类风湿性关节炎患者类风湿因子抗环瓜氨酸抗体抗角蛋白抗体联合检测的临床意义*

耿学丽， 张秀琴， 陈向华， 宗春光， 肖丽君， 宋鸿儒＊＊

(1.承德医学院附属医院检验科， 河北 承德 067000 2.承 德 医 学 院， 河北 承德 067000)

类风湿性关节炎患者类风湿因子抗环瓜氨酸抗体抗角蛋白抗体联合检测的临床意义*

耿学丽1， 张秀琴1， 陈向华1， 宗春光1， 肖丽君2， 宋鸿儒2＊＊

(1.承德医学院附属医院检验科， 河北 承德 067000 2.承 德 医 学 院， 河北 承德 067000)

目的:探讨类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、抗角蛋白抗体(AKA)联合检测对类风湿性关节炎(RA)的诊断价值，及IgG、IgA、IgM、C3、C4在类风湿性关节炎中的意义。方法:采用免疫散射比浊法检测RF、IgG、IgA、IgM、C3、C4，采用ELISA法检测抗CCP抗体，间接免疫荧光法检测AKA的水平，并对结果进行统计学分析。结果:RA患者组RF、抗CCP抗体、AKA、IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平均高于健康对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05);RF、抗CCP抗体、AKA在RA诊断中的敏感度为95%、83.3%、68.3%，特异度为81.2%、96.9%、100%;RF、抗CCP抗体、AKA联合检测串联实验的敏感性为58.3%，特异性为100%;RF、抗CCP抗体、AKA联合检测并联实验的敏感性为98.3%，特异性为78.1%。结论:以上指标对类风湿性关节炎的诊断具有参考价值;联合检测在一定程度上避免了抗CCP抗体跟AKA的敏感度低，以及RF的特异性低而造成的漏诊，为临床早期诊断断提供依据。

类风湿因子; 抗环瓜氨酸肽抗体; 抗角蛋白抗体; 类风湿性关节炎

类风湿性关节炎(RA)是一种以累及周围关节为主的自身免疫性疾病。目前，RA的诊断主要依靠临床症状、血清类风湿因子(RF)的检测及影像学的检查，但符合上述标准的患者已经错过了最好的治疗时机。类风湿因子是最早应用于RA诊断的自身抗体，但由于其特异性不高，在临床诊断中具有一定的局限性。有研究发现，抗CCP抗体，AKA对类风湿性关节炎的诊断具有较高的特异性，并在疾病的早期就可能出现［1］。我们对60例RA患者的RF、抗CCP抗体、抗角蛋白抗体、IgG、IgA、IgM、C3、C4进行了检测分析，探讨这些指标在RA诊断中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料:RA患者60例，均为2012年5月至2013年1月承德医学院附属医院门诊及住院患者，均符合美国风湿病学会(ACR)1987年修订的RA诊断标准［2］，并排除急性感染、肿瘤及其他自身免疫性疾病等。其中男13例，女47例，年龄22～87岁，平均年龄(56.22±12.903)岁。另设正常对照组32例，其中男9例，女23例，年龄31～66岁，平均年龄(52.53±7.903)岁，均为我院体检中心接受体检的健康成年人(排除感染、免疫等可能与RA相关的一些疾病人群。所有受试者于研究前3个月内均未服用过任何免疫抑制剂及激素。

1.2 标本收集:所有受试者均于晨起空腹抽取肘静脉血5mL，常温自然凝固1h后，4000r/min离心10min，分离血清，－20℃冰箱保存，用于测定RF、抗CCP抗体、AKA、IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平。

1.3 方法:以Bwckman公司生产的Array360特种蛋白分析仪检测RF、IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平，试剂由Bwckman公司提供，采用ELISA法检测抗CCP抗体，试剂由欧盟公司提供;采用间接免疫荧光法检测抗角蛋白抗体，试剂由欧盟公司提供，严格按照试剂说明书进行检测。

1.4 统计学处理:所有数据资料均采用SPSS17.0统计学软件包进行统计分析，计量资料比较采用wilcoxon秩和检验，计数资料组间比较采用χ2检验，P＜0.05具有统计学意义;联合检测同时采用串联联和并联的方法进行统计，RF＞20U/mL为阳性。

2 结果

2.1 RA患者组RF、抗CCP抗体、AKA、IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平高于健康对照组，且存在显著性差异，见表1。

表1 不同组别RF、抗CCP抗体、AKA、IgG、IgA、IgM、C3、C4测定结果比较

2.2 RF、抗CCP抗体、AKA的敏感性分别为90%、83.3%，68.3%，特异性分别为81.2%，96.9，100%;联合检测串联实验的敏感性为58.3%，特异性为100%;联合检测并联实验的敏感性为98.3%，特异性为78.1%，见表2。

表2 三种指标联合检测诊断RA的效能评价 (%)

