327株产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析*

游树林，汪文明，刘利航，张体永，杨 夕(重庆市南川区人民医院检验科 408400)



·临床研究·

327株产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析*

游树林，汪文明，刘利航，张体永，杨 夕△(重庆市南川区人民医院检验科 408400)

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性。方法 采用全自动微生物鉴定药敏分析仪对2013年1月至2014年7月临床送检的标本进行分离鉴定及药敏分析，耐药性诊断依据CLSI(2013年)标准进行判断。结果 609株大肠埃希菌检出产ESBLs菌株327株，检出率53.69%。产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西啉、头孢唑林耐药率达100.0%、头孢曲松为98.3%；对左氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、氨曲南及氨苄西林/舒巴坦耐药率较高，达62.4%～70.6%；对头孢替坦、呋喃妥因及阿米卡星的耐药率较低(0.9%～4.6%)；对哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南及亚胺培南的耐药率为0。产ESBLs大肠埃希菌对大多数抗菌药物的耐药率明显高于ESBLs阴性大肠埃希菌，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 产ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析，可指导临床合理应用抗菌药物。

ESBLs； 大肠埃希菌； 耐药性； 抗菌药物

大肠埃希菌(E.coli)为常见的条件致病菌，是医院感染的重要病原菌，也是革兰阴性杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的代表菌种[1]。随着抗菌药物的广泛应用，尤其是β-内酰胺酶类抗菌药物应用于临床，产ESBLs株不断增加。ESBLs大肠埃希菌往往同时对β-内酰胺类、β-内酰胺酶复方抑制剂、氨基糖苷类和喹诺酮类等药物耐药，呈现多重耐药性，其患病率和病死率较高，有效治疗的抗菌药物较少，给临床治疗带来困难[2-4]。本研究对产ESBLs的耐药性进行分析，以指导临床合理应用抗菌药物，防止耐药菌株产生，控制产ESBLs细菌的传播和流行，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 该院2013年1月至2014年7月门诊和住院患者送检的合格标本中分离出大肠埃希菌609株(排除同一患者相同部位重复分离菌株)，其中男328例，女281例，年龄0～87岁。

1.2 仪器与试剂 法国生物梅里埃VITEK2 Compact全自动微生物鉴定药敏分析仪及配套试剂。

1.3 方法 严格按《全国临床检验操作规程》[5]进行标本的质量控制、接种以及菌株的分离培养，采用法国生物梅里埃公司的VITEK2 Compact全自动微生物鉴定药敏分析仪进行菌株鉴定和药敏分析，耐药性诊断和检测结果均依据CLSI(2013年)标准进行判断。质控菌株：大肠埃希菌(ATCC 25922)由重庆市临床检验中心提供。

1.4 ESBLs的检测 头孢吡肟的最低抑菌浓度(MIC)值大于或等于32 μg/mL、头孢他啶或头孢噻肟的MIC值大于或等于4 μg/mL的菌株，进一步行头孢吡肟/克拉维酸、头孢他啶/克拉维酸及头孢噻肟/克拉维酸的MIC值检测。如果3种药物加上克拉维酸后的MIC值小于其本身MIC值的3倍，判为ESBLs阳性。

1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0软件进行统计学分析，耐药率比较使用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 产ESBLs菌株的检出率 609株E.coli中检出327株产ESBLs菌株，检出率53.69%。其中尿液标本检出产ESBLs 175株，占53.52%，其次是痰液、血液标本，分别为50、35株(15.29%、10.70%)。见表1。

表1 327株产ESBLs菌株标本类型构成情况

2.2 327株产ESBLs大肠埃希菌分布范围 呼吸内科、泌尿外科检出率较高，阳性率分别为69.23%、62.75%。见表2。

表2 327株产ESBLs菌株的科室分布及阳性率

续表2 327株产ESBLs菌株的科室分布及阳性率

2.3 产ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析 产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑林耐药率达100.0%，头孢曲松达98.3%；对左氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、氨曲南及氨苄西林/舒巴坦耐药率也较高，在62.4%～70.6%；对头孢替坦、呋喃妥因及阿米卡星的耐药率较低(0.9%～4.6%)；对哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南及亚胺培南的耐药率为0。ESBLs阴性菌除氨苄西林、复方新诺明耐药率(66.4%、47.1%)较高外，其余耐药率均小于36.0%。产ESBLs大肠埃希菌对大多数抗菌药物的耐药率明显高于ESBLs阴性大肠埃希菌，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 ESBLs阳性与ESBLs阴性大肠埃希菌的耐药率[n(%)]

