自体干细胞移植联合高压氧治疗失代偿期肝硬化疗效观察

刘克万，陈伟

作者单位：230031合肥市解放军第105医院高压氧科

自体干细胞移植联合高压氧治疗失代偿期肝硬化疗效观察

刘克万，陈伟

作者单位：230031合肥市解放军第105医院高压氧科

第一作者：刘克万，男，44岁，主治医师。E-mail: liukewan1971@aliyun.com

【摘要】目的探讨自体骨髓干细胞移植联合高压氧治疗失代偿期肝硬化患者的疗效。方法回顾性分析2010年10月～2012年10月在我院住院治疗的48例失代偿期肝硬化患者在接受自体骨髓干细胞移植或/和联合高压氧治疗后6个月时的疗效。结果24例接受联合治疗的患者在治疗后2天所有患者失眠、纳差、乏力症状开始改善，而24例对照组只有1例患者以上症状开始改善；在治疗后6个月，联合治疗患者血清总胆红素、谷丙转氨酶、白蛋白和凝血酶原活动度分别为（28.6±19.1）μmol/L、（111.0±55.2）U/L、（35.2±8.5）g/L和（75.6±10.4）%，而对照组则分别为[（35.3±21.7）μmol/L、（267.0±124.0）U/L、（28.8±7.8）g/L和（57.9±11.7）%，P<0.05]。结论自体骨髓干细胞移植联合高压氧治疗失代偿期肝硬化患者能迅速改善临床症状，促进睡眠，且能在近期恢复肝功能。

【关键词】失代偿期肝硬化；干细胞；高压氧；治疗

Autologous bone marrow stem cell transplantation in combination of hyperbaric oxygenation in treatment of patients

decompensated liver cirrhosis

Liu Kewan，Chen Wei. Department of Hyperbaric Oxygenation，105th Hospital，Hefei 230031

【Key words】Liver cirrhosis；Autologous bone marrow stem cell transplantation；Hyperbaric oxygenation；Efficacy

肝硬化是世界性分布的常见病，病因多样，各国多发病因也不一样。我国以乙型肝炎和丙型肝炎肝硬化为多，其发病率未见减少。在大多数患者，因疾病和社会因素的影响，多伴有不同程度的睡眠障碍或失眠。对于失代偿期肝硬化患者，常规内科只能针对病因治疗和给予对症处理。寻求疗效较好的治疗失代偿期肝硬化或阻止或延缓其病情进展的方法显得尤为重要。干细胞来源丰富，且可取自自体骨髓，进行干细胞移植可避免排斥反应，取材方便，能被一般患者所接受。目前，国内外已经有干细胞移植治疗肝硬化的临床观察报告，很多学者开展了一系列基础和临床研究，并取得了一定的成果，为骨髓干细胞移植提供了较为完备的理论和实验基础，而自体骨髓干细胞经肝功脉插管介入移植治疗在临床上已经成为一种可行的技术。但干细胞移植仍然处于起步阶段，要大规模地应用于临床，还需要更深入的探索。本文就我院近年来采用自体骨髓干细胞移植联合高压氧（Hyperbaric oxygenation,HBO）治疗活动性肝硬化患者的疗效观察汇报如下。

1　资料与方法

1.1病例选择2010年10月～2012年10月我院收治的失代偿期肝硬化患者48例，其中肝炎肝硬化30例（62%），酒精性肝硬化6例（13%），原发性胆汁性肝硬化4例（8%），血吸虫病性肝硬化2例（4%）,隐源性肝硬化6例（13%）。诊断符合2010年中华医学会肝病学分会和感染病学分会修订的慢性乙型肝炎防治指南[1]及其相关标准。研究计划经医院伦理委员会备案，全部患者入组时均对治疗研究充分知情并签字同意。采用随机数字表法将患者分为联合治疗组和对照组各24例。联合治疗组中男性15例，女性9例，年龄20～63岁，平均年龄（39.3±3.7）岁；对照组中男性14例，女性10例，年龄21～65岁，平均（40.4±4.0）岁。两组患者在性别、年龄和病因方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。入组病人均有纳差、乏力和失眠症状，均无活动性出血、气胸、精神异常及氧中毒史等高压氧治疗绝对禁忌证。

