的：考察三七粉对机体免疫功能的作用。方法：用碳粒廓清实验法、2,4-二硝基氯苯致小鼠迟发型超敏反应和鸡红细胞致小鼠血清溶血素生成法，观察三七粉对小鼠免疫功能的影响。结果：三七粉1.34g/kg剂量可使吞噬指数K值及吞噬系数a明显增加(P<0.05)；三七粉0.34、0.67、1.34g/kg剂量能明显增强小鼠的迟发型超敏反应(P<0.01)且能明显提高小鼠的血清溶血素生成水平(P<0.05)。结论：三七粉具有增强免疫调节功能的作用。

三七粉；免疫功能；碳粒廓清；迟发型超敏；血清溶血素

三七粉具有多种功能，如免疫调节、抗衰老、改善记忆、抗疲劳等作用。三七粉可双向调节人体机能，增强机体的应激能力和提高机体的免疫能力，是疗补功能兼备的药食同源植物药。本试验拟从小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫等方面观察三七粉对小鼠免疫功能的影响，旨在探讨三七粉对免疫功能的作用，为其进一步开发研究提供药效学实验依据。

1 材料与方法

1.1 药物

三七粉，昆明圣火药业(集团)有限公司, 批号20110524；贞芪扶正颗粒，甘肃扶正药业股份有限公司，批号110505；醋酸泼尼松片，5mg/片，浙江仙居制药有限公司，批号110437。

1.2 动物

昆明种小鼠，18～22g，昆明医学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK(滇)2005-0008。

1.3 试剂

一得阁墨汁，北京一得阁墨业有限责任公司；2,4-二硝基氯苯(DNCB)，分析纯，天津市轩昂科工贸有限公司，批号20110525；丙酮，分析纯，重庆川东化工(集团)有限公司化学试剂厂；无水碳酸钠，分析纯，上海虹光化工厂。

1.4 仪器

TU-1901双光束紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；L600型离心机，湖南湘仪离心机仪器有限公司；YLS-Q4耳肿打耳器，安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司。

1.5 方法

1.5.1 小鼠碳粒廓清实验[1]雄性小鼠60只，随机分为6组，分组情况见表1。各组动物每日按20mL/kg灌胃给药1次，连续30天，对照组灌服纯水，醋酸泼尼松组和给药组在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸泼尼松(每日灌胃4h后，再次灌胃醋酸泼尼松10mg/kg)。末次给药后30min，鼠尾静脉注射20%墨汁0.1mL/10g，于注射后2min(t1)和12min(t2)时，分别于眼眶静脉取血20μL置于4mL 0.1%NaCO3溶液中混匀，用紫外可见分光光度计在680nm波长处测定光密度(OD)。按下式计算吞噬指数K和吞噬系数a。

1.5.2 小鼠迟发型超敏反应实验[2]18～22g雄性小鼠60只，随机分为6组，分组情况见表2。各组动物每日按20mL/kg灌胃给药1次，连续30天，对照组灌服纯水，醋酸泼尼松组和给药组在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸泼尼松(给药4h后，再灌胃醋酸泼尼松10mg/kg)。各组动物第21天给药后1h腹部均匀涂抹1% DNCB丙酮油混合液100μL/只，于第2天加强1次。给药第29天，各鼠右耳两面均匀涂抹1% DNCB混合液100μL /只，左耳涂等量丙酮油混合液。24h后处死动物，剪下左右两耳，用打耳器于同部位切下耳片称重，计算左右耳片重量之差。

1.5.3 小鼠血清溶血素生成实验[3]雄性小鼠60只，随机分为6组，分组情况见表2。各组动物每日按20mL/kg灌胃给药1次，连续30天，对照组灌服纯水，醋酸泼尼松组和各给药组在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸泼尼松(给药4h后，再灌胃醋酸泼尼松10mg/kg)。各组动物第23天给药后1h，腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水悬液0.2mL进行免疫，末次给药后30min，眼眶静脉取血，4 000rpm离心10min，血清用生理盐水稀释100倍。将血清稀释液2mL、5%鸡红细胞悬液1mL、10%补体1mL依次加入试管中，混合后37℃恒温30min，置0～4℃冰箱终止反应，离心，取上清液用紫外可见分光光度计于540nm波长处测定OD值作为小鼠血清溶血素的指标。