原发性高血压伴颈动脉粥样硬化与脂蛋白相关磷脂酶A2活性水平相关性研究

陈世豪，谭柏松，张伟坚

（南方医科大学附属新会医院检验科，广东 江门 529100）

原发性高血压伴颈动脉粥样硬化与脂蛋白相关磷脂酶A2活性水平相关性研究

陈世豪，谭柏松，张伟坚

（南方医科大学附属新会医院检验科，广东 江门 529100）

目的 探讨原发性高血压(EH)患者伴发颈动脉粥样硬化(CAS)病变与脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)的相关性。方法采用ELISA方法检测130例EH患者和50例健康人群(健康对照组)的血浆Lp-PLA2水平，根据颈动脉彩超检查结果，130例EH患者中伴发CAS者75例，其中无斑块18例，稳定斑块32例，不稳定斑块25例。结果EH伴发CAS者的Lp-PLA2中位数水平为(98～589)ng/ml，平均258 ng/ml，明显高于单纯EH者[102(59～195)ng/ml]和健康对照组[68(10～153)ng/ml]，P＜0.01；血浆Lp-PLA2诊断EH伴发CAS的ROC曲线AUC为0.971，当以177.5 ng/ml为临界值时，其敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为85.3% (64/75)、97.1%(102/105)、95.5%(64/67)、90.3%(102/113)、92.2%(166/180)。EH伴发CAS患者中无斑块组、稳定斑块组、不稳定斑块组Lp-PLA2水平分别平均为169 ng/ml、249 ng/ml、372 ng/ml，三组间差异有统计学意义。结论Lp-PLA2检测对EH患者早期CAS有预测意义，为CAS早期诊断和干预治疗提供积极的参考价值。

原发性高血压；颈动脉粥样硬化；脂蛋白相关磷脂酶A2

动脉粥样硬化(AS)是心脑血管并发症的病理基础，原发性高血压(EH)患者是促进AS发生的高危人群，心脑血管疾病致残、致死率极高，如何早期识别AS，并进一步早期干预成为研究热点。AS是一种炎症性疾病，在粥样斑块形成、进展和最终破裂的过程中均有炎症性反应介质的参与。脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)是近年来炎性反应介质的热点，其具有促进动脉粥样硬化作用，与心脑血管疾病密切相关[1-2]。本研究探讨原发性高血压患者中Lp-PLA2与颈动脉硬化的关系，为早期EH人群的动脉粥样硬化提供预测价值。

1 资料与方法

1.1 研究对象 收集2013年6月至2014年3月在本院内科确诊为EH患者130例，其中男性80例，女性50例；年龄31～93岁，平均(58±13)岁，所有患者均符合2010年修订版的《中国高血压防治指南》的诊断标准，进行颈动脉彩超[颈动脉内中膜厚度(IMT≥0.9或有动脉粥样斑块)]确诊75例颈动脉硬化患者(EH伴发AS组)，根据斑块显示无斑块18例，稳定斑块32例，不稳定斑块25例。此外55例为单纯EH患者，同时选取健康人群50例作为健康对照组，排除心脑血管疾病及肿瘤等疾病。所有待测者均抽取空腹晨血3 ml EDTA抗凝，分离血浆-20℃保存。

1.2 检测方法 采用ELISA方法检测Lp-PLA2，试剂由天津康尔克生物技术有限公司提供批号140201，严格按照试剂盒说明书操作，标准品及质控品为原装配套试剂。测定仪器为瑞士TECAN全自动酶免分析仪。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0软件进行数据统计分析，血浆Lp-PLA2检测数据呈偏态分布，采用中位数表示，以非参数检验比较各组的Lp-PLA2差异，并采用ROC曲线确定最佳临界值和ACU，同时对不同组合的检测效能进行评价。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血浆Lp-PLA2水平比较 EH伴发AS组血浆Lp-PLA2水平与单纯EH组及健康对照组比较，差异均有统计学意义(U值分别为191.0、40.0，P均＜0.01)；而单纯EH组与健康对照组比较差异有统计学意义(U值为552.0，P＜0.01)，见表1。

表1 各组血浆Lp-PLA2水平比较[中位数(范围)]

