云南省部分地区稻瘟病菌对三环唑的敏感性研究

番华彩， 白亭亭， 杨佩文， 郭志祥， 曾 莉

(云南省农业科学院农业环境资源研究所，云南昆明 650205)



云南省部分地区稻瘟病菌对三环唑的敏感性研究

番华彩， 白亭亭， 杨佩文， 郭志祥， 曾 莉*

(云南省农业科学院农业环境资源研究所，云南昆明 650205)

[目的]了解云南省部分稻区稻瘟病菌对三环唑的敏感性，为三环唑的科学使用及抗药性监测提供理论依据。[方法]采用菌丝生长速率法测定了云南省部分稻区的稻瘟病菌对三环唑的敏感性。[结果]供试稻瘟病菌对三环唑的抑制中浓度(EC50值)在41.284 9～72.722 4 mg/L，不同地区菌株敏感性存在差异，其中最敏感的是大理地区菌株，其EC50平均值为49.004 3 mg/L，最不敏感的是宜良地区菌株，其EC50平均值为65.000 4 mg/L，二者相差1.33倍。[结论]大多数菌株对三环唑表现敏感，但也出现低水平抗药性的群体，采用三环唑防治稻瘟病具有一定的风险性。

稻瘟病菌；三环唑；敏感性

稻瘟病(M.grisea)是我国水稻的三大主要病害之一。20世纪90年代以来，我国稻瘟病的年发生面积均在380万hm2以上，年损失稻谷达数亿千克[1-2]。在云南省，稻瘟病主要发生在优质稻区和高海拔水稻种植区以及山区，常年发生面积23万hm2左右，约占水稻种植面积的24%。每年因稻瘟病发生而造成的水稻产量损失在10万t以上。近年来，稻瘟病在云南各水稻产区均呈现出中等偏重发生趋势，严重制约了水稻产量的增加和品质的提高[3-4]。稻瘟病的防治措施主要包括抗病育种、药剂防治和栽培管理。其中抗病品种多是基于“基因对基因”学说的垂直抗性品种, 抗病性易丧失。化学防治具有经济、高效、方便、迅速等优点，一直是稻瘟病综合治理体系中不可缺少的部分，在病害大流行或品种抗病性丧失期间更是最主要的、不可替代的防治手段[5]。

目前，用于防治稻瘟病的化学药剂主要有三环唑、富士一号、稻瘟净、异稻瘟净、克瘟散、嘧菌酯、苯氧菌酯和烯丙异噻唑等。三环唑是一类黑色素合成抑制剂，属间接作用化合物。该药剂由于对病原菌没有直接的杀菌或抑菌作用，其独特的作用机制使得化合物具有高效、低毒和低抗药性风险的特点，是未来杀菌剂发展的重要方向之一。在我国，三环唑是目前防治稻瘟病的主要药剂，其内吸性强，能迅速被水稻各部位吸收，持效期长，药效稳定，用量低并且抗雨水冲刷[5-7]，可用于浸根或叶面喷雾处理。笔者用毒力测定方法测定了云南省部分地区稻瘟病菌对三环唑的敏感性，旨在为三环唑的科学使用及抗药性监测提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1供试菌株。供试稻瘟病菌菌株分别采自云南省宜良县、红河州、保山市、大理市和江川县(表1)。

1.1.2供试药剂。75%三环唑可湿性粉剂由四川省化学工业研究设计院生产。

表1 试验菌株编号和采集地点

1.2 方法

1.2.1含药培养基的制备。在无菌条件下，将三环唑配制成一定浓度的稀释液，按一定比例加入到灭菌培养基中，配制成药剂浓度分别为60、70、80、90、100、110、120 mg/L的含药培养基，将含药培养基混合均匀后倒入直径为9 cm的培养皿中，制成不同浓度的含药平板，备用。

1.2.2敏感性测定。采用生长速率法。在PDA平板培养基中培养各菌株7 d后，用灭菌的打孔器从各菌株菌落边缘打取直径为5 mm的菌丝块，用接菌针取菌苔，菌面向下，分别接种到含不同浓度三环唑的PDA培养基平板上, 每处理3次重复，以加入无菌水的培养基平板为对照。28 ℃下恒温培养，7 d后用十字交叉法测量各处理的菌落直径，计算药剂对菌丝生长的抑制百分率。通过各处理浓度的对数(X) 和菌丝生长抑制率的几率值(Y) 进行回归分析，计算出三环唑对各参试菌株的抑制中浓度EC50。

