血红素加氧酶-1在肿瘤中的表达及生物学功能

谭启杏，韦长元，宋伦

1.广西医科大学附属肿瘤医院 乳腺外科，广西 南宁 530021；2.军事医学科学院 基础医学研究所应激医学研究室，北京 100850

血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1)是一种广泛存在于哺乳动物体内的抗氧化防御酶，是降解游离血红素重要的限速酶，可将血红素分解产生胆绿素、一氧化碳（CO）、亚铁离子（Fe2+），所分解产生的这3 种代谢终产物具有抗炎、抗细胞凋亡和保护细胞等特性。在各种应激条件下，HO-1可出现表达上调，抵御各种刺激因素和病理过程的伤害，起到保护器官、组织和细胞的作用。近年来许多研究都证实，HO-1在多种常见的人体恶性肿瘤组织中都出现异常高表达，如乳腺癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、结直肠癌、前列腺癌等。HO-1及其代谢终产物对细胞的保护作用与肿瘤细胞增殖、侵袭、转移等生物学行为密切相关，参与肿瘤的形成和发展，同时也是肿瘤产生对放化疗等治疗抵抗的重要因素。研究表明，使用HO-1 抑制剂锌原卟啉抑制HO-1 的表达可以导致肿瘤细胞对化疗和放疗更敏感。HO-1 对于肿瘤细胞的作用复杂，需要进一步研究阐明。

1 血红素加氧酶家族

血红素加氧酶是具有多种功能的微粒体酶，现已发现其具有3 种单体类型，分别被命名为HO-1、HO-2 和HO-3。这3 种酶主要分布的组织、发挥的生物学功能各异。HO-1 又被称为热激蛋白32（HSP32)，是相对分子质量为32 000的单体，属于诱导型酶，其表达具有组织及种属依赖性，主要分布于心、肝、脾、肾、骨髓等组织细胞内，除了在肝、脾内表达水平较高外，通常在大部分组织中低表达，在重金属、紫外线照射、缺氧等应激条件，及H2O2、NO、炎症细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β、IL-8等）、前列腺素（PG）、血红素及其衍生物等生物化学因子的刺激诱导下均可表达上调，在维持细胞稳态、降低氧化损伤、减轻炎性反应、抑制细胞凋亡和调节细胞增殖等方面发挥重要作用[2-3]。HO-2 和HO-3 在多种组织细胞中呈构成型表达。HO-2主要分布于大脑、视网膜和睾丸等器官组织，参与血红蛋白的降解[4]。HO-3 主要分布于脾脏、肝脏等组织，具有较低的酶活性，其功能尚未明确，目前有研究认为它可能参与调控血红素基因的表达，具有促进血红素和HO 结合的功能[5]。

