HPLC法测定理气解郁丸中橙皮苷的含量

施明+王业盈

【摘 要】 目的：研究测定理气解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法：采用高效液相色谱法，以甲醇-0.1%磷酸溶液（45∶55）为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长为283nm。结果：橙皮苷线性范围为0～1.140μg，平均回收率为100.3%，RSD=2.6%。结论：采用高效液相色谱法测定理气解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、结果准确、操作简便的优点，可以用于理气解郁丸的质量控制。

【关键词】 理气解郁丸；HPLC；橙皮苷

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）06-0025-02

理气解郁丸是南京同仁堂药业有限责任公司研制的中药新药，由陈皮、木香、半夏、延胡索等十余味中药组成，具有舒肝理气，解郁的功能，用于胸肋胀闷，气郁不舒。陈皮为其君药，为有效控制药品质量，采用高效液相色谱法测定该药品中橙皮苷的含量。

1 仪器与试药

日本岛津高效液相色谱仪，LC-10AD泵，SPD-10A型检测器，电子分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号0709-9803）。理气解郁丸（南京同仁堂药业有限责任公司）。缺味阴性对照样品：按照制剂工艺制备相应的缺味处方药。色谱级甲醇（Fiser）、双蒸水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱 SinoChrom ODS-BP柱（5μm，4.6×250mm）；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（45：55）；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：283nm。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备取适量橙皮苷对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg橙皮苷的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备取本品1g，研细，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，水浴加热提取4小时。提取液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得[1]。

2.2.3 阴性对照品溶液的制备取缺陈皮的样品，同供试品溶液的制备项下操作。

2.3 干扰试验分别吸取对照品、供试品溶液、阴性对照溶液各5μl，按2.1项下的色谱条件分别进样测定，结果阴性无干扰[2]。

2.4 线性考察精密吸取0、1、2、3、4、5ml橙皮苷对照品溶液，将其转移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度[3]。分别吸取六个浓度的橙皮苷对照品溶液5μl，注入高效液相色谱仪测定其峰面积。以峰面积Y对进样量X（μg）进行线性回归，得Y=10.4381+2057.1554X，r=0.9997（n=6），其线性范围为0～1.140μg。

2.5 精密度试验取同一批次的样品1.0g，精密称定，按2.2.2项下的方法制备成供试品溶液，连续进样6次，体积5μml，测定其峰面积[4]。计算RSD为1.35%，符合要求，表明该方法的精密度较好。

2.6 重现性试验精密称取6份同一批号的样品，按照2.2.2项下的方法制成供试品溶液，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为1.28%，符合要求。表明该方法的重现性较好。

2.7 稳定性试验取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8h进样，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为2.25%，符合要求。表明供试品溶液在8h内比较稳定。

2.8 加样回收率试验取已知含量的样品约0.5g，精密称定，加入一定量的橙皮苷对照品，按2.2.2项下的方法制成供试品溶液，测定其峰面积。计算得平均回收率为100.3%，RSD为2.6%，均符合要求，说明该方法可以用于橙皮苷的含量测定。具体结果见表1所示。

2.9 样品含量测定取三批理气解郁丸样品各1g，精密称定，按2.2.2项下的方法制备成供试品溶液，测定橙皮苷的含量，结果见表2所示。

3 讨论

本试验考察了索氏提取、回流提取、超声提取方法，结果表明索氏提取时间过长；回流提取杂质多、干扰大；超声提取检测周期短、无杂质干扰。提取溶剂的选择，考察了甲醇、乙醇，结果甲醇提取完全，峰形好。

参考文献

[1] 赵晓红，杨莹，申睿，等.HPLC测定复方豆蔻合剂中橙皮苷含量[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（11）：61-63.

[2]奚永兰，徐富柱.高效液相色谱法测定乳宁颗粒中芍药苷的含量[J].中国民族民间医药，2012，21（6）：42-43.

[3]雷虹，冯伟红.HPLC法测定枳术胶囊中橙皮苷的含量[J].中国实验方剂学杂志，2005，11（4）：5-6.

[4] 王亚莉，程龙.杜仲颗粒质量标准研究[J].中国民族民间医药，2011，20（5）：34-35.