菌丝生长抑制率=[1-(药剂处理菌落直径-5 mm)/(对照处理菌落直径-5 mm)]×100%

2 结果与分析

2.1 三环唑对稻瘟病菌毒力测定结果由表2可知，三环唑对稻瘟菌菌丝生长有一定的抑制作用，随药剂浓度升高，菌丝生长抑制率依次增加。当药剂浓度为60 mg/L时，云南保山菌株的平均菌丝抑制率达45.51%；云南昆明宜良菌株的平均菌丝抑制率达43.24%；云南玉溪江川菌株的平均菌丝抑制率达51.60%；云南大理菌株的平均菌丝抑制率达54.07%；云南红河菌株的平均菌丝抑制率达50.95%；供试菌株的平均菌丝抑制率达49.36%。当药剂浓度为120 mg/L时，云南保山菌株的平均菌丝抑制率达84.81%；云南昆明宜良菌株的平均菌丝抑制率达77.89%；云南玉溪江川菌株的平均菌丝抑制率达78.84%；云南大理菌株的平均菌丝抑制率达79.48%；云南红河菌株的平均菌丝抑制率达79.97%；供试菌株的平均菌丝抑制率达80.20%。

表2 不同浓度三环唑对稻瘟病菌菌丝抑制率 %

2.2 不同地区稻瘟病菌对三环唑敏感性检测结果由表3可知，不同菌株对三环唑敏感性不同。最敏感菌株是08HH-3菌株，最不敏感的菌株是08BS-5菌株，其EC50分别为37.920 3、68.895 5 mg/L，相差1.33 倍。供试菌株中，采自保山的平均EC50值为63.248 1 mg/L，宜良的平均EC50值为65.000 4 mg/L，江川的平均EC50值为54.732 0 mg/L，大理的平均EC50值为49.004 3 mg/L，红河的平均EC50值为53.808 1 mg/L。

表3 云南省不同地区稻瘟病菌对三环唑的敏感性

3 结论与讨论

该研究结果表明，来自云南不同地区的稻瘟病菌菌株对三环唑的敏感性存在一定差异。最敏感的是大理地区菌株，其EC50值为49.004 3 mg/L，最不敏感的是宜良地区菌株，其EC50值为65.000 4 mg/L，相差1.33倍，相差倍数不大。其原因可能是由菌株个体差异引起的或者由于抗药性问题所致，还需进一步研究。

黄星等[8-10]研究报道，广西、广东、安徽、江苏和辽宁等稻区的稻瘟病菌对三环唑仍属于低抗药性风险，关于云南稻瘟病菌是否对三环唑产生了抗药性，需进一步研究。三环唑与其他防治稻瘟病药剂的作用机理不同，稻瘟净和异稻瘟净属于单作用位点杀菌剂，易产生抗药性，而三环唑则属于双位点作用杀菌剂，主要作用于合成黑色素生物途径中的三羟基奈酚还原酶和四羟基奈酚还原酶，不易产生抗药性，属于低抗性风险类农药[11]。该药剂除了具有抗侵入的作用机制外，还具有诱导抗病反应、抑制孢子黏液分泌等多种作用。

[1] 陈利锋,徐敬友.农业植物病理学[M].北京:中国农业出版社,2005.

[2] 周光召.面向21世纪的科技进步与社会经济发展[M].北京:中国科技出版社,1999.

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[4] 吕建平. 2005年云南省病虫害发生趋势预报[J].山东农药信息,2005(7): 31.

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[11] 杨荣明,周明国,叶钟音.三环唑防治稻瘟病的作用机制[J].南京农业大学学报,1998,21(2): 34-37.

Sensitivity Detection ofMagnaporthegriseafrom Parts of Yunnan Province to Tricyclazole

FAN Hua-cai, BAI Ting-ting, YANG Pei-wen, ZENG Li*et al

(Institute of Agriculture Environment and Resource, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming, Yunnan 650205)

[Objective] The sensitivity ofM.griseafrom parts of Yunnan Province to Tricyclazole was understood to provide theoretical basis for use and resistance monitoring of Tricyclazole. [Method] The sensitivity of rice blast fungi isolates to Tricyclazole in parts of Yunnan Province was measured by mycelium growth rate method. [Result] TheEC50of strains was dispersive from 41.284 9 mg/L to 72.722 4 mg/L. The sensitivity of different strains to Tricyclazole had difference. The most sensitive strains was Dali strains, and the average ofEC50was 49.004 3 mg/L. The least sensitive strains were Yiliang strains, and the average ofEC50was 65.000 4 mg/L. The sensitivity difference between them was 1.33 times. [Conclusion] Most of the strains were still higher sensitivity. Some low-level resistance sub-groups were appeared. Using Tricyclazole to control rice blast had some risks.

M.grisea; Tricyclezole; Sensitivity

国家香蕉产业技术体系专项(CARS-32)；云南省农业科学院农业环境资源研究所所长青年基金项目(hz2012001)；云南省自然科学基金项目(2011FB119)。

番华彩(1980- )，女，云南德宏人，助理研究员，硕士，从事植物病理学、香蕉病害等研究。*通讯作者，研究员，硕士，从事植物病理学、香蕉病虫害及综合防控技术等研究。

2014-11-26

S 435.111.4+1

A

0517-6611(2015)02-142-02