2 HO-1在肿瘤组织中的表达及调控

近年研究表明，HO-1 与肿瘤的发生、发展密切相关。与周围正常组织相比，HO-1在大多数肿瘤组织中表达增强，包括前列腺癌[6]、乳腺癌[7]、胃癌[8]、肺癌[9]、结肠癌[10]、胰腺癌[11]、肾癌[12]、胶质细胞瘤[13]、慢性髓细胞性白血病[14]等。相关临床研究表明，HO-1的表达与肿瘤分化程度、分期及预后密切相关[15-19]。肿瘤分化程度越低，HO-1 的表达越高，提示HO-1表达高者，肿瘤恶性度相对较高，预后欠佳。大部分实体肿瘤中HO-1 的阳性表达与肿瘤浸润程度、淋巴结转移呈正相关，表明HO-1 在肿瘤浸润转移过程中扮演重要角色，其高表达有利于肿瘤细胞的增殖、转移等。提示其可作为新的标志物以及评估肿瘤进展程度的客观指标。研究还发现，HO-1在肿瘤细胞的表达可随着化疗、放疗等被强烈诱导，可能是肿瘤细胞获得性抵抗的重要机制[20-21]。虽然HO-1在肿瘤组织中表达增加，但关于它在肿瘤组织中的确切定位仍然要进一步研究，HO-1可能在肿瘤细胞和血管周围的巨噬细胞中有选择性地表达，不排除组织来源不同的差异。HO-1 的表达受多种转录因子的调控，各类刺激因子可激活上游信号激酶，如丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）、蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶c（PKC）和磷脂酰肌醇3-激酶（P13K），然后促使Nrf-2、AP-1、NF-κB等转录因子和DNA启动子的相应结合位点结合，使其转录活性增强，诱导HO-1 高表达[22]。目前研究认为Nrf2（nuclea factor erythroid-2-related factor 2）是调控HO-1 表达的主要转录因子，它的转录活性与氧化应激的诱导密切相关[23]。在正常细胞中，Nrf2 的活性被Keap1 蛋白（Kelch-like erythroid-derived cap-n-collar homology-associated protein 1）所抑制。Keap1蛋白主要分布于细胞质中，能够与Nrf2 蛋白结合，形成Keap1-Nrf2复合物，进而被泛素蛋白酶体降解，使Nrf2蛋白维持在较低水平，导致Nrf2 不能进入细胞核发挥其转录活性。在氧化应激条件下，Keap1-Nrf2 复合物被破坏，Nrf2 可进入细胞核，并与抗氧化反应元件（ARE）结合，从而启动包括HO-1 在内的多种抗氧化保护性基因的表达，进而保护细胞免受氧化应激的损伤[24]。在一些肿瘤细胞中，Nrf2 基因发生突变使活性增强，或Keap1失活突变或构象发生改变，都可导致Nrf2转录活性增强，从而促进肿瘤细胞增殖、转移[25-26]。也有报道认为其他转录因子如STAT3、AP-1、HIF-1、ATF2 和PI3K/Akt 等信号通路参与HO-1的表达调控[27-32]。HO-1的调控机制及其信号通路目前尚未完全阐明，还需要进一步研究。

3 HO-1与细胞凋亡

抗凋亡能力增强是肿瘤持续增殖的重要机制之一。研究表明，HO-1具有保护细胞、抗细胞凋亡的双重作用，并因此被称为“保护性基因”。HO-1抗凋亡的确切机制目前尚未阐明，但有较多的证据表明，其主要与调节细胞内活性氧（ROS）的浓度有关。Poss 等学者研究发现，与野生型细胞相比，HO-1 缺失的细胞中ROS 含量大幅上调[33]，而中、高浓度的ROS 能通过细胞氧化应激反应诱导细胞凋亡，因此HO-1 缺失的细胞防御氧化应激的能力显著下降。ROS是细胞线粒体在有氧代谢过程产生的电子排泄物，包括氧离子、过氧化物和含氧自由基等。这些粒子相当微小，由于存在未配对的自由电子，而十分活跃。过高的ROS 水平会对细胞和基因结构造成损坏。一般情况下，大部分ROS可被过氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶等抗氧化酶清除[34]，这过程需要HO-1 等酶的辅助。因此，这些抗氧化酶的稳定表达及激活能有效清除ROS 对细胞DNA 的损伤，减少基因突变，被认为是抑制肿瘤发生的重要机制[23]。另有研究认为，HO-1通过上调Bcl-2、下调Bax 蛋白，进而抑制caspase 诱导的细胞凋亡[35]。HO-1 保护细胞的作用机制与其分解产物CO、胆绿素、亚铁离子等密切相关。研究表明，CO 可以抑制ROS 的形成，并通过抑制细胞色素C 及caspase 蛋白的激活来抑制细胞凋亡信号通路的激活[36]。而胆绿素亦具有强大的抗氧化能力，可起到保护细胞的效应。Nuhn 等学者将胆绿素添加到胰腺癌细胞的培养基中，发现其能显著促进肿瘤细胞的生存[37]。此外，亚铁离子也对细胞起到保护作用，因为铁蛋白有细胞保护的效应，而亚铁离子恰恰又是铁蛋白生成不可缺少的原料。最近有一些研究认为，HO-1可介导细胞自噬的产生，降解并清除衰老、损伤的细胞器，维持细胞稳态，可能是其保护细胞、抑制凋亡的重要机制之一[38]。因此，HO-1 的抗凋亡、保护细胞作用在肿瘤发生发展的不同阶段可能扮演不同的角色：在肿瘤形成之前，HO-1可通过清除ROS对细胞的损伤，减少基因突变来抑制肿瘤的发生；而在肿瘤形成后，HO-1 使肿瘤细胞对凋亡的抵抗力增强，可促进肿瘤发展。因此，阐明HO-1 与肿瘤细胞凋亡的相关性，及其在肿瘤发生发展的不同阶段所起的作用，对于发展有针对性的治疗策略，预防和治疗肿瘤极为重要。