（收稿日期：2014.01.15）

【摘 要】 目的：研究测定理气解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法：采用高效液相色谱法，以甲醇-0.1%磷酸溶液（45∶55）为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长为283nm。结果：橙皮苷线性范围为0～1.140μg，平均回收率为100.3%，RSD=2.6%。结论：采用高效液相色谱法测定理气解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、结果准确、操作简便的优点，可以用于理气解郁丸的质量控制。

【关键词】 理气解郁丸；HPLC；橙皮苷

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）06-0025-02

理气解郁丸是南京同仁堂药业有限责任公司研制的中药新药，由陈皮、木香、半夏、延胡索等十余味中药组成，具有舒肝理气，解郁的功能，用于胸肋胀闷，气郁不舒。陈皮为其君药，为有效控制药品质量，采用高效液相色谱法测定该药品中橙皮苷的含量。

1 仪器与试药

日本岛津高效液相色谱仪，LC-10AD泵，SPD-10A型检测器，电子分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号0709-9803）。理气解郁丸（南京同仁堂药业有限责任公司）。缺味阴性对照样品：按照制剂工艺制备相应的缺味处方药。色谱级甲醇（Fiser）、双蒸水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱 SinoChrom ODS-BP柱（5μm，4.6×250mm）；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（45：55）；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：283nm。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备取适量橙皮苷对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg橙皮苷的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备取本品1g，研细，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，水浴加热提取4小时。提取液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得[1]。

2.2.3 阴性对照品溶液的制备取缺陈皮的样品，同供试品溶液的制备项下操作。

2.3 干扰试验分别吸取对照品、供试品溶液、阴性对照溶液各5μl，按2.1项下的色谱条件分别进样测定，结果阴性无干扰[2]。

2.4 线性考察精密吸取0、1、2、3、4、5ml橙皮苷对照品溶液，将其转移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度[3]。分别吸取六个浓度的橙皮苷对照品溶液5μl，注入高效液相色谱仪测定其峰面积。以峰面积Y对进样量X（μg）进行线性回归，得Y=10.4381+2057.1554X，r=0.9997（n=6），其线性范围为0～1.140μg。

2.5 精密度试验取同一批次的样品1.0g，精密称定，按2.2.2项下的方法制备成供试品溶液，连续进样6次，体积5μml，测定其峰面积[4]。计算RSD为1.35%，符合要求，表明该方法的精密度较好。

2.6 重现性试验精密称取6份同一批号的样品，按照2.2.2项下的方法制成供试品溶液，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为1.28%，符合要求。表明该方法的重现性较好。

2.7 稳定性试验取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8h进样，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为2.25%，符合要求。表明供试品溶液在8h内比较稳定。

2.8 加样回收率试验取已知含量的样品约0.5g，精密称定，加入一定量的橙皮苷对照品，按2.2.2项下的方法制成供试品溶液，测定其峰面积。计算得平均回收率为100.3%，RSD为2.6%，均符合要求，说明该方法可以用于橙皮苷的含量测定。具体结果见表1所示。

2.9 样品含量测定取三批理气解郁丸样品各1g，精密称定，按2.2.2项下的方法制备成供试品溶液，测定橙皮苷的含量，结果见表2所示。

3 讨论

本试验考察了索氏提取、回流提取、超声提取方法，结果表明索氏提取时间过长；回流提取杂质多、干扰大；超声提取检测周期短、无杂质干扰。提取溶剂的选择，考察了甲醇、乙醇，结果甲醇提取完全，峰形好。

参考文献

[1] 赵晓红，杨莹，申睿，等.HPLC测定复方豆蔻合剂中橙皮苷含量[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（11）：61-63.

[2]奚永兰，徐富柱.高效液相色谱法测定乳宁颗粒中芍药苷的含量[J].中国民族民间医药，2012，21（6）：42-43.

[3]雷虹，冯伟红.HPLC法测定枳术胶囊中橙皮苷的含量[J].中国实验方剂学杂志，2005，11（4）：5-6.

[4] 王亚莉，程龙.杜仲颗粒质量标准研究[J].中国民族民间医药，2011，20（5）：34-35.

