3种植物提取物对樱桃番茄青枯病病原菌的抑菌活性

2015-01-15曹鹏飞

江苏农业科学 2014年11期

曹鹏飞

摘要：青枯病病原菌已成为樱桃番茄优质、高产的重要障碍。比较大蒜、银杏、海金沙3种植物提取液对青枯病病原菌的抑制作用。结果表明，随着3种提取物浓度的增加，抑菌效果逐渐增强。3种提取物的抑菌效果极显著高于农药对照的最低浓度分别为大蒜提取物20%、银杏提取40%、海金沙提取60%，且20%大蒜提取物对青枯病菌B2.1.2.2、青枯病菌I1.2.1.1、青枯病菌K5.1.1.1、青枯病菌L5.3.1.2的抑菌圈直径分别为：9.23、8.30、8.12、9.19mm。当浓度为100%时，3种提取物的抑菌效果均最好，但大蒜提取物对供试菌株的抑菌效果最强。因此，大蒜可作为樱桃番茄植物保护剂的主要开发原料。

关键词：樱桃番茄；青枯病菌；抑菌活性；植物提取液；大蒜；银杏；海金沙

中图分类号：S482.2+92文献标志码：A文章编号：1002-1302（2014）11-0169-02

樱桃番茄（LycopersivonesculentumMill.）别称圣女果，为茄科一年生草本植物，含有丰富的蛋白质、维生素以及钾、钙等多种矿物质及微量元素，具有降血压、解毒、防治动脉硬化、防癌抗癌之功效[1]。近年来，樱桃番茄价位持续走高，比普通番茄增收22500～30000元/hm2，经济效益相当可观。樱桃番茄青枯病的发生与危害呈逐年加重趋势。据调查，轻病田一般减产10%，重病田减产50%以上，该病已成为樱桃番茄优质高产的重要障碍[2]。青枯病是由青枯菌（Ralstoniasolanacearum）引起的毁灭性土传病害。该菌菌系复杂，寄主广泛，高温高湿环境下生命力顽强，能侵染50多个科450多种植物，防治难度大[3]。近年来，对于茄科番茄属植物青枯病，农业上多用抗生素、激素来抵抗微生物的侵害，以免造成经济损失，但大量使用抗生素、激素对人体健康有害[4]。目前，国内尚没有理想的防治方法及农药来防治这种土传性的细菌病害，因此开发利用新型天然植物杀菌剂，不仅可以解决抗生素及其替代品不能解决的药物残留问题，还可以提高我国农产品品质。施用生态有机肥，改善土壤生态环境，提高土壤微生物多样性，有望从根本上控制樱桃番茄青枯病的发生[5]。本研究以大蒜、银杏外种皮、海金沙为材料，研究其对樱桃番茄青枯病病原菌的杀菌活性，旨在为青枯病病原菌植物源杀菌剂的综合开发利用提供理论依据。

1材料和方法

1.1材料

青枯菌B2.1.2.2、I1.2.1.1、K5.1.1.1、L5.3.1.2均分离自感染青枯病的樱桃番茄植株。市售白皮大蒜、银杏外种皮、海金沙叶片（含孢子）。

1.2植物提取液的制备

1.2.1大蒜提取液的制备[6]

选取足够数量新鲜无芽、无虫变、无霉烂的大蒜鳞茎，剥皮后于研磨杯中榨汁，纱布过滤后，6000r/min离心2次，每次10min，取上清液，得到大蒜提取液，保存备用。

1.2.2银杏提取液的制备[7]

取刚采摘的银杏外种皮，60℃烘干，粉碎，过60目筛备用。料液比为1g∶10mL，将银杏外种皮粉末用80%工业乙醇浸提，提取3次，每次4h，合并提取液后于6000r/min离心10min，取上清液，真空抽滤浓缩，银杏外种皮提取液浓度为0.2g/mL，保存备用。

1.2.3海金沙提取液的制备[8]

取新鲜海金沙叶片（含孢子），60℃烘干，粉碎，过60目筛备用。料液比为1g∶40mL，将海金沙粉末用80%工业乙醇浸提3h后6000r/min离心10min，取上清液真空抽滤浓缩，海金沙提取液浓度为0.2g/mL，保存备用。

1.3提取液对青枯病菌的抑菌试验

采用滤纸片法[6]进行抑菌试验。将提取液用无菌水分别稀释成20%、40%、60%、80%、100%，农用硫酸链霉素5000倍液作为农药对照，共计6个处理。将灭菌后的滤纸片置于不同浓度提取液、农用硫酸链霉素5000倍液、无菌水中浸泡。将50℃左右的NA培养基倒入培养皿内，待培养基凝固后，取编号为B2.1.2.2、I1.2.1.1，K5.1.1.1、L5.3.1.2的樱桃番茄青枯病菌菌悬液各0.2mL涂布于培养基表面，把经不同浓度药剂浸泡的滤纸片等距离放在培养基上，7张/皿，7张分别为不同浓度的提取液、农用硫酸链霉素5000倍液、无菌水浸泡的滤纸片，平行3组。于30℃恒温箱中暗培养48h后，用电子数显卡尺测量抑菌圈直径。