4 HO-1与肿瘤增殖、转移

研究表明，HO-1在增殖性较强的癌组织中表达常常上调，且与周围正常组织相比，大部分肿瘤组织中都能检测到HO-1 高表达。大量证据表明，在大部分肿瘤中，HO-1可促进肿瘤增殖。Was等[39]在黑色素瘤细胞中采用细胞转染技术增加HO-1 的表达，发现其明显促进黑色素瘤细胞的增殖，并在动物体内实验中得到验证。另有研究者将肝癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、肾细胞癌等恶性肿瘤细胞敲除HO-1后，可观察到肿瘤细胞的增殖能力减弱，动物实验显示瘤体的生长受到抑制，说明HO-1 在这些肿瘤中能促进肿瘤增殖[40-42]。在乳腺癌中，HO-1的作用有较大争议，一些研究认为其有抑制细胞增殖的作用[43]，而也有研究发现HO-1同样可促进乳腺癌细胞的增殖分化[44]。HO-1 促进肿瘤细胞增殖的分子机制目前仍不清楚，有研究认为可能与下调p21 的表达有关[45]。作为细胞周期调控蛋白，p21在调节细胞周期、抑制肿瘤增殖等生物学过程中发挥重要作用，是抑癌基因p53 发挥抗肿瘤作用的重要下游因子。HO-1 的活化可能抑制了p21 在多种肿瘤组织中的表达，从而促进肿瘤细胞增殖。除了参与肿瘤细胞增殖的调控外，HO-1 还被认为与肿瘤的浸润、转移恶性生物学行为密切相关。我们知道，肿瘤的浸润、转移是一个涉及多步骤的高度复杂过程，包括肿瘤细胞自身黏附能力减弱、肿瘤新生血管生成、肿瘤微环境发生改变等，参与调控某一步骤过程都可能影响肿瘤的浸润、转移。实验研究表明，HO-1可上调血管内皮生长因子（VEGF）的表达[46]，而VEGF 被认为是最重要的血管生成诱导物。动物实验也证实，HO-1 通过提高大鼠肿瘤新生血管的生长加速了胰腺癌、黑素细胞瘤、肺癌的生长[39,42,47]；通过特异性小干扰RNA（siRNA）或HO-1 抑制剂抑制HO-1 表达后，肺癌致癌活性下降，同时伴随VECF蛋白表达水平降低[47]。此外，HO-1 亦可增强肿瘤的侵袭、转移能力。在肺癌细胞中抑制了HO-1 表达后，基质金属蛋白酶MMP2 和MMP9 的表达出现明显下调，并伴随着细胞侵袭性的降低[48]。基质金属蛋白酶（MMP）是参与破坏细胞外基质最重要的蛋白水解酶，尤其是MMP2、MMP9，它们的表达产物除了可以酶解细胞间基质成分，还能酶解基底膜的主要成分Ⅳ型胶原[49]，极大地促进了肿瘤细胞的侵袭转移。同样地，在胃癌细胞中也发现，当HO-1 过表达时，MMP9 的表达明显上调[8]。然而，令人奇怪的是，研究人员发现，在HO-1阳性表达的胃癌组织中，淋巴结转移率却较低[8]，这提示在体内肿瘤的转移是一个多因素影响的复杂过程，并非单个因子可起到决定性的作用，可能涉及复杂的调控网络。进一步深入探讨HO-1在肿瘤发生、侵袭和转移过程中的作用，并可能通过降低HO-1 表达水平，进而抑制肿瘤细胞的增殖、转移，为临床寻找有效的治疗方案提供新思路。

