细胞块石蜡切片检查对恶性浆膜腔积液的诊断价值

李庆国

聊城市光明医院，山东 聊城252000

细胞块石蜡切片检查对恶性浆膜腔积液的诊断价值

李庆国

聊城市光明医院，山东 聊城252000

目的探讨细胞块石蜡切片检查对恶性浆膜腔积液的诊断价值。方法对560例于2009年5月～2013年5月在本院就诊的胸腔、腹腔和心包积液患者的穿刺抽取液分别采用细胞块石蜡切片法与常规离心涂片法进行细胞学检查，统计并分析两种方法和两种方法联用对恶性浆膜腔积液的诊断符合率。结果560例浆膜腔积液患者中，经手术病理、纤维支气管镜、胸腹腔镜、影像引导下穿刺活检、诊断性治疗等确诊为恶性肿瘤并发积液的有210例。常规离心涂片法对恶性浆膜腔积液的敏感度为57.6%，特异度为98.8%；细胞块石蜡切片法对恶性浆膜腔积液的敏感度为69.5%，特异度为99.4%，两种方法敏感度比较差异具有统计学意义（P＜0.05）；两种方法联用对恶性浆膜腔积液的敏感度为72.3%，特异度为100%。结论在对浆膜腔的穿刺抽取液进行细胞学检查时，细胞块石蜡切片法要优于常规离心涂片法，两种方法联用可进一步提高对恶性浆膜腔积液的诊断符合率。

恶性浆膜腔积液；高速离心机；细胞块石蜡切片法；常规离心涂片法

浆膜腔积液是临床多种疾病的常见并发症，脱落细胞学检查为鉴别良性和恶性浆膜腔积液的重要手段。传统的离心涂片法细胞学检查的特异性高，但由于恶性浆膜腔积液中的肿瘤细胞少且分散，其敏感性较低，易造成漏诊[1]。细胞块石蜡切片法收集的细胞数多，可明显提高对恶性浆膜腔积液的诊断符合率，但其脱水、浸蜡等过程中会有固缩和人为损害，导致有时细胞形态不如涂片法清晰，从而造成假阴性或假阳性[2]。笔者应用细胞块石蜡切片法与常规离心涂片法对浆膜腔积液进行细胞学检查，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2009年5月～2013年5月在本院通过影像诊断和穿刺确诊的560例浆膜腔积液患者，其中胸腔积液322例，腹腔积液150例，心包积液56例，多浆膜腔积液32例（指积液2处或2处以上）；男性341例，女219例，年龄13～85岁，中位年龄49岁；积液为黄色392例，血性147例，乳糜性21例。

1.2 检查方法

将每例患者浆膜腔的穿刺抽取液分为2份，1份经常规离心涂片法制成涂片，另1份则经细胞块石蜡切片法制成切片。由两位副主任医师采用双盲法通过会诊作出诊断报告。

1.2.1 常规离心涂片制作方法

常规离心涂片制作方法如下：取新鲜浆膜腔积液标本10～20 mL，经高速离心机以2000 r/min的转速离心5 min后取沉渣，用推片法制片5～7张／例，自然干燥后用瑞特-姬姆萨双染色法进行染色。血性混浊标本离心后取有核细胞层制片。对可疑癌细胞涂片要缩短染色时间。

1.2.2 细胞块石蜡切片制作方法

细胞块石蜡切片制作方法如下：浆膜腔积液标本室温静置10～20 min，用尖底离心管取容器底层标本50 mL，经高速离心机以5000 r/min的转速离心5 min，弃上清留沉淀物；在离心管中加10%中性甲醛5～10 mL，与沉淀物混匀，室温固定处理1 h后离心弃上清；再加入10%中性甲醛5～10 mL，混匀后补充固定1 h后离心，弃上清，用滤纸包好沉淀物（若浆膜腔积液中沉淀物较少时，可加入75%的乙醇5～10 mL，然后静置30 min，使沉淀物凝固硬化）；用吸管吸取细胞块到显微镜擦镜纸上，包好后放入自动脱水机中进行组织处理，制成石蜡细胞块，再将细胞块切成厚度为3 μm的切片，60 ℃烘干1 h。

