公猪的精液采集、评价和处理



公猪的精液采集、评价和处理

(广东省河源市源城区埔前动物卫生监督分所 517000)

袁克金

种公猪精液的正确采集、鉴定和处理是猪繁育配种的关键技术。种公猪采精前的爬跨训练是必要的，应确保合适的采精时间、采精方法和精液品质评价方法，还需正确地处理新鲜精液。

一般未成熟的公猪对环境中的行为刺激特别敏感。触觉刺激对公猪行为发育尤为重要。在隔离饲养、缺乏触觉刺激环境下长大的公猪青春期到来较迟，性欲较差，交配能力也较差。随着公猪的成长，人为的干预可以促使公猪产生接近或者逃避反射。一旦公猪留作种用，有许多因素可以影响到射精的时间和精子的质量，包括：采精频率、采精地点、采精前公猪的准备工作等。在种公猪的管理上，推挤冲撞种公猪不利于将来采精工作的进行。

1种公猪采精前的训练

一般后备公猪在体成熟时才能进行采精爬跨调教，年龄在8～10月龄，体重在90～120 kg[1]。爬跨台畜采精的关键在于：必须在早期就开始对公猪进行训练，采精地点必须能让公猪立即注意到采精的台畜；公畜必须将采精地点和过程与采精的愉悦联系起来。当公猪看到一个类似猪的不动的物体时，可以刺激公猪产生爬跨反射。所以，采精场所必须干净，而且除了采精台畜以外，不存在能分散公猪注意力的其他东西。当然，当采精台畜和地点使用时间久后，会散发出强烈的气味，此气味也可以刺激公猪，加速爬跨的过程。年幼公猪对台畜的注意力时间较短暂，爬跨通常发生在训练初期的5～7 min。若此时公猪对台畜没有任何兴趣，则此次训练中，公猪可能不会出现爬跨行为。

在训练过程中，接触台畜前5～10 min给公猪注射PGF2α(20 mg/只，肌肉注射)可以促进爬跨行为的出现。若公猪将采精地点或采精过程与不好的感觉(如害怕、疼痛等)相联系，则训练会变得比较困难。采精过程中的不愉快的记忆会降低种公猪的性活动。所以，采精过程中避免粗暴采精和噪声是训练成功的关键。年幼的未有过自然交配经历的公猪是最容易训练的。年龄较大且有过自然交配经历的公猪，其训练时间会较长，且成功率较低。公猪开始训练的时间和训练的成功率之间是呈负相关的。若在10月龄之前开始训练，成功率可达90%；但在10～18月龄开始训练，则成功率仅为70%。

2精液的采集

精液采集最常用的方法是手套采精。但目前已经出现了自动采精技术，且逐渐在推广。不管是哪一种技术，都必须通过挤压阴茎头来促进阴茎勃起和射精。在阴茎勃起后，减小阴茎末端的压力有利于精子的射出。在采精前要先清除包皮中的液体，包皮剃毛能极大地减少精液污染。

采精时降低精液污染的措施为：①包皮口周围去毛；②使用双层手套，在公猪准备过程结束后将外层手套扔掉，保证抓握阴茎的手套是清洁的；③为了减少精液的污染、降低交叉污染的风险，在采精过程中应使用一次性手套或进行手部消毒；④清洁包皮口及其周围区域；⑤在采精前清洗包皮，防止包皮内残留液体；⑥水平持握阴茎，以最大程度减小包皮中的液体造成精液和精液采集容器污染；⑦射精初期的部分和采精管中的凝胶部分需要丢弃；⑧在将精液送到实验室之前需要处理橡胶圈和过滤器/纱布[2]。

需要说明的是，应激和过度采精是导致猪精子质量不佳的主要原因，其中热应激是最常见的原因。热应激可以影响生精过程，导致精子运动力下降，形态异常的精子比例升高，精子总数减少。在热应激后的10～14 d，射出的精液就出现变化，此种变化可以持续几周时间。所以，公猪的环境温度应该保持在27 ℃以下，50%的相对湿度，这样就可以有效避免热应激。