5 HO-1与肿瘤耐药

肿瘤细胞对化疗药物敏感性降低，甚至出现多药耐药，是临床中肿瘤治疗失败的重要原因。多种实体肿瘤细胞中均可见HO-1 的高表达，而尤为引人注目的是相关癌细胞在缺氧条件下和放化疗后HO-1 表达明显增加。越来越多的实验证据显示，HO-1 的过量表达可能是肿瘤细胞适应较恶劣生长条件和产生放化疗抗性的主要原因之一。在对肝癌、肺癌、膀胱癌、结肠癌、神经细胞瘤等多种常见肿瘤的实验研究中均观察到，抑制HO-1 的表达可显著增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性[50-54]。HO-1参与影响肿瘤耐药的机制来自多方面。一些研究发现，HO-1 的过表达常常伴随多药耐药（MDR）蛋白及多药耐药相关蛋白（Mrp）的表达升高，从而降低癌细胞对化疗的敏感性[55]。许多抗肿瘤药物，包括铂类、阿霉素等，都可诱导肿瘤细胞产生大量的ROS，从而杀伤癌细胞，与此同时诱导产生的HO-1起到清除ROS 的作用，亦被认为是细胞获得性耐药的重要原因[56]。此外，如前所述，HO-1 可激活多种抗凋亡信号通路，也是肿瘤细胞耐药的重要机制之一。由于HO-1 对化疗药物的拮抗作用，一些学者在体外实验应用HO-1 抑制剂锌原卟啉（zinc protoporphyrin，ZnPP）联合化疗药物作用于肿瘤细胞，观察肿瘤细胞对化疗药物的反应变化，结果发现肿瘤细胞对化疗药物敏感性显著增加，相同的药物浓度下细胞凋亡明显增加[7,57]。这为HO-1抑制剂作为化疗增敏剂应用于临床治疗提供了理论依据。

6 结语

综上所述，HO-1 与肿瘤关系密切，除了在肿瘤组织中高表达外，其还能在重金属、过氧化氢、缺氧、放化疗等氧化应激反应中进一步诱导上调。HO-1及其代谢终产物对细胞的保护作用与肿瘤细胞增殖、侵袭、转移等生物学行为密切相关,同时也是肿瘤对放化疗产生抵抗的重要因素，但具体的作用机制尚未完全阐明，且HO-1 在不同肿瘤中的作用不完全一致。因此，我们除了进一步深入探索HO-1在肿瘤中的作用机制，还需要对不同类型肿瘤中HO-1的变化对于肿瘤发生发展的影响进行研究，为HO-1作为潜在的抗肿瘤治疗靶点提供依据。

[1]Shekhawat G,Verma K.Haem oxygenase(HO):an overlooked enzyme of plant metabolism and defence[J].J Exp Bot,2010,61(9):2255-2270.

[2]Keyse S M,Tyrrell R M.Heme oxygenase is the major 32-kDa stress protein induced in human skin fibroblasts by UVA radiation,hydrogen peroxide,and sodium arsenite[J].Proc Natl Acad Sci USA,1989,86(1):99-103.

[3]Ferrandiz M,Devesa I.Inducers of heme oxygenase-1[J].Curr Pharm Des,2008,14(5):473-486.

[4]Maines M D,Trakshel G M,Kutty R K.Characterization of two constitutive forms of rat liver microsomal heme oxygenase[J].J Biol Chem,1986,261(1):411-419.

[5]Hayashi S,Omata Y,Sakamoto H,et al.Characterization of rat heme oxygenase-3 gene.Implication of processed pseudogenes derived from heme oxygenase-2 gene[J].Gene,2004,336(2):241-250.

[6]Maines M D,Abrahamsson P A.Expression of heme oxygenase-1(HSP32) in human prostate:normal,hyperplastic,and tumor tissue distribution[J].Urology,1996,47(5):727-733.

