吸收放散试验在高效价冷凝集素导致的血型鉴定和交叉配血困难时的临床应用价值

【摘要】 目的 分析因高效价的冷凝集素导致的正反定型不符合和交叉配血困难时的解决方案。方法 选择因高效价冷凝集素的存在而导致的交叉配血和血型鉴定异常的8例患者作为研究对象，对患者血浆采用吸收放散方法清除冷凝集素后再进行血型鉴定和交叉配血。结果 运用吸收试验和放散试验可以有效的减少冷凝集素对实验过程和结果的干扰。结论 吸收放散法可有效的减少甚至去除冷凝集素，使得检验结果真实可靠。

【文献标识码】B

【文章编号】1674-9308（2015）05-0171-02

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.05.143

作者单位：157000 黑龙江省牡丹江市肿瘤医院

The Value of Absorption and Irradiation Test in Blood Group and Cross-matching Test out Caused by the High Titer of Cold Agglutinins in Clinical Application

KONG Xiuhong, Mudanjiang city tumor hospital, Mudanjiang 157000, China

[Abstract] Objective Analysis of the solution of blood group identification in discrepancy and blood cross-matching in difficulty due to the high titer of cold agglutinins. Methods Selection of the group identification and cross-matching test out caused by the high titer of cold agglutinins in 8 cases ofpatients as the research object. Use the Method of absorption and irradiation test to clear the cold agglutinin. Results Absorption and irradiation test can reduce the interference of cold agglutination on the experimental process and results. Conclusion Absorption and irradiation test can effectively reduce or even remove the cold agglutinin,which makes the test result is true and reliable.

[Key words] Cold agglutinin, Absorption and irradiation test, ABO blood group identification

冷凝集素为存在于人体体内的少量的自身抗体，一般正常人的血清中有效价低于1∶16的冷凝集素，当温度达到20℃以上时凝集情况就会消失，在室温的条件下，若冷凝集素效价大于1∶4则在输血工作中有重要的意义 [1]。临床上的一些常见疾病如感染性疾病、血液系统疾病、肿瘤性疾病、免疫系统性疾病和一些药物影响等，可导致患者血清中冷凝集素效价增高 [2]。为了确保输血过程和输血治疗的安全有效，若在给患者进行配血和血型鉴定时出现高效价冷凝集素的干扰，需要进行吸收放散试验对检验结果进行审查，确保实验结果的真实可靠，确保输血治疗的安全有效，降低输血过程中的风险和隐患 [3]。本次研究课题通过对8例因疾病导致的冷凝集素效价较高而影响检验过程，导致患者与供血者血液交叉配血不相合和患者血型鉴定不符的情况进行研究和讨论，现进行如下报道。

1　资料与方法

1.1　一般资料

按照本课题的研究需要选择2011年6月～2014年6月，四年间确定的因冷凝激素的存在而导致的交叉配血和血型鉴定异常的8例患者的临床资料作为研究对象。其中男性患者5例，女性患者3例，年龄范围为18～56岁，平均年龄为40.1岁。患者患病情况：再生障碍性贫血患者1例、肺心病1例、淋巴细胞性白血病1例、肝癌2例、DIC患者1例、肺癌1例、阵发性睡眠性血红蛋白尿1例。

1.2　试剂和仪器

ABO单克隆抗体（批号为2001008）、直接抗人球蛋白试剂、ABO标准红细胞（批号为20001106）和抗体筛选细胞购自上海血液生物医药有限责任公司。0.9%生理盐水和微柱凝胶购自瑞士达亚美公司，凝聚胺（Polyberne）试剂盒和离心机购自珠海贝索生物有限公司。水浴箱购自天津市泰斯特仪器有限公司。

1.3　实验操作方法

1.3.1　ABO血型鉴定 抽取患者静脉血液3 ml于EDTA-K2抗凝管中，离心后配制成浓度为3%～5%的红细胞悬液用于正定型，吸取上清血浆用于反定型。当对患者进行ABO血型鉴定时，可见正定型和反定型的血型结果不相符，正定型采用患者红细胞和抗A和抗B单克隆血清做凝集试验，可见两管中红细胞均凝集，血型应为AB型。反向定型采用患者血浆与标准红细胞做凝集试验，可见两管中红细胞也凝集，血型则为O型。自身对照管也可见凝集，表示患者血清中有高效价的冷凝集素或自身抗体存在。

1.3.2　交叉配血试验 在室温条件下患者血浆分别与A、B、AB、O型供血者红细胞及自身红细胞均呈现3+～4+凝集，在37℃条件下呈2+凝集，患者次侧配血亦然。

1.3.3　放散试验 取浓度为0.9%生理盐水100 ml，置于37℃水浴箱中温育20～30 min，待生理盐水温度达37℃后取8 ml于试管中，加入患者红细胞0.5 ml，混匀，3 000 r/min离心2～5 min，去上清液，如此操作反复洗涤6～8次，直至显微镜下观察患者红细胞无凝集状态时作ABO正定型鉴定患者血型。

1.3.4　吸收试验 取标准的O型红细胞配制成浓度为2%红细胞悬液，加入等量的患者血浆后置于4℃冰箱中1 h（目的为吸收血浆中的冷凝集素）， 最后3 000 r/min离心5 min取上清液。若1次吸收不完全，可重复此操作再吸收1次。取上清液作反定型、不规则抗体筛查和交叉配血。

1.3.5　冷凝集效价测定 取患者血清0.2 ml作倍比稀释，每管中加入浓度为2%的标准O型红细胞0.2 ml，置4℃冰箱中1 h后取出，经3 000 r/min离心1 min，观察结果，以最高稀释倍数肉眼观察可见凝集者为其冷凝集素的测定效价。

2　结果

2.1　冷凝集效价测定

受检的8例患者中冷凝集素效价最低为32，冷凝集素效价最高可达1 024，导致在使用ABO单克隆抗体测定患者红细胞表面抗原和使用ABO标准红细胞检测患者血浆中的抗体时均发生凝集现象。

2.2　吸收试验

取上清液作反定型可得到患者准确血型结果。取上清液作交叉配血可见不论是在盐水介质、抗球蛋白介质或者聚凝胺此试验结果均不出现凝集，交叉配血结果为相合。

2.3　放散试验

取放散试验后的患者红细胞做血型正定型鉴定可得到患者准确的血型结果。最终可见患者正反定型相符合，可排除有亚型的存在。

3　结论

吸收放散试验是临床上常用的、实用的、可靠的减少患者血浆中冷凝集素的血清学方法。吸收试验通过在适宜的环境中利用标准的O型红细胞吸收患者血浆中的抗体。放散试验通过在适宜环境的条件下利用化学和物理原理将患者红细胞上的冷凝集素洗脱下来。吸收和放散过程不仅将患者的红细胞和血浆中影响因素（冷凝集素）浓缩提炼了出来，而且保证了血型鉴定和交叉配血结果的准确性和可靠性。综上所述，吸收放散法可有效的减少甚至去除冷凝集素，为临床输血治疗的安全性和有效性奠定基础。