1.2.3 阅片方法

阅片方法如下：将离心涂片及细胞切片置于显微镜下观察，若见到多个具有恶性特征的细胞则诊断为阳性，未见异型细胞则诊断为阴性，查见异型细胞但不足以诊断为恶性的则要结合临床进行综合诊断。

1.3 统计学方法

全部数据经核查无误后采用SPSS 13.0软件进行统计分析，两组计数资料的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 肿瘤来源分析

560例浆膜腔积液标本中经手术病理、纤维支气管镜、胸腔镜、胃镜、穿刺活检及痰检等证实为恶性积液的有210例，其中141例为恶性胸腔积液，来源于原发性肺癌100例（70.9%），乳腺癌15例（10.6%），食道癌11例（7.8%），恶性淋巴瘤7例（4.9%），恶性间皮瘤4例（2.8%），胸腺癌4例（2.8%）；57例为恶性腹腔积液，来源于消化道肿瘤25例（43.8%），卵巢癌14例（24.5%），肝癌8例（14.0%），肾癌3例 （5.3%）， 恶性间皮瘤3例 （5.3%）， 恶性淋巴瘤3例（5.3%），原发于大网膜腺癌1例（1.7%）；12例为恶性心包腔积液，来源于肺癌7例（58.3%），胸腺癌2例（16.7%），食道癌3例（25.0%）。

2.2 常规离心涂片法与细胞块石蜡切片法的诊断结果比较

常规离心涂片法与细胞块石蜡切片法对恶性浆膜腔积液的敏感度分别为57.6%和69.5%，差异有统计学意义（P＜0.05），特异度分别为98.8%和99.4%，差异无统计学意义（P＞0.05）；两种方法联用对恶性浆膜腔积液的敏感度为72.3%，特异度为100%。结果见表1～3。

表1 常规离心涂片法的诊断结果（例）

表2 细胞块石蜡切片法的诊断结果（例）

表3 两种方法联用的诊断结果（例）

2.3 常规离心涂片及细胞切片的镜下表现

常规离心涂片中的细胞数量少，呈分散或堆积重叠样，背景杂质较多，但细胞排列良好，对于判断肿瘤细胞的来源有较高的价值（图1）。细胞块石蜡切片中的细胞数量多，呈大量集中样，有核细胞密度高，细胞结构完整，图像背景清晰，便于观察分析（图2）。

图1 离心涂片镜下表现

图2 细胞块石蜡切片镜下表现

3 讨论

恶性浆膜腔积液常由癌细胞刺激、癌栓阻塞淋巴管和血管致组织液回流障碍等引起，人体任何系统的恶性肿瘤都可能发生浆膜腔转移，其中以肺癌、胃肠道癌、乳腺癌、卵巢癌、恶性淋巴瘤最为常见。浆膜腔积液内各种细胞形态在以往文献中描述较多[3-4]，应用浆膜腔穿刺抽取液查找癌细胞不仅能够快速进行诊断，还能够避免腹腔镜、支气管镜、胃镜、穿刺活检等操作对患者造成的不必要的损伤。目前多数医院采用常规离心涂片法来检查癌细胞，具有快速、简便、易行的优点，缺点主要是检出率较低，文献[5-6]报道其检出率约为40%～50%，主要原因在于：① 常规涂片法只能留取10 mL样本离心，收集的细胞数量少，容易造成假阴性；② 涂片常存在厚薄不均的现象，涂片太厚可导致细胞互相重叠而影响观察；涂片太薄时，细胞数又太少，只能观察到少数细胞及单个细胞的形态变化，难以做出判断；③ 细胞来源多、成分复杂，细胞浆角化倾向不明显，常遇到增生的间皮细胞和腺癌细胞难以鉴别的问题。

