蔬菜农药残留速测结果异常的原因及对策

刘定喜，邹征欧

(1 衡阳县农产品质量安全检验检测站，湖南衡阳 421200；2 衡阳市粮油生产技术站，湖南衡阳 421001)

蔬菜农药残留速测结果异常的原因及对策

刘定喜1，邹征欧2

(1 衡阳县农产品质量安全检验检测站，湖南衡阳 421200；2 衡阳市粮油生产技术站，湖南衡阳 421001)

介绍了蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术的原理，分析了检测中出现结果异常的各种原因，并提出了减少检测结果误差，提高检测结果准确性的对策。

蔬菜；农药残留速测；结果异常；对策

农药是现代农业生产必不可少的生产资料，安全合理适量施用农药，对保障农业生产安全、提高农产品产量、促进农民增收都具有积极意义。农药的过度使用对农产品的质量安全造成威胁[1～4]。农产品质量安全已经引起了政府和广大消费者的重视，在保障供给的同时如何保障质量安全，加强农产品质量安全的监管已经成为各级政府的一项重要工作，农药残留检测的重要性不言而喻。

目前，我国常用的蔬菜农药残留快速检测方法是酶抑制法。该方法应用方便，操作简单，成本较低，且检测结果准确，适合在蔬菜基地的市场准入监测及农贸市场和超市等领域例行监测工作，特别适合县级以下基层农产品质检机构在面广、点多、量大、农药残留风险高的区域进行农药残留监测[5]。蔬菜农药残留快速检测方法可对上市前的蔬菜进行速测，将农药残留超标的蔬菜控制在市场之外，以保障广大消费者的安全，杜绝因农药残留超标发生的中毒事件。但在实际检测过程中，该方法还存在一些问题。笔者结合多年工作实践，分析了问题出现的原因并提出解决对策，以期为保证检测数据结果的准确性，解决检测数据结果异常的问题提供参考。

1 蔬菜农药残留快速检测技术的原理

有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导。根据这一昆虫毒理学原理，推测如果蔬菜中农药残留量越多，酶的抑制率就越高，反之则越低。蔬菜农药残留快速检测实践中，通过检测酶被抑制程度，可以判断蔬菜中农药残留的情况[6]。

蔬菜农药残留速测实践中，样品检测结果异常问题主要集中在两个方面：一是检测结果出现负数；二是检测结果出现假阳性。

2 检测结果出现负数的原因及对策

(1)操作中仪器的校准平衡，比色皿的清洁，试剂配置的一致性，试剂的平衡等因素都会导致较大负数出现。

解决此类问题的关键在于经常校准调试农药残留速测仪，以确保仪器的测试准确度。此外，在实验室将农药残留速测仪开机预热半小时以上能保证仪器平衡稳定。

针对试剂配置不一致的问题，用蒸馏水、纯净水或去离子水配置磷酸盐缓冲液可以杜绝测量过程的干扰。在冬季气温较低时，可以使用玻璃棒边搅边超声，让其完全溶解，以保证磷酸盐缓冲液的浓渡一致。

在配置显色剂与底物时，为保证磷酸盐缓冲液的整体一致性，应选择同批次蔬菜样的磷酸盐缓冲液进行配置；当酶从冰箱中拿出时，应放在装有冰块的器皿中与显色剂及底物在常温下平衡几分钟后再开始测试。

(2)不规范操作是检测结果出现负数的另一诱因。操作员未按正确的操作规程使用移液枪，或操作手法不熟练，都会导致样品中加入酶的量比空白组多，致使样品3 min前后的吸光值之差比空白组3 min前后的吸光值之差大，从而出现较大的负数。

操作不规范的关键在于移液枪的不当使用与维护。测试前检查移液枪是否调准，上枪嘴时要按正确的方法上紧，防止枪嘴底部在移取过程中出现松动，测试结束后将移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。此外，还要定时校准验证、清洗移液枪。测试中第一次移取酶液时可将移液枪嘴反复在酶液中进行润洗，确保移液枪在移取酶液时的准确度。