（收稿日期：2014.01.15）

【摘 要】 目的：研究测定理气解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法：采用高效液相色谱法，以甲醇-0.1%磷酸溶液（45∶55）为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长为283nm。结果：橙皮苷线性范围为0～1.140μg，平均回收率为100.3%，RSD=2.6%。结论：采用高效液相色谱法测定理气解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、结果准确、操作简便的优点，可以用于理气解郁丸的质量控制。

【关键词】 理气解郁丸；HPLC；橙皮苷

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）06-0025-02

理气解郁丸是南京同仁堂药业有限责任公司研制的中药新药，由陈皮、木香、半夏、延胡索等十余味中药组成，具有舒肝理气，解郁的功能，用于胸肋胀闷，气郁不舒。陈皮为其君药，为有效控制药品质量，采用高效液相色谱法测定该药品中橙皮苷的含量。

1 仪器与试药

日本岛津高效液相色谱仪，LC-10AD泵，SPD-10A型检测器，电子分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号0709-9803）。理气解郁丸（南京同仁堂药业有限责任公司）。缺味阴性对照样品：按照制剂工艺制备相应的缺味处方药。色谱级甲醇（Fiser）、双蒸水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱 SinoChrom ODS-BP柱（5μm，4.6×250mm）；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（45：55）；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：283nm。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备取适量橙皮苷对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg橙皮苷的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备取本品1g，研细，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，水浴加热提取4小时。提取液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得[1]。

2.2.3 阴性对照品溶液的制备取缺陈皮的样品，同供试品溶液的制备项下操作。

2.3 干扰试验分别吸取对照品、供试品溶液、阴性对照溶液各5μl，按2.1项下的色谱条件分别进样测定，结果阴性无干扰[2]。

2.4 线性考察精密吸取0、1、2、3、4、5ml橙皮苷对照品溶液，将其转移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度[3]。分别吸取六个浓度的橙皮苷对照品溶液5μl，注入高效液相色谱仪测定其峰面积。以峰面积Y对进样量X（μg）进行线性回归，得Y=10.4381+2057.1554X，r=0.9997（n=6），其线性范围为0～1.140μg。

2.5 精密度试验取同一批次的样品1.0g，精密称定，按2.2.2项下的方法制备成供试品溶液，连续进样6次，体积5μml，测定其峰面积[4]。计算RSD为1.35%，符合要求，表明该方法的精密度较好。

2.6 重现性试验精密称取6份同一批号的样品，按照2.2.2项下的方法制成供试品溶液，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为1.28%，符合要求。表明该方法的重现性较好。

2.7 稳定性试验取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8h进样，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为2.25%，符合要求。表明供试品溶液在8h内比较稳定。

2.8 加样回收率试验取已知含量的样品约0.5g，精密称定，加入一定量的橙皮苷对照品，按2.2.2项下的方法制成供试品溶液，测定其峰面积。计算得平均回收率为100.3%，RSD为2.6%，均符合要求，说明该方法可以用于橙皮苷的含量测定。具体结果见表1所示。

2.9 样品含量测定取三批理气解郁丸样品各1g，精密称定，按2.2.2项下的方法制备成供试品溶液，测定橙皮苷的含量，结果见表2所示。

3 讨论

本试验考察了索氏提取、回流提取、超声提取方法，结果表明索氏提取时间过长；回流提取杂质多、干扰大；超声提取检测周期短、无杂质干扰。提取溶剂的选择，考察了甲醇、乙醇，结果甲醇提取完全，峰形好。

参考文献

[1] 赵晓红，杨莹，申睿，等.HPLC测定复方豆蔻合剂中橙皮苷含量[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（11）：61-63.

[2]奚永兰，徐富柱.高效液相色谱法测定乳宁颗粒中芍药苷的含量[J].中国民族民间医药，2012，21（6）：42-43.

[3]雷虹，冯伟红.HPLC法测定枳术胶囊中橙皮苷的含量[J].中国实验方剂学杂志，2005，11（4）：5-6.

[4] 王亚莉，程龙.杜仲颗粒质量标准研究[J].中国民族民间医药，2011，20（5）：34-35.

（收稿日期：2014.01.15）