ERα和ERβ在非小细胞性肺癌组织中的表达及与其临床病理的相关性研究

徐晓鸿 陈家斌 夏银稳

ERα和ERβ在非小细胞性肺癌组织中的表达及与其临床病理的相关性研究

徐晓鸿 陈家斌 夏银稳

目的探讨雌激素受体(ER)α和β在非小细胞性肺癌组织中的表达及与其临床病理的相关性。方法选取经组织病理学检查确诊的非小细胞肺癌220例患者作为研究对象。采用免疫组化方法检测ERα和ERβ表达水平。结果两种雌激素受体表达于细胞核内，其中ERα阳性表达率为4．09%，ERβ阳性表达率为86．36%;ERα阳性表达与临床分期、病理分化程度有关:Ⅰ期患者ERα阳性表达率高于分期晚的患者(9．38%＞0．00%，χ2=12．121，P＜0．01);高分化患者ERα阳性表达率高于中低分化患者(14．29%＞3．00%＞0．00%，χ2=14．756，P＜0．01)。ERβ阳性表达与患者临床分期、分化程度及病理类型有关:Ⅰ期患者ERα阳性表达率最低(78．12%，χ2=10．732，P=0．01)，腺癌及高分化非小细胞性肺癌患者ERβ具有更高表达率(70．7%，χ2=7．749，P=0．02;83．3%，χ2=12．738，P＜0．01)。结论ERα和ERβ在非小细胞肺癌患者中表达情况与其临床病理特点具有相关性，提示雌激素受体表达可能在非小细胞肺癌的发生、发展中起重要作用。

非小细胞肺癌;雌激素受体β;雌激素受体α

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:1119～1122)

非小细胞性肺癌是1种常见的肿瘤之一，其发病率及死亡率均较高，近几年来随着新一代药物如酪氨酸激酶抑制剂等靶向药物的出现，使患者生活质量得到提高，患者生存进一步延长，但患者5年生存率仍较低，故寻找新的靶点成为治疗非小细胞性肺癌的主要研究目标。越来越多国外研究发现［1］，雌激素受体在非小细胞性肺癌发生发展的过程中起到重要作用，且可能与表皮生长因子存在相互串扰的作用，故雌激素有可能成为非小细胞性肺癌治疗、诊断及预后的新靶点，本研究拟通过我院220例非小细胞性肺癌患者的临床病理资料，探究雌激素受体(ER)α和β在非小细

胞性肺癌组织中的表达及其与临床病理的相关性。

1 资料与方法

1．1 临床资料

选取2010年5月-2013年6月期间经组织病理学检查确诊的非小细胞肺癌患者，共220例，其中男性145例，女性75例;年龄35～80岁，平均年龄(52．6± 12．5)岁，按照非小细胞性肺癌临床TNM分期标准对肿瘤进行分期:Ⅰ期96例、Ⅱ期24例、Ⅲ期63例、Ⅳ期37例。其中腺癌150例、鳞癌55例、大细胞肺癌6例、腺鳞癌5例、不典型类癌4例。

1．2 研究方法

1．2．1 试剂与设备一抗兔抗人雌激素受体β多克隆抗体源于中杉金桥公司;一抗兔抗人雌激素受体α单克隆体抗体源于中国福州迈新试剂公司;Max Vision试剂盒源于中国福州迈新生物技术开发有限公司。

1．2．2 检查方法将患者病理组织石蜡切片脱蜡进水，浸入乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的修复液，于高档微波12 min使抗原热修复。为阻断内源性过氧化物酶活性，于室温滴加100 μL过氧化氢，孵育10 min。滴加100 μL一抗，于室温孵育90 min。滴加100 μL二抗，孵育20 min。滴加新鲜配制的100 μL的DAB溶液，于显微镜下观察显色［2］。采用PBS代替一抗作为阴性对照，阳性对照采用明确表达人雌激素受体α及β的一例乳腺癌患者标本。

1．3 评价指标

病理组织切片由两位病理科医师单独进行阅片;阳性信号为胞核或胞质内出现棕黄色的颗粒［3］;阳性肿瘤细胞百分比评分方法:阳性肿瘤细胞数在68%～ 100%为3分、34%～67%为2分、1%～33%为1分;染色强度评分方法:未着色0分、浅棕黄色1分、中度着色2分、深棕黄色3分;综合评分上述两项得分相加:0分为(-)、1～2分为(+)、3～5分为(++)，6分为(+++);低表达强度为(-)或(+)，高表达强度为(++)或(+++)。

