紫外分光光度法测定别嘌醇片含量的不确定度评定

陈承贵，梁爱仙，刘 敏，杨 敏，郑党儿，李玉兰*

(1.深圳市药品检验所，深圳 518057； 2. 广州铁路集团公司中心计量所，广州 510080)



药品质量与检验

紫外分光光度法测定别嘌醇片含量的不确定度评定

陈承贵1，梁爱仙1，刘 敏1，杨 敏1，郑党儿2，李玉兰1*

(1.深圳市药品检验所，深圳 518057； 2. 广州铁路集团公司中心计量所，广州 510080)

目的：建立紫外分光光度法测定别嘌醇片含量的不确定度评定方法。方法：采用紫外分光光度法测定别嘌醇片的含量，建立测量模型，从吸光度、体积、称量等来源中确定影响不确定度的分量，并加以评定量化，得出合成不确定度和扩展不确定度。结果：别嘌醇片标示含量为100.4%，扩展不确定度为1.4%(k=2)。结论：本实验测定别嘌醇片含量的结果是可靠且可控的。

别嘌醇片，不确定度，紫外分光光度法，评定

测量的目的是为了确定被测量的量值，但是测量误差的存在，使测量结果的可信度难以判定。不确定度评定正是判定测量结果可信度的依据。别嘌醇片属于抗痛风药，《中国药典》2010年版二部采用紫外分光光度法测定含量，该方法操作简便，结果准确，但实际测量过程中存在的问题仍需探讨。本实验依据相关资料与文献[1-5]，评估影响不确定度的因素及其各个不确定度分量对测定结果的影响大小，建立适用于紫外分光光度法测定别嘌醇片含量的不确定度评定方法。

1 仪器与试药

梅特勒-托利多XS205DU电子分析天平，规格：81 g/220 g，分度值d=0.000 1 g；检定分度值e=0.001 g；单标线量瓶100 ml，容量允差±0.10 ml(A级)；单标线量瓶500 ml，容量允差±0.25 ml(A级)；单标线吸量管5 ml，容量允差±0.015 ml(A级)；岛津Shimadzu UV2600紫外分光光度计，比色皿：1 cm ，透光率的最大允差为±0.3%；氢氧化钠、盐酸均为分析纯，水为超纯水；别嘌醇片(规格：0.1 g，批号20130902，广东彼迪药业有限公司)。

2 方法

3 测量模型及不确定来源分析

(1)

第2部分计算标示含量，为供试品含量与标示量的比值，按公式(2)计算：

(2)

式中：W为供试品的含量，%；

A为供试品溶液测得的吸光度值，无量纲；

c为供试品溶液的百分浓度，即100 ml中所含溶质的克数，g/100 ml；

l为吸收池的光路长度(cm)，等于1 cm；

V1为供试品初定容体积，ml；

V2为量取续滤液体积， ml；

V3为供试品终定容体积，ml；

M为供试品取样重量，g；

B样品为标示百分含量，以两份平行样的测量平均值计算，%；

Z标示为标示量，g，等于0.1 g；

实际上B样品的结果是由表1中两份平行试样的测定数据得出的，重复性标准不确定度不可忽略。在式(2)中还应加入重复性修正量R，其值视为零，不确定

度非零。加入后式(2)变为式(3)：

B样品=B样品+R

(3)

式中：B样品为考虑重复性修正量R后，别嘌醇片的实际标示含量，%；

R为重复性修正量R，其值视为零，不确定度非零，%。

取12份平行样，测定结果见表1。

表1 紫外分光光度法测定别嘌醇片含量的数据

3.2 不确定度来源分析 不确定度来源分析用因果图表示，见图1-图3。

图1 加入R后的不确定度来源因果图

图2 B样品的不确定度来源因果图

图3 W的不确定度来源因果图

4 结果分析与评定

4.1 评定别嘌醇片标示含量的标准不确定度u(B样品) 由式(2)，各输入量无关，依据JJF1059.1—2012公式(30)计算：

其中：由式(1)，各输入量无关，依据JJF1059.1—2012公式(29)计算：

urel(W)=

4.1.1 吸光度带入的相对标准不确定度urel(A) 本实验使用的紫外分光光度计最大允差产生的不确定度，主要由其透射比允差引起的A的标准不确定度u(A)产生。查本例的原始记录得，供试品溶液平均吸光度A为0.568。紫外分光光度计检定证书和说明书显示在工作波长范围内时，透射比示值T允许误差为±0.3%，已知A=lg(1/T)，A=0.568，A的允差是非线性的，所以，A=0.568附近的允差按如下计算：