3精液的评价

目前，已经能对精液的质量进行常规的体外检查。很多检查都可以诊断出质量明显不佳的精子。在猪的人工授精产业中，标准的检查内容包括外观、精子运动性、精子形态、精子浓度以及射精量。

外观评估：每一次采精后，都需要进行外观评价，包括透明度和颜色。正常情况下，精液应该呈灰白色，外观呈奶样。异常颜色包括棕色、红色、黄色，分别表示受到了脓液、血液、尿液的污染，此精液不能用于人工授精。

精子的运动性和形态学：运动性一般通过计数精液中有较强运动力的精子所占的比例来表示。在精液的评估中，精子的运动性是最常用的检测指标。它既可以人为估测，也可以通过计算机辅助精液分析(CASA)系统来进行检测。人为估测，即在放大200或400倍的显微镜下观察精子的运动性。一般来说，精子的运动力是评估精子活力的指标，而不代表其受精能力。公猪的精子运动力一般在80%，甚至更高。之前的研究表明，精子运动性≥60%时，若母猪的繁殖率下降，可排除精子的原因。

评价精子形态的方法有干片法和湿片法。干片法是利用染料使细胞轮廓变得更加明显，再置于显微镜的油镜下观察。湿片法是利用细胞本身进行对比，再借助显微镜或者CASA系统利用内部对比(相差干涉或者微分干涉对比)对固定的单层精子进行评估。正常情况下，异常精子的比例应低于20%～25%。

精子浓度和精子总量：常通过分光光度计测量精液的透明度或CASA计数精子数量来测量不含凝胶的精液中精子的浓度。未经处理的精液一般过于浓稠，仪器难以进行测量。所以会先用等渗液进行稀释，根据公猪精液的测量要求进行提前校正；使用CASA系统时则要提前将所有的精液参数输入系统。这两种方法都是通过血细胞计数的方法来进行测量的，但由于过程繁琐、耗时较长而未在临床普及。计算精子总数需要先测量精液的体积。一般多假设精液的密度为1 g/mL，通过精液的重量计算得出体积，再通过体积乘以浓度即可计算出精子总数。

其他繁殖力检查：精子在获得受精能力之前会经历一系列的生化、代谢和分子变化。目前有多种检查，包括：精子结合能力、精子低渗膨胀性、渗透压抗性、细胞膜/细胞器检查以及精子或精清的生化和分子检查。但这些检查在养猪业中的应用仍有待考察。

4精液的处理

精液稀释液：精液稀释液可以为精液的保存提供营养和代谢支持。葡萄糖是主要的供能物质；电解质参与调节渗透压；缓冲液可以中和代谢废物，维持pH；抗生素则用于减少细菌污染。储存时间越长，受精能力越低，而降低的速度主要取决于稀释液的成分。储存精液保持受精能力的时间长短受很多因素影响，包括种公猪本身、精液稀释液组成、精子浓度、储存温度。不管使用何种稀释液，都需要根据保质期内要求的精子浓度来决定稀释液的最大使用量。

精液稀释过程：大部分的精液稀释液已商品化，以粉末的形式销售。使用前需先用纯净水来溶解，配制后需要留足够的时间让稀释液平衡，稳定其pH和渗透压，之后才能用于稀释精液。平衡过程一般需要45～60 min。在稀释过程中，要使稀释液和精液之间的温差尽可能的小，这样有利于保护精子的活力。可以通过检测精液和稀释液的温度，调整稀释液的温度至精液温度的±2 ℃。用于人工授精的精液浓度为(25～65)×106/mL，体积为65～80 mL。稀释后的精液要冷却保存在15～18 ℃的环境中。目前，在养猪业中所有的精液均通过此途径用于人工授精，而冷冻精液由于繁殖率较低，很少用于临床。

参考文献5

[1]卢刚琼，陈吉红.猪人工授精中的种公猪调教及采精技术[J].云南畜牧兽医，2011(2)：12.

[2]赵德明，张仲秋，周向梅，等.猪病学(第10版)[M].北京：中国农业大学出版社，2014：348.

作者简介：袁克金(1981-)，男，本科，兽医师，主要从事动物防疫工作。

收稿日期：2015-02-12

中图分类号：S828.3

文献标识码：B

文章编号：1005-2739(2015)03-0027-02