史氏鲟幼鱼超声波性别鉴定技术
2015-03-23鲁宏申王云山李文龙刘建魁胡光源黑龙江省特产鱼类研究所黑龙江佳木斯154002
鲁宏申 王云山 李文龙 刘建魁 韩 骥 胡光源(黑龙江省特产鱼类研究所 黑龙江 佳木斯 154002)
史氏鲟幼鱼超声波性别鉴定技术
鲁宏申王云山李文龙刘建魁韩骥胡光源
(黑龙江省特产鱼类研究所黑龙江佳木斯154002)
摘要:本文通过阐述了史氏鲟早期超声波性别鉴定所需材料、方法、图像解析及注意事项,为史氏鲟的性别鉴定提供了科学、快捷、有效实用的方法
关键词:史氏鲟;超声波;性别鉴定
史氏鲟隶属于鲟形目鲟科鲟属,为河川性定居鱼类,主要分布在黑龙江流域。随着全球对鱼子酱需求的扩大,我国鲟鱼养殖规模也在不断扩大,在全国各地掀起一股鲟鱼养殖热潮。近年来,越来越多有实力的鲟鱼养殖企业转向以鲟鱼鱼子酱加工为主的经营模式,史氏鲟作为其中的主要养殖种类之一,由于其性成熟时间长,自然条性成熟年龄为11-13年,人工养殖的性成熟早一些,一般也需要6-7年,而且史氏鲟第二性征不明显,很难从外观上区分雌雄,直接导致商品化养殖过程中成本增加、资金周转困难等问题。因此,准确快速判别早期史氏鲟的性别是个亟待解决的重要问题。目前,国内外关于鲟鱼性别的鉴定方法有:利用泌尿生殖导管插入术、血浆磷脂蛋白分析技术、卵黄蛋白浓度分析法、免疫学方法、类固醇激素水平放射性免疫测定法,内窥镜、腹腔穿刺等方法,但这些技术方法既耗时,工作量又大,且极易对被检测的鱼造成一定的伤害,相比之下,超声波技术无创伤,速度快,准确率高,是非常有效的鉴别方法,故笔者对2万多尾2-3龄史氏鲟做了早期的性别鉴定实验。
一、操作工具材料
迈瑞DP-6100超声波检查仪及配套的7.5MHz探头,220V电源,放置鲟鱼的操作台,放置超声波检测仪的操作台(能将超声波检测仪遮光,且人可以观看屏幕),拦鱼网等。
二、操作方法
检测季节一般选择在春季,检测前将待检的史氏鲟停食15-20d,检测时可以用丁香油(0.1g/L)麻醉,也可以直接用拦鱼网将史氏鲟密集起来,使其暂时缺氧,以便取样顺利进行。将麻醉或缺氧后的史氏鲟放置于鲟鱼操作台上,以右手为例,鱼背部朝向操作者,头部方向与操作者的前方一致,侧放在操作台上,操作者手握探头,将探头紧贴在鱼体腹侧,有纵切面和横切面两种,都是判别性别不可或缺的,检测顺序可以从胸鳍后面到从腹鳍开始数的3-4骨板之间的位置,也可以反过来,根据个人习惯操作。然后轻微摆动探头已找到清晰的性腺图像,进行性别判定,将雌雄分开。另外,在鉴别过程中,有部分个体多种原因导致发育不好,不能通过超声波检查仪进行鉴定,可将其单独放到一个池子里,以便以后再次鉴别。
三、图像解析
图像在超声波检测仪屏幕上从上到下的结构依次为:1、皮肤,最上面很薄的高回声区域;2、皮下脂肪组织,中度回声很窄的条纹区域;3、肌肉,为混合发生的一片宽的区域,肌肉在屏幕上表现为倾斜的明暗交替的窄条;4、腹腔膜,一条光滑明亮清晰的边界线;5、性腺,有或没有外膜覆盖,回声发生结构复杂;6、结肠,呈现一个空的或粘的管,探头位置不同在图像上不一定都呈现,在横切面图像上很容易找到肠道螺旋瓣图像。
2-3龄的史氏鲟性腺发育基本在第2期到第3期之间,下面对雌雄个体分别阐述:
1、雌性
因为较雄性发育慢,主要在2期、2期半脂肪期和2期完全脂肪期。
(1)2期。卵母细胞部分是白色的,脂肪为黑色,纵切面超声波图像看起来像云彩,卵母细胞的侧面间隔有脂肪组织,贯穿头部到尾部,没有整齐的边缘和被膜;横切面上性腺组织的下面部分为黑色的脂肪,卵母细胞部分在上方呈白色。
(2)2期半脂肪期。随着性腺的发育脂肪逐渐增多,整个性腺两侧和中间脂肪的包围比例渐多,并且卵母细胞部分颜色变淡,为亮灰色或灰色,该时期纵切面和横切面上都较容易辨认。
(3)2期完全脂肪期。该时期性腺中的脂肪又增多了,卵母细胞部分比例渐小,并且颜色变成暗灰色,该时期要仔细辨别,尤其是横切面,否则易将整个性腺部分视为脂肪。
以上时期雌性史氏鲟超声波图像的主要特点是性腺无被膜,边缘模糊,卵母细胞囊泡很小,在超声图像上不可见,但性腺中间图像还是有依稀颗粒感,且仔细观察也会感觉有卵叶状结构。另外从2期到2期完全脂肪期期性腺回声图像由明亮逐渐变暗,且脂肪占比越来越大,图像要仔细观察才能看到卵母细胞部分。
2、雄性
发育较快,主要在2期半脂肪期、2期完全脂肪期和3期。
(1)2期半脂肪期。整个性腺组织由精原细胞部分和脂肪部分组成,且脂肪部分逐渐增多,纵切面图像上脂肪部分和精原细胞部分被一条亮线即被膜分开,并且两部分均呈黑色,横切面上精原细胞部分为圆型黑色被亮线包围,外面黑色为脂肪组织。
(2)2期完全脂肪期。这个时期与2期半脂肪期图像相似,只是脂肪部分增多,精原细胞部分比例渐小,颜色暗灰色,横切面上为扁圆形。
(3)3期。性腺组织的脂肪部分几乎被生殖细胞吸收完毕,纵切面整个图像被两条亮线包围,中间为黑色;横切面上为扁圆形周围被亮线即被膜包围。
以上时期雄性史氏鲟超声波图像的主要特点是性腺有被膜,边缘光滑,性腺内部图像均质,性腺部分基本为黑色或灰黑色,脂肪部分有为油滴状结构。到三期时,脂肪结构很小几乎没有,基本为雄性性腺所占据。
四、检测注意事项
1、鉴别前一定要停食,否则肠道或肠道内的气体会挡住性腺图像,不能操作。
2、鉴别时间选择春季较好,鉴别准确率较高,因为鲟鱼在夏季的摄食旺盛,导致体内脂肪含量增加,从而干扰了性别的判断。
3、检查时检测环境要遮阳,避免超声波检测仪屏幕看不清导致错误判断。
4、操作者要有一定的技术水平,更好的辨别雌雄需要操作者具有丰富的相关知识和实践经验。
5、史氏鲟的鉴别体重以2.5-3kg为宜,且体型匀称,不能太瘦,太瘦性腺发育较小,不能操作,因为性腺的最小线性长度要大于超声波波长10-20倍,否则无法达到镜面反射的效果,器官的边缘看不清或根本看不到。