基质金属蛋白酶-1、3启动子基因多态性与卵巢癌易感性的Meta分析

朱旭明，陈国千，孙伟峰

（南京医科大学附属无锡人民医院医学检验科，江苏无锡214023）

卵巢癌是指生长在卵巢上的恶性肿瘤，由于卵巢癌早期缺少症状，即使有症状也不特异，筛查的作用又有限，因此早期诊断比较困难。就诊时60%～70%已为晚期，而晚期病例又疗效不佳，5年生存率只有25%[1]。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）是降解细胞外基质成分的一类重要水解酶。MMP与肿瘤发生、发展有关，能参与调节细胞增殖、凋亡、血管生成、免疫监视[2]。目前MMP家族已分离鉴别出26个成员，编号分别为MMP1～26。当MMP-1启动子区域-1 607bp位点缺失1个鸟嘌呤核苷酸（G）或插入1个G，会出现3种基因型：1G／1G、1G／2G和2G／2G。当MMP-3启动子1 171bp位点重复出现5个腺嘌呤核苷酸（A）或6个A，会出现5A／5A、5A／6A和6A／6A3种基因型。关于MMP-1-1 607 bp 1G／2G、MMP-3-1 171bp 5A／6A多态性和卵巢癌易感性的关系已有一些报道，但缺乏研究结果的一致性。本文应用Meta分析研究两者的关系。

1 资料与方法

1.1 文献检索 以“polymorphism，matrix metalloproteinase，ovarian cancer”等作为主题词并列搜索Pubmed、Cochrane、EMbase等外文数据库，以“多态性、基质金属蛋白酶、卵巢癌”等为关键词并列搜索中国知网（CNKI）、万方等中文数据库。系统检索发表时间为1994年1月至2013年5月的文献，末次检索时间为2013年6月10日。

1.2 纳入标准 （1）原始文献类型为设计良好的病例对照研究；（2）必须有卵巢癌组和对照组；（3）基因研究对象为位于启动子区域的MMP-1-1 607bp 1G／2G或MMP-3-1 171bp 5A／6A；（4）检测多态性位点的分子生物学方法科学严谨；（5）各文献必须直接或间接提供不同基因型分布资料；（6）文献内容用中文或英文表达。相同研究重复发表的仅纳入最近文献。

1.3 文献质量评价 对各独立研究从以下5个方面进行质量评估：（1）实验设计是否科学；（2）卵巢癌组及对照组人员的纳入标准及其基本构成特征是否明确；（3）分子生物学方法是否可信合理；（4）统计方法是否恰当准确；（5）文献类型是否为论著。以上5项，满足1项为1分，总分大于或等于3分者为质量合格[3]。

1.4 资料提取 采用统一的资料提取表，资料包括：第一作者姓名，文献发表年份，研究对象国籍、肤色、基因多态性、卵巢癌类型，病例组和对照组样本量、基因型数量及等位基因频率。

1.5 统计学处理 用RevMan5.0对MMP-1的基因型1G／1G∶1G／2G＋2G／2G、1G／1G∶2G／2G以及等位基因1G∶2G 3种基因模型，MMP-3的5A／5A＋5A／6A∶6A／6A、5A／5A∶6A／6A、5A∶6A模型进行统计分析。先进行异质性检验，P＞0.10且I2＜50%，为无异质性，采用固定效应模型；P≤0.10且I2＞50%，存在异质性，采用随机效应模型。基因多态性与易感性的关系用比值比（OR）及95%可信区间（CI）表示，并绘制森林图，整合结果以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 文献纳入情况 按照PRISMA标准流程[4]，本研究按检索策略和纳入标准共检索到相关文献8篇[5-12]，因重复发表剔除2篇[7，10]，最终共纳入包含在6篇文献中的8项研究，其中涉及MMP-1有5项，MMP-3有3项。纳入MMP-1卵巢癌组的人群754例，对照组1 184例；纳入MMP-3卵巢癌组的人群265例，对照组425例。

