乳制品中16种有机氯农残的的气相色谱测定方法

赵桂华，赵建国

（黑龙江省垦区质量技术监督局检验检测中心，黑龙江 哈尔滨 150090）

有机氯农药属于高效广谱杀虫剂。20世纪40年代首先证明DDT具有显著杀虫效果以后，又相继合成了狄氏剂、艾氏剂、异狄氏剂、六六六、氯丹和杀虫粉等多种化合物，广泛应用于杀灭农药害虫及卫生害虫，是杀虫剂中使用量最大的一类农药。不溶于水而容于脂肪或其他有机溶剂中，化学性质较稳定，在外界或有机体内不易被破坏，故有较长的残留致毒期[1]。

DDT直到1939年由瑞士诺贝尔奖获得者化学家Paul Muler其对昆虫是一种有效的神经性毒剂。DDT在第二次世界大战中开始大量地使用，以喷雾方式用于对抗黄热病，抗击疟疾和蚊子，但由于其对鸟类的繁殖产生干扰，在1962年全世界开始禁止使用DDT。六六六又名六氯环己烷，在上个世纪70年代前在世界范围内广泛使用[2～6]。其在环境中慢慢降解，半衰期长达几十年，甚至上百年，其三种异构体（α-，β-，γ-HCH）在2010年被联合国环境计划署（简称UNEP）列入持久性有机污染物。工业六六六理论上有8种异构体，通常六六六异构体一般包括五种，即由于（ζ-，η-，θ-HCH）这三种异构体含量极少又不重要，一般不包括在所谓的六六六总量内，α-HCH（60～70%），β-HCH（5～12%），γ-HCH（10～12%），δ-HCH（6～10%），ε-HCH（0～4%）[7]。

DDT进入人体后在血液、大脑蛋白、肝脏和脂肪中的比例为1：4.30：300，其主要残留在脂肪中，其经过肝脏转化为毒性比DDT的DDD和DDE以及无毒的DDA，DDT以60%的DDE形式贮存，转化后无毒的DDA和未经转化的DDD由尿液排出。人体内主要以DDT和DDE的形式蓄积于脂肪组织中。六六六进入人体后，也主要蓄积在脂肪组织中，其共有甲、乙、丙、丁、戊、己、庚等异构体，在体内代谢速率以丙体最快，乙体最慢。乙体在人体脂肪中所占比例为93.5%。

DDT和六六六引起的急性中毒，多在半小时内发作，轻者头痛、头晕、视力模糊、腹泻、失眠、盗汗、全身乏力、肌肉轻度震颤等症状：重者痉挛、抽搐，甚至失去知觉。

1 材料与方法

1.1 试剂

除非另有说明，在分析中所使用试剂均为分析纯，用水为GB/T 6682-2008中规定的一级水。

丙酮；正己烷；氯化钠；乙酸铅：20g/L；α-666标准物质；β-666标准物质；γ-666标准物质；δ-666标准物质；p，p’-DDD标准物质；p，p’-DDT标准物质；o，p’-DDT标准物质；p，p’-D D E标准物质；氯丹标准物质（氯丹-1，氯丹-2和氯丹-3）；硫丹标准物质（硫丹-1和硫丹-2）；七氯标准物质；狄氏剂标准物质；艾氏剂标准物质。

1.2 仪器

气相色谱仪，配电子捕获检测器，Agilent T e c h n o l o g i e s 7 8 9 0 A；色谱柱：E l i r e-5，3 0 m×0.3 2 m m×0.25μm；ProElut Florisil固相萃取小柱，1000mg/6mL；旋转蒸发器； 漩涡振荡器；高速离心机。

1.3 实验方法

仪器参考条件[1]：

气相色谱仪器条件：

进样口温度：270℃

载气流速：1.2mL/min

柱箱程序升温[2]：初始温度70℃→保持2min→8℃/min→150℃，保持0min→2℃/min →200℃，保持1min→20℃/min→250℃，保持2min。

进样方式：不分流进样，1.0ml/min。

进样量：1.0μL。

吹扫流速：60mL/min。

样品处理方法[3～10]：

牛奶、原料乳等液态奶制品：称取10g样品(精确到0.01g)于50mL具塞离心管中，加入10mL丙酮：正己烷=1：9，漩涡混合1min。再次加入10mL丙酮：正己烷=1：9，加入4g氯化钠，2mL20g/L乙酸铅溶液，漩涡混合振荡5min，4000转/min离心5min。取上清液10mL，待净化。

