乙肝相关性肝癌组织中IMP3与IGF2表达及与临床病理的相关性

苏冬娜 吴诗品 (深圳市人民医院暨南大学第二临床学院感染内科，广东 深圳 518020)

乙肝相关性肝癌组织中IMP3与IGF2表达及与临床病理的相关性

苏冬娜 吴诗品 (深圳市人民医院暨南大学第二临床学院感染内科，广东 深圳 518020)

目的 探讨乙肝相关性肝癌组织中胰岛素样生长因子2(IGF2)mRNA结合蛋白3(IMP3)与IGF2的表达及与临床病理的相关性。方法 选择该院2013年1月至2014年12月收治的60例乙肝相关性肝癌患者，分别检测其肝癌组织及癌旁正常组织中IMP3及IGF2的表达情况，并分析其与患者临床病理特征的相关性以及两种标志物之间的相关性。结果 IMP3及IGF2在肝癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织(P＜0.05);IMP3及IGF2的表达阳性率在低分化组织中、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、伴有门脉栓癌、有转移组织及Edmondson-Steiner分级Ⅲ～Ⅳ级中均明显增高;IMP2及IGF2在肝癌组织中的表达具有显著相关性(r=0.32，P＜0.05)。结论 乙肝相关性肝癌患者的癌症组织中IMP3和IGF2的表达均显著增强，同时IMP3及IGF2的表达具有显著相关性，通过对IMP3作用机制的探讨与研究，可将其作为临床癌症诊断和治疗的靶分子。

肝癌;IMP3;IGF2

通过手术切除肿瘤是临床治疗肝癌最有效的手段，可明显提高患者生存率〔1〕。手术治疗虽能延长患者的生存期，但术后复发及转移对患者的生存造成巨大威胁。胰岛素样生长因子2(IGF2)mRNA结合蛋白3(IMP3)是VICKZ家族中的重要成员之一，是IGF2 mRNA连接蛋白，参与胚胎形成早期的细胞生长和迁移〔2〕。研究〔3〕发现，IMP3与肝癌组织中的细胞增殖及迁移密切相关。本研究旨在探讨IMP3和IGF2两种指标与患者临床病理的相关性，为临床乙肝相关性肝癌的诊断和治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院2013年1月至2014年12月收治的60例乙肝相关性肝癌患者，均经术后病理结果证实。其中男33例，女27例;年龄39～82岁，平均(59.2±5.2)岁;依据美国癌症联合委员会最新TNM分期标准:I～Ⅱ期42例，Ⅲ～Ⅳ期18例;分化程度:高分化10例，中分化31例，低分化19例;根据Edmondson-Steiner分级标准:Ⅰ ～Ⅱ级32例，Ⅲ ～Ⅳ级28例。所有患者术前均未行辅助放化疗。另选择患者癌旁正常肝组织作为对照。

1.2 检测方法

1.2.1 试剂 一抗兔抗人IMP3及IGF2多克隆抗体、二抗生物素标记抗IgG抗体和辣根过氧化物酶标记抗IgG抗体、枸橼酸抗原修复液、DAB显色剂、苏木素染液及SP试剂盒购买自北京中杉金桥公司。

1.2.2 标本组织切片制备 离体标本用组织阵列仪按照阵列设计抽提病理蜡块组织芯并有规律的排列在空白受体蜡块上，并在52℃恒温箱中加热融合，制成组织蜡块。用全自动组织切片机制备5 μm组织切片。

1.2.3 免疫组化检测 采用SP免疫组化法，对组织切片进行脱蜡、修复及磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗等处理，继而加入一抗4℃孵育过夜，后加入二抗37℃水浴锅恒温孵育60 min，DAB显色、苏木素复染、脱水、封片，显微镜下观察染色情况。

1.3 结果判断 IMP3为胞质染色，IGF2为胞质及胞核染色，显微镜下对阳性细胞数及染色强度进行检查，着色细胞数＞50%且染色较深者计为强阳性();着色细胞数＜50%或染色较浅者计为阳性(+);无着色细胞计为阴性(－)。

1.4 统计学处理 应用 SPSS16.0软件，采用 χ2检验、Chisquare检验或Fisher精确检验、Pearson检验。

2 结果

2.1 IMP3及IGF2在肝癌组织及癌旁组织中的表达 IMP3及IGF2在肝癌组织中的阳性表达率分别为68.3%(41/60)和63.3%(38/60)，均明显高于癌旁组织中的1.7%(1/60)及13.3%(8/60)(P＜0.05)。

2.2 IMP3及IGF2的表达与肝癌病理相关性分析 IMP3及IGF2在肝癌组织中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小未表现出明显的相关性(P＞0.05);而IMP3及IGF2的表达阳性率在高、中、低分化组织中明显不同，在低分化组织中最高，同时，IMP3及IGF2表达阳性率在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期，在伴有门脉栓癌中明显高于无门脉栓癌，在有转移组织中明显高于无转移组织，在Edmondson-Steiner分级Ⅲ～Ⅳ级明显高于Ⅰ～Ⅱ级(P＜0.05)。见表1。