[7]Gleixner K V,Mayerhofer M,Vales A,et al.Targeting of Hsp32 in solid tumors and leukemias:a novel approach to optimize anticancer therapy[J].Curr Cancer Drug Targets,2009,9(5):675-689.

[8]Yin Y,Liu Q,Wang B,et al.Expression and function of heme oxygenase-1 in human gastric cancer[J].Exp Biol Med,2012,237(4):362-371.

[9]Degese M S,Mendizabal J E,Gandini N A,et al.Expression of heme oxygenase-1 in non-small cell lung cancer(NSCLC)and its correlation with clinical data[J].Lung Cancer,2012,77(1):168-175.

[10]Becker J C,Fukui H,Imai Y,et al.Colonic expression of heme oxygenase-1 is associated with a better long-term survival in patients with colorectal cancer[J].Scand J Gastroenterol,2007,42(7):852-858.

[11]Berberat P O,Dambrauskas Z,Gulbinas A,et al.Inhibition of heme oxygenase-1 increases responsiveness of pancreatic cancer cells to anticancer treatment[J].Clin Cancer Res,2005,11(10):3790-3798.

[12]Flad T,Mueller L,Dihazi H,et al.T cell epitope definition by differential mass spectrometry:identification of a novel,immunogenic HLA-B8 ligand directly from renal cancer tissue[J].Proteomics,2006,6(1):364-374.

[13]Gandini N A,Fermento M E,Salomón D G,et al.Heme oxygenase-1 expression in human gliomas and its correlation with poor prognosis in patients with astrocytoma[J].Tumour Biol,2014,35(3):2803-2815.

[14]Tibullo D,Barbagallo I,Giallongo C,et al.Nuclear translocation of heme oxygenase-1 confers resistance to Imatinib in chronic myeloid leukemia cells[J].Curr Pharm Des,2013,19(15):2765-2770.

[15]Tsai J R,Wang H M,Liu P L,et al.High expression of heme oxygenase-1 is associated with tumor invasiveness and poor clinical outcome in non-small cell lung cancer patients[J].Cell Oncol,2012,35(6):461-471.

[16]Miyata Y,Kanda S,Mitsunari K,et al.Heme oxygenase-1 expression is associated with tumor aggressiveness and outcomes in patients with bladder cancer:a correlation with smoking intensity[J].Transl Res,2014,164(6):468-476.

[17]Li Y,Su J,DingZhang X,et al.PTEN deletion and heme oxygenase-1 overexpression cooperate in prostate cancer progression and are associated with adverse clinical outcome[J].J Pathol,2011,224(1):90-100.

[18]Wang T Y,Liu C L,Chen M J,et al.Expression of haem oxygenase-1 correlates with tumour aggressiveness and BRAF V600E expression in thyroid cancer[J].Histopathology,2015,66(3):447-456.

[19]Noh S J,Bae J S,Jamiyandorj U,et al.Expression of nerve growth factor and heme oxygenase-1 predict poor survival of breast carcinoma patients[J].BMC Cancer,2013,13:516.

[20]Kongpetch S,Kukongviriyapan V,Prawan A,et al.Crucial role of heme oxygenase-1 on the sensitivity of cholangiocarcinoma cells to chemotherapeutic agents[J].PloS One,2012,7(4):e34994.

[21]Zhang W,Qiao T,Zha L.Inhibition of heme oxygenase-1 enhances the radiosensitivity in human nonsmall cell lung cancer a549 cells[J].Cancer Biother Radiopharm,2011,26(5):639-645.

[22]Morse D,Choi A M.Heme oxygenase.1:the "emerging molecule" has arrived[J].Am J Respir Cell Mol Biol,2002,27(1)：8-16.

[23]Su Z Y,Shu L,Khor T O,et al.A perspective on dietary phytochemicals and cancer chemoprevention:oxidative stress,nrf2,and epigenomics[J].Top Curr Chem,2013,329:133-162.

[24]Jian Z,Li K,Liu L,et al.Heme oxygenase-1 protects human melanocytes from H2O2-induced oxidative stress via the Nrf2-ARE pathway[J].J Invest Dermatol,2011,131(7):1420-1427.