表1 MMP-1--1 607bp 1G／2G基因型及等位基因分布情况（n）

表2 MMP-1不同对照模型Meta分析结果

图1 按肤色分类MMP-1-1 607bp 1G／2G基因多态性与卵巢癌关系的森林图（1G／1G∶2G／2G）

表3 MMP-3-1 171bp 5A／6A基因型及等位基因分布情况

2.2 Meta分析结果

2.2.1 MMP-1 MMP-1-1 607bp 1G／2G基因多态性各研究基因型分布见表1。除总体人群外，还对不同肤色人群（黄种人及其他人种）进行分层分析，同时还对癌症种类为上皮性卵巢癌进行分析，结果见表2。1G／1G∶2G／2G对照模型在按肤色分层时森林图见图1。对于总体人群，1G／1G∶1G／2G＋2G／2G模型下OR为0.95（95%CI＝0.74～1.21，P＝0.67），1G／1G∶2G／2G模型下OR为0.93（95%CI＝0.70～1.23，P＝0.60），1G∶2G模型下OR为0.99（95%CI＝0.87～1.14，P＝0.91），差异无统计学意义。按肤色进行亚组分析及对癌症种类为上皮性卵巢癌的人群进行分析后，也不能认为差异有统计学意义。因此尚不能证实MMP-1-1 607bp 1G／2G基因多态性与卵巢癌发病风险关联。

2.2.2 MMP-3 MMP-3-1 171bp 5A／6A基因多态性各研究基因型分布见表3。5A／5A＋5A／6A∶6A／6A模型OR为0.97[（95%CI＝0.68～1.38，P1（P2）＝0.85（0.12）]，5A／5A∶6A／6A模型OR为1.25[95%CI＝0.70～2.24，P1（P2）＝0.46（0.98）]，5A∶6A模型OR为1.01[95%CI＝0.79～1.31，P1（P2）＝0.91（0.49）]，差异无统计学意义，也不能证实MMP-3-5A／6A多态性与卵巢癌发生有关。

3 讨论

MMP-1又称胶原酶-1，能降解胶原纤维，由各种基质细胞、内皮细胞、上皮细胞产生，通过改变细胞的微环境影响肿瘤初始阶段，有利于肿瘤形成，并且与肿瘤侵袭转移有关。正常情况下大多数细胞产生微量MMP-1，但肿瘤时呈现高表达。在MMP-1启动子-1 607bp位点5′-GA-3′基础上插入1个额外的鸟嘌呤核苷酸会出现5′-GGA-3′，这个新序列是Ets转录因子结合位点的核心序列[13]，意味MMP-1转录水平增高，癌症风险加大。Liu等[14]发现基因型2G／2G的中国人肺癌发病风险是1G／1G的1.71倍。Zhou等[15]发现美国乳腺癌患者等位基因2G的存在与MMP-1的表达及预后紧密相关。

虽然本文尚不能证实MMP-1-1 607bp 1G／2G多态性与卵巢癌易感性有关，但也不能肯定两者不存在关系，因为本文还存在局限性：（1）语言上的限制，减少了研究人群的纳入；（2）未考虑影响因素，包括年龄、疾病严重程度等。另外，国内外对于MMP家族基因多态性与卵巢癌易感性关系的研究开展并不多，相关文献较少。本文发现，MMP-1-1 607bp 2G等位基因在黄种人群频率40%～50%，在其他人种达60%～70%，不同种族2G等位基因频率存在差异，提示增加种族来源进行精确分组是今后研究的切入点。

MMP-3又称基质溶解素1，作用于细胞外基质和基底膜中的Ⅳ型胶原，并可激活MMP-1前体成为MMP-1，在肿瘤浸润、转移起重要作用。MMP-3转录活性可能也和Ets转录因子有关，启动子区域腺嘌呤的重复和Ets转录因子结合能力的变化有关。肿瘤患者5A等位基因的频率高于正常人群，比如Srivastava等[16]发现北方印度人5A／5A基因型患膀胱癌风险增加。但和MMP-1一样，本文也不能证实MMP-3-1 171bp 5A／6A基因多态性和卵巢癌有关，需增加种族数量加以证实。

除此之外，研究MMP基因家族单倍体与卵巢癌易感性关系，也是将来重点关注领域。

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