2.3 IMP3与IGF2在肝癌组织中表达的相关性分析 IMP2及IGF2同时表达阳性率为53.3%(32/60)，同时表达阴性率为21.7%(13/60)，两者在肝癌组织中的表达具有显著相关性(r=0.32，P＜0.05)。

表1 IMP3及IGF2阳性表达与肝癌病理相关性分析(n)

3 讨论

肝癌是临床常见的恶性肿瘤，发病率及死亡率均较高，造成肝癌发病的原因主要包括乙肝和长期饮酒。目前对于乙肝相关性肝癌的发病机制尚不明确，近年来随着生物医学的发展，对于肝癌的发病机制主要从分子的调控与表达、蛋白质的结构与功能以及蛋白质在细胞周期及细胞凋亡中的作用进行诠释〔4〕。目前，临床已发现多种肝癌相关性分子标志物，这些标志物可参与肝癌组织细胞的生长、凋亡、转移及侵袭等。其中IMP3及IGF2是新发现的肝癌诊断标志物〔5〕。

IMP3是近年新发现的一类癌胚蛋白，其在人和小鼠胚胎早期上皮、肌肉及胎盘组织中均有表达，而在成人组织中表达较低或不表达〔6〕。目前研究〔7〕证实，IMP3在多种恶性肿瘤中表达，且其表达程度及强度可作为肿瘤诊断和治疗的靶分子标志物。IGF2已被证实可以自分泌或者旁分泌的形式促进肿瘤原位生长。研究〔8〕显示，晚期结肠癌中IGF2的表达较高，表明其可促进肿瘤的进展。IGF2异常不仅与肝癌的发生发展密切相关，同时与肿瘤的增殖、转移及浸润均有密切关系。本研究进一步表明肝癌的发生发展与IMP3和IGF2的表达具有显著相关性，该两种标志物可作为肝癌诊断和治疗的靶分子。有研究〔9〕报道，IMP3和IGF2在肝癌组织的表达情况与患者组织分级、分化程度、肿瘤体积等密切相关，IMP3和IGF2均为胰岛素相关生长因子，IMP3被认为是IGF2的翻译激活因子，本研究提示IMP3可通过增强IGF2表达促进肿瘤细胞生长和增殖。

总之，乙肝相关性肝癌患者的癌症组织中IMP3和IGF2的表达均显著增强，其与患者的病理分期、组织分化、浸润及转移等均有密切相关性，同时IMP3及IGF2的表达具有显著相关性，通过对IMP3作用机制的探讨与研究，可将其作为临床癌症诊断和治疗的靶分子。

1 奚 忠，丁忠阳，郭榆江，等.ABCG2在肝细胞癌组织中的表达及临床病理意义〔J〕.肝胆胰外科杂志，2013;25(5):385-7.

2 林黎娟，金 政，林贞花，等.肝细胞癌组织中IMP3蛋白的表达及意义〔J〕.临床与实验病理学杂志，2012;28(1):87-9.

3 林黎娟，张锦辉，王 研，等.肝细胞癌组织中IMP3与IGF2表达对预后评估的临床病理学意义〔J〕.临床与实验病理学杂志，2013;29(4):361-4.

4 Chen P，Wang SJ，Wang HB，et al.The distribution of IGF2 and IMP3 in osteosarcoma and its relationship with angiogenesis〔J〕.J Mol Histol，2012;43(1):63-70.

5 Dai N，Christiansen J，Nielsen FC，et al.mTOR complex 2 phosphorylates IMP1 cotranslationally to promote IGF2 production and the proliferation of mouse embryonic fibroblasts〔J〕.Genes Dev，2013;27(3):301-12.

6 Ueki A，Shimizu T，Masuda K，et al.Up-Regulation of IMP3 confers in vivo tumorigenicity on murine osteosarcoma cells〔J〕.PLoS One，2012;7(11):e50621.

7 邱少敏，彭 鹏，宋玉华，等.肝癌患者血清趋化因子配体18的检测及其意义〔J〕.现代生物医学进展，2012;12(22):4275-6，4280.

8 Hartmann EM，Beà S，Navarro A，et al.Increased tumor cell proliferation in mantle cell lymphoma is associated with elevated insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 3 expression〔J〕.Mod Pathol，2012;25(9):1227-35.

9 刘俊锋，张腾艺，李利文，等.IMP3与CD44v6在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义〔J〕.国际外科学杂志，2014;41(2):94-7.

R735.7

A

1005-9202(2015)09-2453-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.09.066

吴诗品(1963-)，男，博士，主任医师，主要从事病毒性肝炎的发病机制方面的研究。

苏冬娜(1977-)，女，硕士，主治医师，主要从事病毒性肝炎的发病机制方面的研究。

〔2014-12-25修回〕

(编辑 李相军/滕欣航)