[25]Zhang D D,Hannink M.Distinct cysteine residues in Keap1 are required for Keap1-dependent ubiquitination of Nrf2 and for stabilization of Nrf2 by chemopreventive agents and oxidative stress[J].Mol Cell Biol,2003,23(22):8137-8151.

[26]Shibata T,Ohta T,Tong K I,et al.Cancer related mutations in NRF2 impair its recognition by Keap1-Cul3 E3 ligase and promote malignancy[J].Proc Natl Acad Sci,USA,2008,105(36):13568-13573.

[27]Elguero B,Gueron G,Giudice J,et al.Unveiling the association of STAT3 and HO-1 in prostate cancer:role beyond heme degradation[J].Neoplasia,2012,14(11):1043-1056.

[28]Aodengqimuge,Liu S,Mai S,et al.AP-1 activation attenuates the arsenite-induced apoptotic response in human bronchial epithelial cells by up-regulating HO-1 expression[J].Biotechnol Lett,2014,36(10):1927-1936.

[29]Lee P J,Jiang B H,Chin B Y,et al.Hypoxia-inducible factor-1 mediates transcriptional activation of the heme oxygenase-1 gene in response to hypoxia[J].J Biol Chem,1997,272(9):5375-5381.

[30]Kravets A,Hu Z,Miralem T,et al.Biliverdin reductase,a novel regulator for induction of activating transcription factor-2 and heme oxygenase-1[J].J Biol Chem,2004,279(19):19916-19923.

[31]Lee J,Kim S.Upregulation of heme oxygenase-1 expression by dehydrodiconiferyl alcohol(DHCA) through the AMPK-Nrf2 dependent pathway[J].Toxicol Appl Pharmacol,2014,281(1):87-100.

[32]Jeong Y H,Park J S,Kim D H,et al.Arctigenin increases hemeoxygenase-1 gene expression by modulating PI3K/AKT signaling pathway in rat primary astrocytes[J].Biomol Ther,2014,22(6):497-502.

[33]Poss K D,Tonegawa S.Reduced stress defense in heme oxygenase 1-deficient cells[J].Proc Natl Acad Sci,USA,1997,94(20):10925-10930.

[34]Kobayashi A,Ohta T,Yamamoto M.Unique function of the Nrf2-Keap1 pathway in the inducible expression of antioxidant and detoxifying enzymes[J].Methods Enzymol,2004,378:273-286.

[35]Singh N P,Singh U P,Nagarkatti P S,et al.Prenatal exposure of mice to diethylstilbestrol disrupts T-cell differentiation by regulating Fas/Fas ligand expression through estrogen receptor element and nuclear factor-kappaB motifs[J].J Pharmacol Exp Ther,2012,343(2):351-361.

[36]Wang X,Wang Y,Kim H P,et al.Carbon monoxide protects against hyperoxia-induced endothelial cell apoptosis by inhibiting reactive oxygen species formation[J].J Biol Chem,2007,282(3):1718-1726.

[37]Nuhn P,Kunzli B M,Hennig R,et al.Heme oxygenase-1 and its metabolites affect pancreatic tumor growth in vivo[J].Mol Cancer,2009,8:37.

[38]Banerjee P,Basu A,Wegiel B,et al.Heme oxygenase-1 promotes survival of renal cancer cells through modulation of apoptosis-and autophagy-regulating molecules[J].J Biol Chem,2012,287(38):32113-32123.

[39]Was H,Cichon T,Smolarczyk R,et al.Overexpression of heme oxygenase-1 in murine melanoma:increased proliferation and viability of tumor cells,decreased survival of mice[J].Am J Pathol,2006,169(6):2181-2198.

[40]Doi K,Akaike T,Fujii S,et al.Induction of haem oxygenase-1 nitric oxide and ischaemia in experimental solid tumours and implications for tumour growth[J].Br J Cancer,1999,80(12):1945-1954.

[41]Chen G G,Liu Z M,Vlantis A C,et al.Heme oxygenase-1 protects against apoptosis induced by tumor necrosis factor-alpha and cycloheximide in papillary thyroid carcinoma cells[J].J Cell Biochem,2004,92:1246-1256.