T的允许误差为±0.3%，即T=0.270 4±0.003，

T∈(0.267 4，0.273 4)，

由A=lg(1/T)可求得：A∈(0.563 2, 0.572 8)，

分布半宽a=(0.572 8-0.563 2)/2=0.004 8

估计为矩形分布，其标准不确定度为：

本例仅考查仪器允差产生的影响：

4.1.2 体积带入的相对标准不确定度

由操作描述可知，V1=100 ml，u(V1)由两个小分量线性叠加，故：

4.1.2.2 终定容体积的相对标准不确定度urel(V3) 同“4.1.2.1”项下方法计算。

4.1.2.3 量取续滤液体积的相对标准不确定度urel(V2) 同“4.1.2.1”项下方法计算。

4.1.3 称量带入的相对标准不确定度

4.1.3.1 称量样品M带入的相对标准不确定度urel(M)u(M)由天平允差引起M的标准不确定度。由于本实验已考虑每份平行样取样质量的天平重复性，含于重复性标准不确定度u(R)之中，故此处不再考虑天平重复性引起的不确定度。供试品称量约为0.1 g，查天平(XS205DU)检定证书，量程为0～5 g的允差绝对值为0.05 mg，认为矩形分布：

=2.13×10-4

=0.040 9

=1.45×10-5

4.1.4 评定供试品含量的相对标准不确定urel(W)

=5.16×10-3

4.1.5 评定供试品标示含量的标准不确定度u(B样品)

=5.16×10-3

由表1，取前两份平行样的平均值，B样品=100.395 56%，故：

u(B样品) =urel(B样品)×B样品

=5.16×10-3×1.003 955 6

=5.18×10-3

4.2 评定别嘌醇片标示含量的重复性标准不确定度u(R) 由表1中12份平行样的值Bi样品获得重复性测量数据，用Bessel公式计算标准差：

实际检验中只需要两份平行样即可，则：

=4.59×10-3

4.3 合成标准不确定度

=6.9×10-3

4.4 扩展不确定度评定 依据JJF1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》，置信概率为95%时，取k=2。按《中国药典》二部凡例及352页规定，保留1位有效数字，故U取一位有效数字，则：

U=kuc(B样品)=2×6.9×10-3=1.4(%)

5 讨论与总结

别嘌醇片标示含量结果为：100.4%±1.4%，第二项为扩展不确定度U之值，k=2。各不确定度分量及值见表2。

表2 各相对标准不确定度、符号及值一览表

从评定结果看，本文的不确定度主要来源于紫外分光光度计的测量与供试品稀释倍数所引起的不确定度，本法以紫外分光光度计的透射比允差评定，表2显示结果虽小，却是最大的不确定度分量。单标吸量管移取供试品溶液，包括吸量管自身、环境以及操作所带入的不确定度，对总的不确定度贡献较大。同时本实验使用的十万分之一天平，若采取逐片减重法求算平均片重，会增大实际所引入的不确定度，而本文选用方法其不确定度较小，可忽略不计。

综上所述，所有仪器和器具定期检定、校准与维护，同时操作科学合理，都有利于减少不确定度的产生。本文评定出测量结果的合成标准不确定度及扩展不确定度，为评价检验报告提供科学依据，本实验采用紫外分光光度法测定别嘌醇片标示含量的结果可靠可控，为同类实验提供有益的参考。

1 JJF 1059.1—2012，测量不确定度评定与表示[S].

2 JJF 1135—2005，化学分析测量不确定度评定[S].

3 中国药典[S].二部. 2010: 352

4 JJG 196—2006，常用玻璃量器[S].

5 范治云，谭会萍.紫外分光光度法测定阿普唑仑片含量结果的不确定度的评定[J].中国药房，2011，22(1)：50-51

2015-04-29

R927.2

A

1006-5687(2015)04-0001-04

*通讯作者：李玉兰，E-mail：liyulan@szda.gov.cn。