1.2治疗方法给予对照组经肝动脉自体骨髓干细胞移植术及内科常规应用促肝细胞生长素、苦参碱抗肝纤维化、降低门静脉压及对症支持等治疗；联合治疗组在对照组的基础上联合高压氧治疗：使用芜湖潜水装备厂生产的大型医用高压氧舱（证书编号为CY2003352），加压25 min,稳定压力为0.20 MPa（2.0 ATA），稳压时间为70 min，稳压期间吸管道纯氧30 min后休息，休息期间呼吸舱内空气，休息10 min后再吸纯氧30 min，减压30 min出舱。吸氧方式为戴面罩吸氧，1次/d，连续20 d。每次治疗后，舱内行空气消毒。

1.3观察指标常规检测血生化、凝血等指标。

1.4统计学处理计量资料以（x±s）表示，应用SPSS 13.0软件行t检验，P<0.05为具有显著性统计学差异。

2　结果

2.1临床症状改善情况联合治疗组所有患者在治疗2天后失眠、纳差、乏力症状开始改善，而对照组只有1例患者以上症状开始改善。

2.2肝功能指标变化情况治疗后6月观察疗效，结果见表1。

3　讨论

在肝硬化的发病过程中，由于毒物或致病微生物的不断作用，肝细胞发生水肿、变性、坏死；而另一方面，由于肝细

胞坏死可诱发周围非实质细胞受损，纤维结缔组织增生，肝组织瘀血，氧供给障碍，引起肝损伤进一步加重，形成恶性循环。近来的研究发现，肝硬化患者不仅存在肝脏局部瘀血等因素所致的内呼吸障碍，还有肝-肺综合征样的外呼吸异常。据报道，30%～70%肝硬化患者存在低氧血症[2]。缺血和缺氧可影响肝细胞线粒体功能和肝组织微循环功能，影响肝细胞新陈代谢。在肝硬化形成过程中，大量纤维结缔组织增生，胶原纤维沉积于肝窦血管壁内、外，使肝窦毛细血管化，导致氧弥散距离延长，引起缺氧；在肝纤维化假小叶内，由2～3层细胞组成的肝细胞板层取代了正常的单层细胞层，使肝组织血管表面积与肝窦面积之比的绝对值下降，导致肝细胞和肝组织缺氧。另外，由于长期的疾病折磨，久治不愈和病情反复发作，肝硬化患者病情逐渐进展和加重，使其对治疗失去信心，长期治疗的经济压力增加，担心疾病影响了工作，这些因素都能导致患者睡眠障碍或失眠，如此恶性循环，造成肝损害加重，出现纳差、乏力、尿黄和失眠。

干细胞具有自我更新、增殖和多向潜能分化的细胞，可不对称分裂和无限增殖。按来源不同，可将干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞[3]。骨髓干细胞就是成体干细胞的一种。骨髓干细胞有多向分化潜能及自身增殖的特性，且取材方便，组织损伤小，易于自体移植、无排斥反应，而且没有胚胎干细胞移植的伦理学争论，是理想的细胞来源，所以迄今应用于临床研究的主要是骨髓干细胞。目前，国内外有研究证实，从骨髓中分离出来的干细胞在体外分化诱导剂的作用下可分化为肝样细胞。干细胞移植的途径有原位移植和非原位移植。非原位移植包括外周静脉移植，但外周静脉移植可能由于肺的拦截作用，使到达病灶的干细胞数目受限。本组选用自体骨髓干细胞是存在于骨髓中的多潜能细胞，在放射介入下经导管插入肝动脉进行细胞移植。