3 讨 论

类风湿性关节炎是一种以关节炎症为主要临床表现的自身免疫性疾病，目前，临床上诊断RA还是以临床症状为主的综合型判断，至今仍缺乏敏感性好，特异性高的指标。RF是一种抗人或动物IgG分子Fc片段抗原决定簇的抗体，它被作为1987年ACR关于RA分类标准中唯一的血清学指标，但是早期阳性率比较低，特异度也不高［3］，临床实践中，常发现符合标准诊断［4］的患者大多已出现了不可逆转的关节损害。因此，为了更好地诊断和治疗类风湿性关节炎，我们需要跟其他指标联合检查。抗CCP抗体是近年来发现的对诊断RA具有特异性的抗体［5］，有研究发现，抗CCP抗体在RA患者发病早期即可阳性，而抗CCP抗体阳性的患者与抗CCP阴性患者相比更易发展为侵袭性的疾病［6］，抗角蛋白抗体又称抗丝集蛋白抗体，对类风湿性关节炎诊断的特异性高达95～99%。AKA可以再RA发病以前若干年出现，对早期诊断RA有重要的临床意义。本研究表明RA患者组RF、抗CCP抗体、AKA的水平均高于健康对照组，表明其在RA的诊断中具有一定的临床意义;RF、抗CCP抗体、AKA串联实验在RA诊断中的特异性为100%，并联实验在RA诊断中的敏感性为98.3%，从实验数据可以看出，联合检测这三种抗体比单独检测的敏感性和特异性均有显著提高，故联合检测有助于RA的早期诊断和病情预测。

IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和细胞外液的主要抗体，也是机体再次免疫应答的主要抗体。IgA是参与黏膜局部免疫的主要抗体，IgM是抗原刺激诱导的体液免疫中最早出现的抗体。本实验研究结果表明，RA患者血清中3种免疫球蛋白均高于正常对照组，表明体液免疫参与了RA的发病过程。补体在维持机体的免疫自稳及在类风湿性关节炎的发病过程中具有重要的作用，本研究表明，RA患者补体的水平均低于正常对照组，与相关的研究相吻合，这可能是类风湿性关节炎患者中补体消耗而导致的补体水平降低，对临床诊疗类风湿性关节炎具有一定的参考价值。

［1］刘冰，郝铁，陈霞，等.联合检测ANA、AKA、抗－CCP和RF在诊断类风湿性关节炎中的临床意义［J］.标记免疫分析与临床，2013，20(2):109～110.

［2］Arnett FC，Edworthy SM，Bloch DA，et al.The american rheumatism association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis［J］.Arthritis Heum，1988，31 (18):315～324.

［3］Shin Ys，Choi JH，et al.Rheumatoid factor is a marker of disease severity in Korean rheumatoid arthritis［J］.Yonsei Med，2005，(46):464～470.

［4］Song YW，Kang EH.Autoantibodis in rheumatoid arthritis rheumatoid factors and anticitrullinated protein antibodies［J］.QJM，2010，103(3):139～146.

［5］曾瑜，陈明，蔡美珠，等.抗环瓜氨酸肽抗体和类风湿因子联合检测对类风湿性关节炎的诊断价值［J］.中国临床医学，2006，13(6):1022.

［6］Alenius GM，Berglin E，Rantap，et al.Antibodies against cyclic citrullinated petide(CCP)in psoriatic patients with or without joint inflammation［J］.Ann Rheum Dis，2006，65 (3):398～400.

［7］马海芳，张文兰，胡同平.类风湿性关节炎患者免疫指标的检测分析［J］.检验医学与临床，2010，7(11):1116～1117.

Diagnostic Value of Combined Determination of anti－CCP AKA in Patients with Rheumatoid Arthritis

GENG Xueli， ZHANG Xiuqin， CHEN Xianghua， et al
(The Affiliated Hospital of Chengde Medical College，Hebei Chengde067000，China)

Objective:To evaluate the diagnostic value of combined determination of rheumatoid factor (RF)，anti－cyclic citrulline peptide(anti－CCP)antibody，and antikeratin antibody(AKA)in patients with rheumatoid arthritis(RA)，and significance of IgG，IgA，IgM，C3 and C4 in rheumatoid arthritis.Method:Scattering method adopts immune turbidimetry was used to detect the level of RF，IgG，IgA，IgM，C3，C4 and measured the levels of anti–CCP by ELISA and measured the levels of AKA indirect immunofluorescence method，and the results were analyzed statisticy.Result:The level of RF，anti－CCP antibody，AKA，IgG，IgA，IgM，C3 and C4 in the serum of RA patients was higher than the normal control group，and the difference was statistically significant(P＜0.05)，the diagnostic sensitivity of The RF，anti－CCP antibody，AKA were 95%，83.3%，68.3%respectively，The specificity were 81.2%，96.9%，100%;sensitivity of series experiments was 58.3%and the specificity was 100%with combined determination of RF，anti－CCP antibody，AKA，sensitivity of parallel experiment was 98.3%and the specificity was 78.1%with combined determination of RF，anti－CCP antibody，AKA.Conclusion:It has reference value to the diagnosis of rheumatoid arthritis.It＇s certain extent to avoid the low sensitivity of anti－CCP antibody and AKA with joint detection，and RF occur due to the specificity of diagnosis，It provids the basis for early diagnosis of RA.

Rheumatoid factor; Anti－cyclic citrulline peptide antibody; Antikeratin antibody; Rheumatoid arthritis

B

10.3969/j.issn.1006－6233.2015.05.010

1006－6233(2015)05－0736－04

河北省承德市科技支撑计划项目，(编号:20132059)

＊＊ 通讯作者