浆膜腔积液离心沉淀物细胞块石蜡切片法是较好的细胞学检查技术，有研究表明胸腹腔积液标本的石蜡切片的平均细胞数量高于涂片法[7]。本研究结果显示，细胞块石蜡切片厚薄均匀，其中的细胞结构完整，图像背景清晰，便于观察分析；细胞块石蜡切片法对恶性浆膜腔积液的敏感度为69.5%，高于常规离心涂片法的57.6%（P＜0.05）；且蜡块可反复、间断切片，并可根据需要采用敏感抗体进行免疫组织化学染色，以明确标记出间皮细胞和肿瘤细胞，起到鉴别诊断和鉴别肿瘤来源的作用[8-9]。

尽管细胞块石蜡切片法对恶性浆膜腔积液的检出率高于常规涂片法，但是本组210例恶性浆膜腔积液中，有4例由常规离心涂片法检出而细胞块石蜡切片法却呈假阴性，考虑原因为：常规离心涂片中的细胞排列良好，近似原细胞的体积和形状，更能反映出细胞的染色性、颗粒性和真实性，在一定程度上也能反映出器官的功能状态和反应性变化如增生、炎性反应等，易辨认良恶性细胞；而细胞块石蜡切片中的细胞较为集中，虽便于观察各种细胞的特殊排列，但因其脱水、浸蜡、切片等过程中有固缩和人为损害，有时会出现细胞形态不如涂片清晰从而造成假阴性的情况。因此，临床上应联用常规离心涂片法和细胞块石蜡切片法进行细胞学检查。本研究结果显示，两种方法联用对恶性浆膜腔积液的检出率达72.3%，显著高于常规离心涂片法及细胞块石蜡切片法单独应用时的检出率，且无假阳性情况出现。

检验科对如何留取浆膜腔积液也应该和临床穿刺医生进一步沟通，本研究中注意事项如下：① 大量积液患者行穿刺抽液时，开始抽取的积液较为清澈，离心后获得的细胞块可能较小或不宜制成蜡块，因此应对最后抽取的较为浑浊的积液进行离心，以获得较为理想的细胞蜡块；② 穿刺抽液最好在超声监视下完成，以实时观察抽液过程，避免并发症的发生；③ 对血性及乳糜性积液，应对其中的红细胞进行脱色处理。

综上所述，在对浆膜腔的穿刺抽取液进行细胞学检查时，细胞块石蜡切片法要优于常规离心涂片法，两种方法联用可进一步提高对恶性浆膜腔积液的诊断符合率。

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E ff ectiveness of Cellblock Para ffi n-Imbedded Sections in Diagnosis of Malignant Serous Cavity E ff usion

LI Qing-guo
Liaocheng Guangming Hospital, Liaocheng Shandong 252000, China

ObjectiveTo discuss the e ff ectiveness of cellblock paraffin-imbedded sections in diagnosis of malignant serous cavity e ff usion.MethodsA total of 560 patients were selected among all the patients with pleural, ascites and pericardial e ff usion who had been treated in the hospital from May 2009 to May 2013. The cellblock paraffin-imbedded sections and the cell centrifugation smear had been performed to make cytological examinations of pleural, ascites and pericardial effusion for these patients. The accuracy rates of two methods and combined use of two methods in diagnosis of malignant serous cavity effusion were analyzed respectively.ResultsAmong 560 cases, 210 were identified with malignant serous cavity e ff usion through the surgical pathology, fi beroptic bronchoscopy, laparoscope, imagingguided needle biopsy and diagnostic treatment. The sensibility and speci fi city of the cell centrifugation smear were 57.6% and 98.8% in comparison with the cellblock paraffin-imbedded sections’ 69.5% and 99.4% respectively. There were statistically signi fi cant di ff erences (P＜0.05) between two methods. The sensibility and speci fi city of the combined use of the two methods were 72.3% and 100%.ConclusionCellblock paraffin-imbedded sections demonstrated its superiority over the cell centrifugation smear in cytological examinations of serous cavity e ff usion. Combined use of two methods can further improve the accuracy rate in diagnosis of serous cavity e ff usion.

malignant serous cavity effusion; high-speed centrifuge; cellblock paraffin-imbedded sections; cell centrifugation smear

TH776+.2

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2015.03.034

1674-1633(2015)03-0111-03

2014-10-17

作者邮箱：15339949026@163．com