结直肠腺癌患者术后组织真核翻译起始因子3h、Survivin和增殖细胞核抗原表达及意义

赵成鹏 (南阳市中心医院外科，河南 南阳 473000)

结直肠腺癌患者术后组织真核翻译起始因子3h、Survivin和增殖细胞核抗原表达及意义

赵成鹏 (南阳市中心医院外科，河南 南阳 473000)

目的 应用免疫组化方法检测结直肠腺癌患者术后组织中真核翻译起始因子(EIF)3h、生存素(Survivin)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达，探讨三者在不同临床病理特征中的表达意义。方法 94例结直肠腺癌术后组织作为观察组，56例结肠腺瘤上皮内瘤变组织作为对照组，距肿瘤边缘＞5 cm的正常黏膜组织56例作为正常对照组。应用免疫组化方法检测3组中EIF3h、Survivin和PCNA的表达。结果 3组中EIF3h、Survivin和PCNA表达的阳性率差异显著。观察组中EIF3h、Survivin和PCNA表达的阳性率均与肿瘤的肌层浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移密切相关，EIF3h、Survivin表达的阳性率均与分化程度密切相关。观察组中EIF3h和PCNA、Survivin和PCNA的表达均呈正相关性。结论 EIF3h、Survivin和PCNA高表达在结直肠腺癌病变发生和进展中有重要作用，EIF3h、Survivin均可能通过调节PCNA表达增殖过程发挥生物学功能。

结直肠腺癌;真核翻译起始因子(EIF)3h;Survivin;增殖细胞核抗原(PCNA);免疫组化

结直肠腺癌是由上皮发生的恶性肿瘤，病变发展中癌基因启动细胞的增殖过程，引发细胞恶变及转移〔1〕。真核翻译起始因子(EIF)3h作为EIF家族中的重要亚基，不仅能对细胞生长的正常调控和蛋白质翻译起作用，还对细胞恶变过程中增殖细胞核抗原(PCNA)标记的增殖起重要调节作用〔2，3〕。生存素(Survivin)是重要的凋亡抑制蛋白，可以抑制 caspase-3和caspase-7，进而有效地调节肿瘤细胞的凋亡和增殖的过程〔4〕。PCNA是DNA聚合酶的辅助蛋白，参与DNA链的复制、修复，可作为细胞周期S期的特异性标记〔5〕。本文关注结直肠腺癌患者术后组织中EIF3h、Survivin和PCNA的表达特征，探讨其相关性。

1 材料与方法

1.1 一般资料 2011年1月至2013年12月我院行结直肠腺癌根治手术、同时经病理医师确诊的94例患者作为观察组，均符合WHO关于结直肠腺癌的具体标准，年龄51～83岁，平均(67.3±5.3)岁。56例结肠腺瘤上皮内瘤变组织作为对照组，年龄54～82岁，平均(64.3±5.8)岁。距肿瘤边缘＞5 cm 的正常黏膜组织56例作为正常对照组，年龄52～81岁，平均(65.3±5.5)岁。3组一般资料无明显差别，具有可比性。

1.2 EIF3h、Survivin和PCNA蛋白的检测方法 EIF3h、Survivin和PCNA蛋白均为浓缩液，EIF3h购自Cell Signalign公司，Survivin和PCNA购自北京中杉金桥生物工程公司。抗体按不同比例进行稀释后行预实验，选择最佳的染色效果进行正式实验。正式实验应用免疫组化SP法，DAB染色，操作均由同一病理科主管技师完成，严格质量控制。

1.3 EIF3h、Survivin和PCNA结果的判定标准 EIF3h和Survivin均以细胞质中显现棕黄色颗粒为阳性细胞，PCNA以细胞核中显现棕黄色颗粒为阳性细胞，每张切片计数5个高倍(400倍)视野，计数阳性细胞的百分率。EIF3h、Survivin和PCNA均以阳性率≥5%计为阳性，以阳性率＜5%计为阴性。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结果

2.1 3 组中EIF3h、Survivin和PCNA表达阳性率的比较 正常对照组、对照组、观察组中EIF3h、Survivin和PCNA表达的阳性率具有增高趋势。见表1。