[42]Hirai K,Sasahira T,Ohmori H,et al.Inhibition of heme oxygenase-1 by zinc protoporphyrin IX reduces tumor growth of LL/2 lung cancer in C57BL mice[J].Int J Cancer,2007,120(3):500-505.

[43]Hill M,Pereira V,Chauveau C,et al.Heme oxygenase-1 in-hibits rat and human breast cancer cell proliferation:mutual cross inhibition with indoleamine 2,3-dioxygenase[J].FASEB J,2005,19(14):1957-1968.

[44]Deng R,Wang S M,Yin T,et al.Inhibition of tumor growth and alteration of associated macrophage cell type by an HO-1 inhibitor in breast carcinoma-bearing mice[J].Oncol Res,2013,20(10):473-482.

[45]Kumar D,Bhaskaran M,Alagappan L,et al.Heme oxygenase-1 modulates mesangial cell proliferation by p21 Waf1 upregulation[J].Ren Fail,2010,32(2):254-258.

[46]Cisowski J,Loboda A,Jozkowicz A,et al.Role of heme oxygenase-1 in hydrogen peroxide-induced VEGF synthesis:effect of HO-1 knockout[J].Biochem Biophys Res Commun,2005,326(3):670-676.

[47]Sunamura M,Duda D G,Ghattas M H,et al.Heme oxygenase-1 accelerates tumor angiogenesis of human pancreatic cancer[J].Angiogenesis,2003,6(1):15-24.

[48]Liu P L,Tsai J R,Charles A L,et al.Resveratrol inhibits human lung adenocarcinoma cell metastasis by suppressing heme oxygenase 1-mediated nuclear factor-kappaB pathway and subsequently downregulating expression of matrix metalloproteinases[J].Mol Nutr Food Res,2010,54(2):196-204.

[49]Sternlicht M D,Werb Z.How matrix metalloproteinases regulate cell behavior[J].Annu Rev Cell Dev Biol,2001,17:463-516.

[50]Kongpetch S,Kukongviriyapan V,Prawan A,et al.Crucial role of heme oxygenase-1 on the sensitivity of cholangiocarcinoma cells to chemotherapeutic agents[J].PLoS One,2012,7(4):e34994.

[51]Jeon W K,Hong H Y,Seo W C,et al.Smad7 sensitizes A549 lung cancer cells to cisplatin-induced apoptosis through heme oxygenase-1 inhibition[J].Biochem Biophys Res Commun,2012,420(2):288-292.

[52]Miyake M,Fujimoto K,Anai S,et al.Inhibition of heme oxygenase-1 enhances the cytotoxic effect of gemcitabine in urothelial cancer cells[J].Anticancer Res,2010,30(6):2145-2152.

[53]Yin H,Fang J,Liao L,et al.Upregulation of heme oxygenase-1 in colorectal cancer patients with increased circulation carbon monoxide levels,potentially affects chemotherapeutic sensitivity[J].BMC Cancer,2014,14:436.

[54]Furfaro A L,Piras S,Passalacqua M,et al.HO-1 up-regulation:a key point in high-risk neuroblastoma resistance to bortezomib[J].Biochim Biophys Acta,2014,1842(4):613-622.

[55]Nishiya T,Kataoka H,Mori K,et al.Tienilic acid enhances hyperbilirubinemia in Eisai hyperbilirubinuria rats through hepatic multidrug resistance-associated protein 3 and heme oxygenase-1 induction[J].Toxicol Sci,2006,91(2):651-659.

[56]Fang J,Seki T,Maeda H.Therapeutic strategies by modulating oxygen stress in cancer and inflammation[J].Adv Drug Deliv Rev,2009,61(4):290-302.

[57]Nowis D,Bugajski M,Winiarska M,et al.Zinc protoporphyrin IX,a heme oxygenase-1 inhibitor,demonstrates potent antitumor effects but is unable to potentiate antitumor effects of chemotherapeutics in mice[J].BMC cancer,2008,8:197.