奶粉：称样1g，加入40℃温水10mL溶解样品，其他步骤同上（牛奶等）处理。

净化：加入1：9=丙酮：正己烷10mL活化ProElut Florisil SPE固相萃取小柱，弃掉流出液，加载10mL提取的样液，收集流出液，再加入1：9=丙酮：正己烷5mL洗脱，合并流出液，在40℃通氮气浓缩到约0.5mL，正己烷定容到1.0mL。供GC测定。

图1标样16种有机氯的谱图

表1各组分色谱峰的性能报告

表2 牛乳中各有机氯组分的校准方程和检出限

2 实验结果

2.1 标样16种有机氯的谱图及色谱峰的性能报告

通过图1和表1，可知这16种有机氯组分在此分析条件下，有很好的对称性和分离度，并且所有组分的理论塔板数都在170000以上。表明该仪器条件能实现16种有机氯的分离和定性。

2.2 牛乳中各有机氯组分的校准方程、相关系数、检出限和重复性

检出限的计算公式：L=3×s×V×f/k×W，其中：L为检出限，s为10次空白信号噪音标准偏差的平均值，V为定容体积（ml），f为稀释倍数，k为校准曲线斜率，W为样品质量（g）。方法的重复性以每个组分6次测定结果相对标准偏差进行计算所得。

3 讨论

本文采用气相色谱（GC）方法测定乳制品中有机氯农药残留，本方法采用正己烷和丙酮混合溶液直接萃取牛乳样品（或经过温水溶解的奶粉样品），极大地提高了有机氯类农药残留的萃取效率，再通过Florisil硅藻土固相萃取小柱净化，较好地去除了样品基质中的干扰组分及其杂质。与凝胶净化[11]前处理方法和其它的前处理方法相比，本方法一次处理可以完成16种有机氯农药残留[12]的测定，通过改进气相色谱的仪器条件，这16种有机氯目标物峰都得到了很好的分离。本方法具有使用仪器简单，测定通量高，快速，简便，具有较好的回收率和重复性，较低的检出限，能很好地满足乳制品中有机氯农残的测定。

[1] 刘咏梅, 王志花, 储晓刚. 凝胶渗透色谱法净化-气相色谱测定糙米中7种常见有机磷农药残留. 农药, 2004,43(10): 460-462.

[2] 国标,GB/T 5009.19-2008.

[3] 汪军. 直接进样/气相色谱/串联质谱联用（DSI/GC/TMW）分析鸡蛋中农药残留. 世界农药, 2004, 24(3): 33.

[4] 孔祥盈. 气相色谱法测定水产品中六六六和滴滴涕的残留. 食品研究与开发, 2005, 26(2): 138-141.

[5] 侯胜军, 陈丹丹, 李翔, 等. 气相色谱/质谱-选择离子检测法同时测定大米中的25种持久性有机污染物. 色谱, 23(3): 229-233.

[6] 刘毅, 郑国灿, 王晶. 气相色谱-串联质谱法测定牛奶中20种有机氯农药残留. 检验检疫学刊, 2012, 4: 38-45.

[7] 俞勇. 粮谷中12种有机氯农药残留气相色谱/质谱同时测定方法.江西化工, 2004, 1: 80-84.

[8] 贺德春. 用气相色谱方法测定面粉和大米中14种农药残留. 2004,2(3): 161-164.

[9] 徐晓琴. 凝胶渗透色谱-气相色谱串联质谱法测定禽蛋中16种有机氯类农药残留. 山东理工大学学报（自然科学版）, 2011, 4:74-78.

[10] 万益群, 鄢爱平, 谢明勇. 中草药中有机氯农药和拟除虫菊酯农药残留量的测定. 分析化学, 2005, 33(5): 614-618.

[11] 宋晓玲, 饶竹. 食品与环境样品中有机氯农药残留的净化技术研究进展. 农药学学报, 2011, 5: 439-447.

[12] 黄俊, 余刚, 张彭文. 中国持久性有机污染物的计算机辅助筛选研究. 环境污染防治, 2003, 25(1): 16-19.