患者在高于1个大气压（ATA）的环境里吸入100%纯氧治疗疾病的过程即为高压氧治疗。2006年，美国Stephen教授在《美国心脏与循环生理杂志》上发表了《高压氧治疗使干细胞释放》的论文，将高压氧治疗带入了又一个里程碑。他认为，干细胞对损伤的修复起决定性作用，高压氧治疗的患者体内循环干细胞数量增加了8倍。高压氧治疗是临床上提升干细胞数量最安全的方法，比其他任何药物都安全有效。本组病例中高压氧在其中起到一举两得的效果：对“病肝”的治疗作用，主要与与HBO特性有关：（1）HBO能提高动脉血氧分压，增加氧的有效弥散半径及弥散速度，使脑组织获得了充足的氧供，使大脑氧代谢增强，葡萄糖利用率增加，ATP生成增多，能使网状系统和脑干部位供血增加，从而改善垂体、边缘系统及大脑皮层的功能，使失调的大脑皮层的生理活动逐渐得到恢复，改善睡眠[4，5]，使食欲增强，体力恢复；（2）HBO能明显增加血液中物理溶解氧，提高血氧含量，减轻肝组织瘀血，改善缺血、缺氧；（3）HBO能增加微血管血流速度，减少红细胞和血小板聚集，改善红细胞弹性和变形能力，对于微循环紊乱的肝硬化组织也有益处；（4）HBO可以促进血管成纤维细胞的活动和分裂，促进新生血管的形成，加速侧支循环的建立，从而明显改善肝脏血液循环，改善血液黏滞度，促进受损组织的再生与修复，恢复肝功能。高压氧治疗能促进干细胞增殖和分化。彭争荣等[6]在培养神经干细胞时，在不同条件下培养，将高压氧组置于高压动物舱内，给予0.2 MPa （2.0 ATA）大气压，氧浓度在80%以上；高压力组给予细胞0.2 MPa（2.0 ATA）大气压的压缩空气；高浓度氧组给予80%以上的氧；对照组给予正常气压和正常氧浓度。7 d后发现高压氧组神经元分化率明显高于对照组、高浓度氧组和高气压组，胶质细胞分化率却低于以上3组，表明高压氧处理能上调神经干细胞向神经元分化的比例，高压氧还能促进干细胞在体内存活、迁移。在移植干细胞后，主要存在的问题是移植细胞能否存活并到达受损部位，高压氧在这方面能起到积极的作用。

干细胞治疗失代偿期肝硬化患者的效果已经在临床实验中得到证实。从本文资料看，联合高压氧治疗，可进一步增加疗效。可以推测联合高压氧可能成为治疗多种疾病的新思路及有效手段，不失为一种经济有效的方法。由于本次观察病例数较少，时间不长，其疗效仍需观察。由于检测指标的局限，尚缺乏病理学和超声影像学方面的资料，每次移植干细胞的数目、移植次数、移植间隔及高压氧稳定在多大的压力为宜尚无文献报导，这些问题都有待于后续研究探索。

【参考文献】

[1]中华医学会肝病学分会和感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）.实用肝脏病杂志，2011，14（2）：81-89.

[2]Moller S,Hillingso J,Christensen E,et al. Arterial hypoxaemia in cirrhosis:fact or fiction Gut,1988,42:868-874.

[3]姚鹏，胡大荣，王帅,等.自体骨髓干细胞移植治疗慢性重症肝病临床研究.透析与人工器官,2006,17:18-21.

[4]戴毓华，姜莲玉，刘华.高压氧治疗老年失眠症38例报告.医学文选，1999，18（4）:573-574.

[5]房广才.临床高压氧医学.北京华文出版社,1995:345-347.

[6]彭争荣，王素娥，肖平田.高压氧对脑源性神经干细胞分化的影响.中国组织工程研究与临床康复，2007，11:427-430.

（收稿：2015-05-30）

（本文编辑：陈宗炳)

·短篇论著·

DOI：10.3969/j.issn.1672-5069.2015.04.025