围产期孕妇B群链球菌感染的检测及耐药性分析

许爱霞，余跃华，舒向荣

(江西省妇幼保健院，江西 南昌330006)

围产期生殖道细菌感染易造成早产、死胎、胎膜早破、子宫内膜炎等疾病，分娩时经生殖道感染可引发婴儿败血症、新生儿肺炎和脑膜炎，其中B群链球菌(Group B streptococcus，GBS)是主要致病菌之一。上世纪90年代以来，在发达国家GBS被列为围产期感染的首要病原菌之一[1]，而在国内GBS严重感染及胎儿、新生儿死亡的病例时有发生[2]。本文对1200例围产期孕妇和非妊娠育龄妇女GBS感染情况进行了分析，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 收集20l1年3月-20l3年12月在本院产科门诊检查或产科住院的围产期孕妇600例,孕期35~37周,年龄2l~40岁,平均年龄29.3岁；同时收集同期在本院体检的非妊娠育龄妇女600例，年龄19~41岁,平均年龄29.7岁，两组一般资料比较无统计学差异(P>0.05)。常规妇产科体检的同时，不作清洁处理，由医师规范采集阴道拭子标本,立即送检进行培养。

1.2 仪器和试剂 链球菌分型胶乳凝集试剂盒 (法国Biomeriux公司)，二氧化碳培养箱(美国热电公司)，细菌鉴定仪(美国德林公司)，哥伦比亚血琼脂平板和抗菌药物纸片(英国Oxoid公司)。

1.3 方法

1.3 .1标本采集 具体方法参照2002年CDC推荐的取材方法,在进行取材时,先擦去外阴分泌物,将无菌阴道棉拭子放入阴道下l/3内,旋转l周采取阴道分泌物。

1.3 .2细菌培养鉴定 将阴道棉拭子直接涂在血平板上，在35℃5%CO2培养箱中孵育24~48h。观察血平板上菌落特点，挑取可疑菌落，在血平板上进行纯培养，然后进行涂片、革兰染色镜检和相应的生化等鉴定。并同时用链球菌B群分型试剂盒做凝集试验，用细菌鉴定仪鉴定，并操作CAMP试验确认，阳性结果符合B群链球菌感染。

1.3 .3 药敏试验 采用纸片扩散法(K-B法)，操作步骤依据《全国临床检验操作规程》第3版[3]进行。选择青霉素、氨苄西林、头孢曲松、克林霉素、红霉素、万古霉素、左氧氟沙星7种抗菌药物纸片。对红霉素、克林霉素敏感的菌株做D试验检测。药敏结果判断依据2009年CLSI标准进行。

1.4 统计学处理 采用SPSSl5.0软件进行数据处理和分析，计数资料用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 GBS检出情况 共检出GBS101株，其中围产期孕妇GBS检出率为8.67%(52/600)；非妊娠妇女GBS检出率为8.17%(49/600)，两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。GBS血清学分型包括A、B、C、D、F和G6种，各型均有检出，其中以 B型(34.65%)、A 型(30.69%)、G 型(21.78%)为多见。 各年龄组的围产期孕妇和非妊娠育龄妇女均可见到阳性结果。

2.2 耐药性分析 101株GBS阳性标本全部进行链球菌药物敏感试验，7种抗菌药物的耐药率为青霉素(1.98%)、氨苄西林(2.97%)、头孢曲松(3.96%)、万古霉素(0.00%)、左氧氟沙星(17.82%)、红霉素(22.77%)、克林霉素(26.73%)见表 1。

表1 围产期孕妇B群链球菌感染药敏实验结果(%)

3 讨论

B族溶血性链球菌 (Group B streptococcus，GBS)又称无乳链球菌，自上世纪70年代以来，已被证实为围产期母婴感染的主要病原菌之一。GBS是一种寄生于人类下消化道及泌尿生殖道的条件致病菌，国外研究显示健康人群GBS带菌率可达15%~35%，妊娠妇女的带菌率为10%~30%[4]。国内报道的妊娠妇女GBS带菌率为3.5%~32.4%[5,6]。在本组围产期妇女中GBS带菌率8.67%,非妊娠育龄妇女带菌率8.17%，两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。本组结果与国内的报道基本相近，与国外的报道有少许差异。分析原因可能有以下几点：(1)检测方法的差异：目前临床检测GBS方法有多种，但最常用的还是细菌培养法，尽管一些新型的检测方法有较高的敏感性和特异性[7-9]，但由于价格偏贵，尚未在临床广泛应用，检测方法滞后可能是造成GBS感染漏诊的原因[10]；(2)取材方法、部位和检查时间，以及取标本前患者服药和身体状态；(3)既往病史的影响：有流产史的产妇，有宫内节育器者，有妇科炎症史者的阴道GBS带菌显著增多[11]。

本组链球菌药物敏感试验发现现培养分离出的101例GBS对万古霉素敏感率100%，青霉素98.02%，氨苄青霉素97.03%,头孢曲松96.04%，而对左氧氟沙星、红霉素、克林霉素的敏感率分别为71.29%、63.37%、57.43%，与国内其他研究敏感率相似[12,13]。目前多数报道显示B群链球菌对青霉素和氨苄青霉素敏感，但也有耐药株出现。本组发现青霉素和氨苄青霉素有几例耐药，而且随着抗生素广泛使用，GBS对青霉素类耐药性也会逐渐增高；而左氧氟沙星、红霉素和克林霉素有较高的耐药性，且红霉素和克林霉素的耐药率也高于国外文献报道的16．7%和11%的耐药率[14]。有研究报道GBS对红霉素和克林霉素的耐药主要由ermB基因介导[12]。根据表面抗原的有无和荚膜多糖体的结构差异，可将 GBS 分为不同的血清型(A、B、C、D、F和G6种型)，决定何种血清型造成的感染，可发展相应的疫苗，并由此类疫苗接种来保护孕产妇及新生儿。目前GBS疫苗尚在临床评估中，临床仍以药物治疗为主。本组研究GBS围产期孕妇感染B型(34.65%)、A 型(30.69%)、G 型(21.78%)为多见。

由于GBS围产期感染有上升趋势，且会对母婴造成不良影响，故临床应加大对孕产妇GBS感染的筛查力度，重视对GBS感染的研究,密切关注耐药流行株的发展和传播，加强临床监测；采取可行方法，避免GBS感染可能给母婴带来的严重后果。发现高危孕产妇GBS阳性，应及时干预治疗。

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