1．4 统计学方法

应用SPSS 13．0软件进行数据分析，性别、吸烟与否、各临床分期、组织类型、分化程度雌激素受体表达差异等计数资料行卡方检验。

2 结果

2．1 雌激素受体α和β的表达结果

雌激素受体α和β均表达于非小细胞肺癌组织细胞胞核，雌激素受体α表达强度弱，9例患者表达(+)，阳性率为4．09%;雌激素受体β受体表达强度强，表达阳性患者190例，总体阳性率为86．36%，见表1、2。

2．2 雌激素受体α(ERα)表达与其临床病理特点的关系

男性与女性患者ERα表达差异无统计学意义(χ2=1．924，P=2．477);吸烟与不吸烟患者ERα表达差异无统计学意义(χ2=0．17，P=0．12);各临床分期患者ERα表达差异有统计学意义(χ2=12．121，P＜0．01);不同组织学类型者ERα表达差异无统计学意义(χ2=0．954，P=0．38);不同组织分化程度者ERα表达差异有统计学意义(χ2=14．756，P＜0．01)，见表1。

表1 ERα表达与其临床病理特点的关系/例

2．3 雌激素受体β(ERβ)表达与患者临床病理特点的关系

男性与女性患者ERβ表达差异无统计学意义(χ2=0．103，P=0．75);吸烟与不吸烟患者ERβ表达差异无统计学意义(χ2=1．063，P=0．30);各临床分期患者ERβ表达差异具有统计学意义(χ2=10．732，P= 0．01);不同组织学类型患者ERβ表达差异无统计学意义(χ2=5．409，P=0．06);不同组织分化程度者ERβ表达差异无统计学意义(χ2=3．804，P=0．15)，见表2。

表2 ERβ表达与患者临床病理特点的关系/例

2．4 雌激素受体β(ERβ)表达强度与肿瘤病理类型及分化程度的关系

与鳞癌及其他组织学类型比较，腺癌患者ERβ高表达比率更高，差异具有统计学意义(χ2=7．749，P= 0．02);与中、低分化程度患者比较，高分化程度患者ERβ高表达比率更高，差异具有统计学意义(χ2= 12．738，P＜0．01)，见表3。

表3 ERβ表达强度与肿瘤病理类型及分化程度的关系(例，%)

3 讨论

3．1 雌激素受体结构及功能

雌激素受体不仅存在与子宫、乳腺等雌激素的靶组织，在非雌激素靶器官的组织如肺组织中也广泛存在，雌激素受体有两个亚型，即ERα和ERβ，ERα的基因位于染色体的6q24区段，ERβ的基因位于染色体的14q22～24区段［4］，2种受体都是依赖性类胆固醇激素核受体家族配体反式转录调节蛋白，可根据氨基酸序列分为6个区(A～F)，包含3个主要的功能域:C末端区、DNA结合区及N末端区，C末端区是配体结合域及依赖配体转录调节功能域，N末端区为不依赖配体转录的调节功能域，两者之间为DNA结合域［5］。位于肺组织的雌激素受体可影响信号转导、细胞周期调控及细胞生存［6］。

3．2 ERα表达与患者临床病理特点、病理分型及分化程度的关系

本研究发现ERα于细胞核内表达，阳性表达率为4．09%，而ERα在细胞核、细胞质阳性表达于国内外文献均有报道［7-8］，我们推测表达的差异可能与各实验室技术条件不同及使用的抗体不同有关［9］;本研究发现ERα阳性表达与患者临床疾病分期、病理分化程度有关:Ⅰ期患者阳性表达率高于分期晚的患者，高分化的患者阳性表达率高于中低分化患者，我们推测这可能与ERα随着非小细胞性肺癌发生发展而发生变化有关［10］:在非小细胞性肺癌由高分化向低分化或早期向中晚期发展过程中，基因结构发生缺失变异使完整结构的雌激素受体α演变成非完整结构剪切的变异体，我们研究所采用的抗体为识别ERα的C末端区，低分化及相对分期较晚患者的ERα的C末端区发生缺失变异，故检测不到ERα的表达，故下次研究可以选择识别ERα不同位点抗体进行免疫组化，证实我们的推测。

3．3 ERβ表达与患者临床病理特点、病理分型及分化程度的关系

本研究发现ERβ于细胞核内表达，阳性表达率为86．36%，其表达与患者性别、吸烟状况无相关性，与病理特点有相关性:腺癌及高分化的非小细胞性肺癌患者ERβ具有高表达率更高。通过对比发现ERβ与ERα在疾病分期阳性表达率相反，Ⅰ期患者的ERβ阳性表达率低，疾病分期较晚阳性表达率更高，笔者推测这与雌激素在非小细胞性肺癌转移扩散起作用有关:通过刺激尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator，UPA)产生，促进纤维蛋白溶酶的形成，降解细胞外的基质，从而使癌细胞向周围组织的扩散和转移［11］。