2结果与分析

2.1大蒜提取液对樱桃番茄青枯病菌的抑菌效果

由表1可知，4种青枯病菌均在不同浓度的提取液滤纸片周围产生直径大小不等的抑菌圈，提取液浓度越大，抑菌圈直径越大。当大蒜提取液浓度为20%～100%时，随着浓度的升高，抑菌圈直径逐渐增大。当大蒜提取液浓度为20%时，抑菌圈直径与对照相比差异极显著。当大蒜提取液浓度达100%时，4种供试菌株的抑菌圈直径均达到最大，依次为10.54、11.61、10.71、17.12mm。

2.2银杏提取液对樱桃番茄青枯病菌的抑菌效果

银杏提取液同样对青枯病菌具有抑制作用，当银杏提取液浓度为20%～100%时，抑菌圈直径随着浓度的增加不断增大。当银杏提取液浓度小于40%时，抑菌圈直径与对照差异不显著；当浓度大于40%时，抑菌圈直径均极显著高于对照；当浓度达100%时，各处理抑菌圈直径均最大（表2）。

2.3海金沙提取液对樱桃番茄青枯病菌抑菌效果

由表3可知，随着提取液浓度的升高，抑菌圈直径不断增大。当海金沙提取液浓度小于60%时，抑菌效果较差；当海金沙提取液浓度大于60%时，抑菌效果与对照相比差异极显著；当海金沙提取液浓度为100%时，对樱桃番茄青枯病菌的抑菌效果最好。

3结论与讨论

青枯病是由青枯菌引起的毁灭性土传病害，是世界上危害最大、分布最广、造成损失最严重的植物病害之一[3]，以茄科作物发病最为严重，番茄受害尤甚，被称为植物“癌症”。本研究比较了大蒜、银杏外种皮、海金沙3种植物提取液对樱桃番茄青枯病病原菌的抑制作用。结果表明，随着3种提取物浓度的增加，抑菌效果逐渐增强。3种提取物的抑菌效果极显著高于农药对照的最低浓度，分别为：大蒜提取物20%、银杏提取40%、海金沙提取60%，且20%大蒜提取物对青枯病菌B2.1.2.2、青枯病菌I1.2.1.1、青枯病菌K5.1.1.1、青枯病菌L5.3.1.2的抑菌圈直径分别为9.23、8.30、8.12、9.19mm。这可能与提取物的有效成分有关，不同植物有效成分不同，同一植物对不同类型的青枯病菌的抑菌活性大小也存在一定差异，某些活性遇光分解或者不耐高温，从而影响抑菌效果。大蒜提取物中的主要有效成分大蒜素能与微生物生长繁殖所必需的巯基相结合，使巯基酶失活，从而抑制微生物生长。因此，可尝试以大蒜为主要原料开发樱桃番茄植物保护剂，通过灌根方式来防治樱桃番茄青枯病。

参考文献：

[1]许永祯，薛寒青，陈斌，等.番茄新品种——美味樱桃番茄[J].青海农林科技，1999（1）：54.

[2]缪凯，李焕秀.番茄青枯病研究进展[J].种子世界，2007，38（6）：36-37.

[3]尹贤贵，王小佳，张赟，等.我国番茄青枯病及抗病育种研究进展[J].云南农业大学学报，2005，20（2）：163-167.

[4]吕平，黄惠芳，韦丽君.四种植物提取物的抑菌作用研究[J].食品科技，2010，35（12）：216-219.

[5]蔡燕飞，廖宗文，董春，等.番茄青枯病的土壤微生态防治研究[J].农业环境保护，2002，21（5）：417-420.

[6]商胜华，陆宁，陈庆园，等.大蒜提取液对烟草黑胫病和青枯病的防治效果初探[J].贵州农业科学，2009，37（10）：94-96.

[7]冀玉良.利用银杏外种皮提取液抑制农作物病原菌初步研究[J].农业网络信息，2005（9）：76，84.

[8]杨斌，陈功锡，唐克华，等.海金沙提取物抑菌活性研究[J].中药材，2011，34（2）：267-272.

参考文献：

[1]许永祯，薛寒青，陈斌，等.番茄新品种——美味樱桃番茄[J].青海农林科技，1999（1）：54.

[2]缪凯，李焕秀.番茄青枯病研究进展[J].种子世界，2007，38（6）：36-37.