2.2 血浆Lp-PLA2水平在EH伴发AS患者中的临界值确定和检测效能评价 以单纯EH患者组和健康对照组为阴性对照组(n=105)，用ROC曲线评价检测效能，见图1，最佳截断值以177.5 ng/ml为临界值，AUC为0.971，敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为85.3%(64/75)、97.1%(102/ 105)、95.5%(64/67)、90.3%(102/113)、92.2%(166/180)，显示很好的检测效能。

图1 EH合并AS组与非AS组（单纯EH和健康人群）ROC曲线分析

2.3 EH伴AS患者中各组血浆Lp-PLA2水平比较 无斑块组、稳定斑块组和不稳定斑块组血浆Lp-PLA2水平经非参数检验，差异均有统计学意义(U值分别为58.0、1.0、62.5，P均＜0.01)，见表2。且从无斑块至稳定性斑块的出现到趋向不稳定的程度，血浆Lp-PLA2水平随之升高。

表2 EH伴颈动脉硬化患者中各组别血浆Lp-PLA2水平比较[中位数(范围)]

3 讨论

动脉粥样硬化是引发心脑血管病变的重要危险因素，研究发现原发性高血压患者血压变异性(BPV)是颈动脉粥样硬化的重要影响因素[3]。颈动脉硬化的临床诊断依赖颈动脉B超检测，特异性的实验室诊断指标较少，国外已研究脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)作为炎性反应介质，具有促进动脉粥样硬化作用，可作为评估早期心脑血管疾病的预测及治疗预后的重要指标。

Lp-PLA2是由441个氨基酸残基组成的一种丝氨酸脂酶，相对分子质量为45.4 KU，是非钙依赖的磷脂酶，主要由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌，并受炎性介质的调节[4]。血小板活化因子(PAF)具有促进炎性介质释放的作用，从而发生炎症反应及血栓的形成。Lp-PLA2作为血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)，具有降解PAF作用，阻止PAF的炎症活动和血栓形成[5]，所以Lp-PLA2具有抗炎和抗AS作用。而在人类中只有大约10%的Lp-PLA2与HDL结合[6]，动物实验证明HDL-Lp-PLA2具有抗AS作用。同时，流行病学研究中发现，Lp-PLA2的活性与HDL呈明显的负相关性[7]，但具体的机制还不清楚。

另一方面，目前研究较多的是Lp-PLA2与LDL结合从而促进AS作用，结合在LDL上的Lp-PLA2随LDL被运送到了血管壁上易受损伤的区域，在LDL生成氧化磷脂之后，Lp-PLA2就迅速将其水解生成有生物活性的促炎物质(lyso-PC和ox-NEFA)[8]，进而刺激细胞因子产生如TNF-α和IL-6，增加斑块内炎症反应，而斑块中的炎症细胞又产生更多的Lp-PLA2，导致刺激斑块的持续增长，细胞因子和蛋白酶降解纤维帽的平滑肌细胞和胶原基质，使斑块变得脆弱、破裂和脱落，致使动脉粥样硬化，从而导致心脑血管疾病的发生。

在本研究中，血浆Lp-PLA2在EH伴发AS组中的水平显著高于单纯EH组和健康对照组，经非参数Mann-WhitneyU检验，差异有统计学意义。结果显示，血浆Lp-PLA2具有血管炎症特异性，提供动脉粥样斑块炎症及稳定性的信息，在颈动脉硬化诊断中有一定的特异性。临床研究证实Lp-PLA2水平是独立于传统心血管危险因子预测心血管事件的新的炎症标志物。因此，我们确定以单纯EH组及健康对照组为非颈动脉硬化组(n=105)，使用ROC曲线评价检测效能，并确定临界值为177.5 ng/ml(AUC为0.971)，可见，血浆Lp-PLA2水平对于EH患者颈动脉硬化有很好的检测效能。