总体来说，ERα和ERβ在非小细胞肺癌患者的表达情况与患者的病理及临床特点具有相关性，提示雌激素受体表达可能在非小细胞肺癌发生、发展的过程中起到重要作用，有可能成为治疗非小细胞性细胞癌新靶点，为探索新治疗提供进一步线索及依据。

［1］Brueckl WM，Al-Batran SE，Ficker JH，et al．Prognostic and predictive value of estrogen receptor 1 expression in completely resected non-small cell lung cancer〔J〕．Int J Cancer，2013，133(8):1825-1831．

［2］李琳，王晖，杜俊，等．雌激素受体α和β及表皮生长因子受体的表达与非小细胞肺癌临床病理特点关系〔J〕．现代肿瘤医学，2013，21(3):539-543．

［3］Chang HL，Cheng YJ，Su CK，et al．Association of estrogen receptor α gene pvull and XbaI polymorphisms with nonsmall cell lung cancer〔J〕．Oncol Lett，2012，12(2):462-468．

［4］杨琴，甘亚平，张明，等．雌激素受体α、β在非小细胞肺癌患者中的表达及其临床意义〔J〕．肿瘤学杂志，2013，19(3):206-209．

［5］Atmaca A，Al-Batran S，Wirtz RM，et al．The validation of estrogen receptor 1 mRNA expression as a predictor of outcome in patients with metastatic non-small cell lung cancer〔J〕．Int J Cancer，2014，134(10):2314-2321．

［6］Olivo-Marston SE，Mechanic LE，Mollerup S，et al．Serum estrogen and tumor-positive estrogen receptor-alpha are strong prognostic classifiers of non-small-cell lung cancer survival in both men and women〔J〕．Carcinogenesis，2010，12(10):1778-1786．

［7］杨欣，薛丽燕，刘宇，等．肺癌组织中雌激素受体α和雌激素受体β的表达及临床意义〔J〕．中华肿瘤杂志，2013，35(9):678-683．

［8］Jala VR，Radde BN，HarⅠBabu B，et al．Enhanced expression ofG-proteincoupledestrogenreceptor(GPER/ GPR30)in lung cancer〔J〕．BMC Cancer，2012，12(2): 42-45．

［9］Kazmi N，Márquez-Garbán DC，Aivazyan L，et al．The role of estrogen，progesterone and aromatase in human nonsmall-cell lung cancer〔J〕．Lung Cancer Manag，2012，1 (4):259-272．

［10］王治乾，金波．雌激素受体和孕激素受体在非小细胞肺癌中的表达及研究进展〔J〕．癌症进展，2013，11(4): 323-327．

［11］Mah V，Marquez D，Alavi M，et al．Expression levels of estrogen receptor beta in conjunction with aromatase predict survival in non-small cell lung cancer〔J〕．Lung Cancer，2011，5(2):318-325．

Correlation between ERα and ERβ Expression and Clinicopathological Characteristics in Non-small Cell Lung Cancer

XU Xiaohong，CHEN Jiabin，XIA Yinwen．The People＇s Hospital of Hanchuan，Hanchuan，431600

ObjectiveTo explore the correlation between estrogen receptor α(ERα)and estrogen receptor β(ER β)expression and clinicopathological characteristics in non-small cell lung cancer．Methods220 cases who were confirmed by histopathology to be non-small cell lung cancer were selected as study objects．The expressions of ER α and ER β were detected by immunohistochemistry．ResultsBoth ER α and ER β were expressed in nucleus．The positive expression rate of ER α and ER β were 4．09%and 86．36%，respectively．There was correlation between ER α expression and tumor stage，pathology differential degree．ER α expression in stageⅠ(9．38%)was higher than that in later stage(0．00%)(χ2=12．121，P＜0．01)，and ER α expression in in patients with high pathological degree(14．29%)was higher than that in middle and low pathological degree (3．00%，0．00%)(χ2=14．756，P＜0．01)．Positive expression of ERβ was associated with tumor stage，histology type and pathology differential degree．Positive expression of ER β was lowest in stageⅠpatients(78．12%，χ2=10．732，P=0．01)，ER β expression was much stronger in adenocarcinoma(70．7%，χ2=7．749，P=0．02)and high pathological degree patients(83．3%，χ2=12．738，P＜0．01)．ConclusionER α and ER β expression are correlated with clinicopathological characteristics in nonsmall cell lung cancer．It indicates that expressions of ER α and ER β may play an important role in the occurrence and development of non-small cell lung cancer．

Non-small cell lung cancer;Estrogen receptor β(ER β);Estrogen receptor α(ER α)

10．3969/j．issn．1001-5930．2015．08．004

R734．2

A

1001-5930(2015)08-1119-04

2014-10-27

2015-03-16)

(编辑:吴小红)

431600汉川市人民医院，武汉大学人民医院汉川医院