注：“-”为无数据。

3 讨 论

产ESBLs大肠埃希菌是引起医院感染的常见致病菌之一。产ESBLs是丝氨酸蛋白酶的衍生物，存在于细菌中，是细菌染色体外的蛋白质，能水解抗菌药物中的β-内酰胺环而使抗菌药物失活，尤其是广谱的头孢菌素、青霉素及单环菌素等。其在细菌之间进行传播，易造成院内交叉感染，从而致使产ESBLs细菌在医院内感染的爆发流行。本研究结果表明，609株E.coli中检出327株产ESBLs菌株，阳性率53.69%，低于2011年度西南地区的71.2%[6]，这与本组采集样本逐渐规范，严格控制院内感染有关。同时又高于文献报道的35.40%、45.90%、47.90%[7-9]，说明该院产ESBLs菌株感染比较严重，应引起临床高度重视。327株产ESBLs菌株中，尿液、痰液标本检出率较高，分别为53.52%、15.29%，这与该院尿液、痰液标本送检密切相关，提示泌尿系统和呼吸系统为大肠埃希菌感染的高发部位，应加强感染控制。本研究显示ESBLs在呼吸内科、泌尿外科检出率较高，分别为69.23%、62.75%，这与呼吸内科、泌尿外科患者大多为老年患者，且伴慢性炎性、住院时间长和反复使用抗菌药物以及插管导尿侵入性操作等治疗有关，使得免疫力低下的患者更易感染大肠埃希菌。

ESBLs基因型有TEM、SHV、OXA及CTX-M型等，大多由广谱酶TEM-1/TEM-2及SHV-1的活性区经过1～4个关键氨基酸突变衍生而来，可水解青霉素类和第1、2代头孢菌素。随着第3代头孢菌素的临床应用，TEM-1和SHV-1酶加快了突变的速度，形成各种ESBLs，介导细菌对青霉素类和第1～3代头孢菌素及单环酰胺类耐药，CTX-M型酶能水解头孢噻肟、头孢曲松等，不同类型的ESBLs对第3代头孢菌素有不同的活性[10-11]。本研究结果显示产ESBLs大肠埃希菌对头孢曲松、头孢唑林耐药率高达98.0%以上，头孢他啶达37.0%，第4代头孢吡肟也出现一定程度耐药(27.6%)。本组结果表明，临床常用的头孢菌素类抗菌药物因ESBLs而产生了较为普遍的耐药性，其应根据药敏试验结果及时调整药物，并注意疗程、剂量、给药方式，不随意使用广谱抗菌药物[12]。

ESBLs由质粒介导，携带编码ESBLs株的质粒的菌株往往同时携带AmpC酶、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物等耐药基因，呈现多重耐药性[13-14]。本研究结果显示，产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑林、头孢曲松的耐药率高达98.0%以上；对左氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、氨曲南及氨苄西林/舒巴坦耐药率也较高(62.4%～70.6%)，说明产ESBLs菌株存在广泛、多重耐药现象。同时产ESBLs对头孢替坦、呋喃妥因及阿米卡星的耐药率较低(0.9%～4.6%)；对哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南及亚胺培南的耐药率为0。故该菌感染时，临床用药可考虑首选，但应根据药敏试验的结果用药。ESBLs阴性菌除氨苄西林、复方新诺明耐药率(66.4%、47.1%)较高外，其余均小于36.0%。本研究结果显示产ESBLs大肠埃希菌对大多数抗菌药物的耐药率明显高于ESBLs阴性大肠埃希菌，差异有统计学意义(P<0.05)。

综上所述，产ESBLs大肠埃希菌对多种抗菌药物耐药。临床应重视细菌耐药性的监测，严格按照药敏试验结果筛选抗菌药物，做到谨慎和合理使用抗菌药物，避免细菌产生耐药性。同时，应加强医护人员手卫生规范，特别注意洗手，避免工作人员传播引起患者交叉感染；其次，应增强消毒隔离意识，严格执行各种消毒隔离措施，避免大肠埃希菌耐药菌株的传播及暴发。

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重庆市卫计委科研项目(2013-2-240)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.11.038

A

1672-9455(2015)11-1589-03

2014-12-22

2015-02-20)

△通迅作者，E-mail：18983308699@189.cn。