2.2 观察组不同临床特征中EIF3h、Survivin和PCNA表达阳性率的比较 观察组中EIF3h、Survivin和PCNA表达的阳性率均与肿瘤的肌层浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移密切相关，EIF3h、Survivin表达的阳性率均与分化程度密切相关。见表2。

表1 3组中EIF3h、Survivin和PCNA表达阳性率的比较〔n(%)〕

表2 观察组不同临床特征中EIF3h、Survivin和PCNA表达阳性率的比较〔n(%)〕

2.3 观察组中EIF3h、Survivin和PCNA表达的相关性分析观察组中 EIF3h 和PCNA(r=0.46，P=0.042 4)、Survivin 和 PCNA(r=0.45，P=0.029 8)的表达均呈正相关性。其他指标间未见明显的相关性(P＞0.05)。

3 讨论

结直肠癌病因学显示影响因素较多，遗传易感性及分子通路的机制是当今学者关注的重点。其中主要涉及肿瘤癌基因的活化、抑制基因的失活、微卫星不稳定性及异常增殖的启动〔6〕。但上述固有通路中的中间调节阶段也有重要影响。研究认为在肿瘤细胞形成过程中存在着一些固有时段，如翻译起始阶段40 S核糖体与mRNA结合需要一些因子帮助，而EIF3h能对此过程进行调节〔7〕，同样EIF3h异常活化时对核糖体复合物的功能起到关键性作用。EIF3h能使Met复合物稳定地结合到40 S核糖体亚基上，并有助于保存这个复合物在60 S核糖体亚单位之上〔8〕。此时调节通路会形成明显的变化，也使肿瘤处于异常增殖的过程中。如果当外源性刺激或有丝分裂信号刺激细胞时，mTOR结合EIF3h，引起S6K1的过度磷酸化，不仅能促进肿瘤细胞的增殖，还对肿瘤细胞的转移有重要影响〔9〕。Survivin具有抑制细胞凋亡，干扰细胞周期，调节细胞分裂，参与肿瘤微血管形成的功能，也是目前发现的最强的凋亡抑制因子〔10，11〕。当Survivin高表达时，肿瘤细胞凋亡率减少，并继而引起增殖活性升高，使病变处于加速期〔12，13〕。PCNA是一种非组核蛋白，通过与周期性蛋白激酶结合引发细胞的增殖过程〔14，15〕。部分学者认为PCNA表达较 Ki67要理想，可以囊括Ki67阳性表达的所有细胞，因此其标记增殖更加客观全面〔16，17〕。

本实验提示EIF3h、Survivin和PCNA在结直肠癌变过程中有重要促进作用。结肠腺瘤上皮内瘤变作为癌变的前期改变对临床有重要意义，而在上皮内瘤变过程中，EIF3h、Survivin和PCNA均参与进来。提示临床中对部分上皮内瘤变的患者，如果诊断为低级别上皮内瘤变，可以行EIF3h、Survivin和PCNA的检测，如果三者高表达，说明上皮内瘤变处于进展阶段，病理诊断应当升级，或应密切随诊，必要时积极进行手术治疗。EIF3h、Survivin和PCNA三种蛋白参与肿瘤的生长、脉管的侵犯及淋巴结播散过程，此时EIF3h、Survivin和PCNA的高表达也提示肿瘤处于进展期。EIF3h、Survivin参与了肿瘤的分化过程，即肿瘤中EIF3h、Survivin高表达使肿瘤的分化程度更低，细胞异型性更明显，肿瘤的生长更迅速，恶性程度更高。EIF3h和Survivin对肿瘤的促进作用可能是通过调节PCNA表达的增殖过程起作用的。EIF3h、Survivin和PCNA高表达时引起肿瘤生长的能力增强，向肌层浸润的程度增强，同时可能破坏脉管。近年也有学者认为Survivin对肿瘤血管生成有影响〔18〕，因此EIF3h、Survivin和PCNA作用机制可能更复杂，其作用具体过程及通路需待更多基础实验证实〔19，20〕。

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R735.35

A

1005-9202(2015)09-2444-03;

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.09.061

赵成鹏(1974-)，男，副主任医师，主要从事临床外科学研究。

〔2013-12-07修回〕

(编辑 苑云杰)