(3)加入底物时速度过慢，或因底物试剂已被污染也会导致检测结果出现负数。底物加入速度太慢，先加入底物的比色皿中的酶在放入测定仪之前已开始水解底物，水解物再与显色剂结合，致使样品3 min前后的吸光值之差比空白3 min前后的吸光值之差还要大，从而产生了较大的负数。

快速加入底物能在很大程度上解决检测结果出现负数的问题。将底物迅速、均匀地加入待测样品中，其后摇匀并放入农药残留速测仪进行测定。

3 检测结果出现假阳性的原因及对策

(1)酶的活性降低或失去活性。因为酶不能水解底物，因此无法与显色剂结合生成黄色，其结果与提取液中存在农药时酶的活性被农药抑制一样，造成了假阳性的产生。

贮藏过程中要保证酶试剂在0～5℃温度条件下保存，开封启用后应尽量在一周内使用完。新开封的酶液为10 mL，理论上可以做200个样品。如果当次检测样品数量在100个以内，可以将新开封的酶分成两份，不用的一份酶继续放在冰箱内保存。为了保证酶的活性，在样品检测过程中到把酶放置在装有冰块的器皿中，夏天冰块溶化快，要及时倒出溶化的水并添加新的冰块。在加酶液时，为了避免人体温度影响酶的活性，尽量用手握住酶液试剂瓶的上端而不是底部，且酶液试剂瓶不宜长时间拿在手中。加好试样液及显色剂后，将比色皿放在37～38℃的恒温箱内培养半个小时左右，提高酶的整体活性(检测中空白样3 min后与3 min前吸光值差要求在0.4～0.8)。

(2)某些本身含有辛辣物质的蔬菜，如辣椒、葱蒜类等可抑制酶的活性；某些有很高色素含量的蔬菜，如黑茄子、番茄等，可影响吸光值，直接使样本3 min后与3 min前吸光值的差变小，从而出现假阳性。

对于本身含有辛辣物质的蔬菜，如辣椒，检测时可以将辣椒切成长段，以降低辛辣物质渗入提取液中造成不必要的干扰，尽量避免假阳性的产生；葱蒜类蔬菜可以采用整株浸取法以降低假阳性的产生。对于本身有很高色素含量的蔬菜，如黑茄子，可以通过在样品制备时减少表皮成分增加肉质成分的方法来降低色素的干扰，尽量避免假阳性的产生；番茄则可以采取在样品制备时增加表皮成分减少肉质成分来降低色素的干扰。对于含有辛辣物质或者色素含量很高的蔬菜样品，在振荡提取时不能时间过长、转速过多，振荡时间在2 min以内、振荡转速在200 r/min左右为宜，从而避免提取液中辛辣物质或者蔬菜色素过多的干扰，防止假阳性的产生。

(3)当蔬菜切得太碎，蔬菜碎沫混进比色皿中后，碎沫的沉降影响吸光值，使样本3 min后与3 min前吸光值的差变小，导致计算出的抑制率提高，产生假阳性。

解决这类问题的关键在于在样品制备的尺寸，要求大小均匀合理，对于像花菜、白苦瓜等易碎蔬菜样应该切得大块一点。在样品振荡提取时转速不能过快、时间不宜过长，避免将样品震碎，振荡之后应当将试样液中的碎沫沉淀3 min左右。在移取试样时要把样品瓶斜着慢吸为准，防止碎沫吸进比色皿影响吸光值的变化。

[1] NY/T 448-2001.蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法[S].

[2] 朱国念.农药残留快速检测技术[M].北京：化学工业出版社，2008.

[3] 赵 研，赵洪江.谈沈阳市蔬菜农药残留检测现状[J].现代农业科技，2009(24)：330.

[4] 杨 慧，王富华.我国蔬菜农药残留速测技术的应用与发展[J]. 农业环境与发展，2008(5)：67-72.

[5] 赵艳华.农产品农药残留速测中常见影响因素的探讨[J].吉林农业，2012(3)：14-15.

[6] 赵亚玲.蔬菜农药残留快速检测的影响因素及解决措施[J].现代农业科技，2010(12)：329.

2015-05-13

刘定喜(1980-)，男，湖南衡阳县人，助理农艺师，主要从事农产品质量检测工作。

S481+.8

C

1001-5280(2015)04-0441-02

10.3969/j.issn.1001-5280.2015.04.29