研究根据患者斑块显示性质分为无斑块组、稳定斑块组和不稳定斑块三组进行血浆Lp-PLA2水平比较，经非参数Mann-WhitneyU检验，三组间均显示差异有统计学意义，提示在动脉粥样硬化斑块处存在大量Lp-PLA2，Lp-PLA2参与斑块的形成和发展，从无斑块至稳定性斑块的出现到趋向不稳定的程度，血浆Lp-PLA2水平随之升高。Lp-PLA2作为动脉粥样硬化性脑梗死的一个独立风险预测因子已得到一些流行病学研究的证实[9-10]，其升高会增加缺血性卒中的风险。龙璐等[11]研究证实随着Lp-PLA2的升高，急性缺血性脑卒中患者出现颈动脉硬化斑块的可能性逐渐增大，而且斑块性质从稳定逐渐趋向不稳定。此外，美国心脏病协会和国家胆固醇教育计划提出，Lp-PLA2可以作为目前CHD最好的预测因子[12]，而国内徐冬玲等[13]有研究认为对冠心病患者Lp-PLA2检测可辅助识别斑块的稳定程度及斑块局部炎症反应的程度。由此可见，对于原发性高血压这类心脑血管高危人群，随着对Lp-PLA2生物学活性的深入阐明，检测方法学的提高，Lp-PLA2对于其心脑血管疾病的早期的诊断和治疗中的评估都有广阔的应用前景。

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[9]Oei HHS,van der Meer IM,Hofman A,et al.Lipoprotein associated phospholipase A2activity is associated with risk of coronary heart disease and ischemic stroke:the Rotterdam Study[J].Circulation,2005,111(5):570-575.

[10]Jenny NS,Solomon C,Cushman M.Lipoprotein-associated phospholipaseA(2)[J].Atheroclerosis,2010,2:528-532.

[11]龙 璐,王钟明,陈 贞,等.急性缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA2水平与颈动脉硬化斑块稳定性及神经功能缺损程度的关系[J].检验医学,2013,28(10):885-889.

[12]蔡人权,叶 平.脂蛋白相关磷脂酶A2对预测冠心病事件的临床价值[J].放射免疫学杂志,2010,23(2):197-199.

[13]徐冬玲,刘军妮,杜贻萌,等.脂蛋白相关磷脂酶与冠状动脉易损斑块的相关性[J].中华内科杂志,2009,48(8):651-654.

Correlation between lipoprotein-associated phospholipase A2 level and carotid atherosclerosis in patients with essential hypertension.

CHEN Shi-hao,TAN Bai-song,ZHANG Wei-jian.Department of Clinical Laboratory,Xinhui Hospital,Affiliated Hospital of Southern Medical University,Jiangmen 529100,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo study the correlation of lipoprotein associated phospholipase A2(Lp-PLA2)with carotid atherosclerosis(CAS)in patients with essential hypertension(EH).MethodsThe levels of Lp-PLA2 were measured by ELISA in 130 patients of EH(EH group)and 50 healthy subjects(healthy control group)．According to the results of cervical vascular color Doppler ultrasound examination,there were 75 patients with CAS in 130 patients with EH,and were classified into non-plaque group(18 cases),stable plaque group(32 cases)and unstable plaque group(25 cases).ResultsThe median value of Lp-PLA2 was higher in EH patients with CAS[258(98～589)ng/ml]than that in EH patients[102(59～195)ng/ml]and in control subjects[68(10～153)ng/ml](P＜0.01).The area under the ROC curve(AUC)was 0.971.When cutoff value of the Lp-PLA2 was 177.5 ng/ml,the diagnostic sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value and accuracy rate were 85.3%(64/75),97.1%(102/105), 95.5%(64/67),90.3%(102/113),92.2%(166/180).The median value of Lp-PLA2 were 169(98～265)ng/ml, 249(145～364)ng/ml,372(259～589)in EH patients with CAS in non-plaque group,stable plaque group and unstable plaue group,respectively.There was statistically significant difference among the three groups.ConclusionLp-PLA2 detection has significance for prediction of early CAS in patients with EH,and can provide a positive reference value for early diagnosis and intervention of CAS.

Essential hypertension;Carotid atherosclerosis;Lipoprotein associated phospholipaseA2

R544.1

A

1003—6350（2015）03—0380—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.03.0136

2014-06-16)

陈世豪。E-mail：mandychen1999@163.com