血清endocan水平与冠脉慢血流的相关性

韩 伟，任引刚，张利华(第四军医大学唐都医院心内科，西安 70038;第四军医大学唐都医院老年病科;通讯作者，E-mail:profzhanglh@6．com)

冠状动脉慢血流(coronary slow flow，CSF)现象是指在在冠状动脉造影过程中没有发现冠状动脉存在显著狭窄(狭窄程度＜40%)，却发生远端冠脉血管血流灌注延迟的现象［1，2］。CSF 由 Tambe 等［1］在1972年首次提出，近年来，随着冠脉介入技术的普及，CSF越来越受到临床的重视。研究表明，CSF常伴随心绞痛、心肌梗死、恶性心律失常甚至心源性猝死等不良心血管事件，从而导致患者预后较差［3，4］。

尽管CSF的具体机制仍然未能完全明确，但诸多的研究已经证明，血管内皮功能不全在CSF的发生发展中起着重要的作用，被认为是CSF最重要的发病机制之一［5，6］。Endocan是从人脐静脉内皮细胞中分离出的一种内皮细胞特异性分子，最初被命名为内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell-specific molecule 1，ESM-1)［7］。近年来的研究表明，endocan 的激活可以触发下游一系列的病理生理过程，导致血管内皮功能不全的发生［8］。基于此，我们设想，endocan的激活可能也与CSF的发生发展存在一定关联。因此，本研究旨在探讨血清endocan水平与CSF的相关性。

1 材料与方法

1．1 研究对象

本研究为前瞻性横断面研究，研究对象为2013-05～2015-05在我院住院行冠脉造影的患者，共纳入冠脉造影示冠脉血管正常或接近正常(狭窄程度＜40%)且伴有CSF的患者82例(慢血流组，n=82)，同时按照年龄匹配的原则纳入与CSF冠脉血管正常或接近正常且冠脉血流速度正常的患者184例做为对照人群(对照组，n=184)。CSP定义为任一冠脉主支血管参照心肌梗死溶治疗后(thrombolysis in myocardial infarction，TIMI)血流帧数(TIMI frame count，TFC)＞27。主要排除标准:①急性冠脉综合征;②心脏节律异常如心房颤动及病态窦房结综合征;③其他器质性心脏病，如心肌病、严重的心瓣膜病、先天性心脏病或严重的心功能不全;④合并严重的肝肾功能障碍;⑤合并全身急慢性感染性疾病;⑥合并系统性炎症反应性疾病;⑦合并已知恶性肿瘤疾病;⑧2型糖尿病。

1．2 研究方法

1．2．1 造影评价 按照常规方法行冠脉造影术，按照Gibson等［9］提供的方法计算主支冠脉血管的TIMI-TFC，将前降支血管的TFC除以1．7以校正其长度［9］，将前降支(校正后)、回旋支、右冠的 TFC 加起来除以3取均值，即得到平均TFC。

1．2．2 常规血生化检测 所有研究对象均在行冠脉造影前采集清晨静脉血10 ml，使用Hitachi 7600全自动生化分析仪测定各组患者的空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、血糖等常规血生化指标。使用Abbott ci8200全自动分析仪测量超敏C反应蛋白(hs-CRP)。

1．2．3 血清endocan水平检测 所有研究对象均在行冠脉造影前采集清晨静脉血10 ml，置于普通离心管，以3 000 r/min离心10 min分离血清，以Eppendorf管分装后置于-80℃冰箱冻存待测。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)测定患者的血清endocan水平。人endocan ELISA试剂盒购自武汉Cusabio Bioscience公司，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1．3 统计分析

2 结果

2．1 基本临床特征及冠脉造影结果

在基线临床特征方面，慢血流组患者hs-CRP水平较对照组显著升高，其余各基线临床特征在两组间差异无显著统计学意义(见表1)。另外，在冠脉造影评价方面，慢血流组的TIMI-TFC均较对照组显著升高(P ＜0．001，见表1)。

表1 两组患者的基本临床特征及冠脉造影结果Table 1 Baseline characteristics and angiographic findings in two groups

2．2 两组患者血清endocan水平比较

如图1所示，慢血流组患者血清endocan水平(ng/ml)较对照组显著升高，差异有统计学意义(1．05［0．60-1．38］vs 0．74［0．52-1．01］，P=0．001)。

图1 两组的血清endocan水平Figure 1 Serum endocan levels in the two groups

2．3 各变量与合并慢血流的独立相关性

多元Logistic逐步回归分析显示，在排除各潜在的混杂因素的干扰后，高血清endocan水平是冠脉慢血流发病的独立危险因子(优势比2．312，95%CI 1．329-4．019;P=0．003，见表 2)。

2．4 血清endocan水平与平均TFC的相关性

在慢血流人群中，我们进一步评价了血清endocan水平与平均TFC的关系，Spearman相关分析结果显示，血清endocan水平与平均TFC的关系呈显著正相关(r=0．311，P=0．004;见图 2)。为了进一步排除混杂因素的干扰，我们进行了多元线性回归分析，结果显示，血清endocan水平与平均TFC具有独立相关性(t=2．872，P=0．005)。

3 讨论

随着对CSF重要性认识的不断深入，预测CSF的发生发展并尽早进行干预已经是一个重要的临床课题。虽然冠脉造影是诊断CSF的金标准，但因冠脉造影花费较高且具有有创性，故其在临床大规模的普及应用仍然受到一定程度的限制。血清生物学标记物检查因取材方便、无创、易于被患者接受及价格低廉等优点，在疾病的发病预测和风险评估中发挥着越来越重要的作用。

疾病生物标志物的发现建立在对疾病发病机制的认识之上，虽然CSF被认为与男性、吸烟及肥胖等因素密切相关［10］，但本研究结果显示，CSF组与对照组人群在性别比例、吸烟比例及BMI等方面无显著性差异，这与Canga等［11］的研究结果一致。虽然也有研究表明CSF可能与血管局部的炎症反应存在一定相关性［12］，在本研究中，反映炎症反应程度的hs-CRP在CSF组也较在对照组显著升高，但多元Logistic回归结果显示hs-CRP水平与CSF并不具备独立相关性。因此，除了CSF传统的危险因素外，我们还要积极寻找新的危险因子。

表2 多元Logistic回归分析Table 2 Multiple logistic regression analysis

图2 血清endocan水平与平均TFC的相关性Figure 2 Correlation between serum endocan level and mean TFC

Endocan是一种可溶性硫酸软骨素糖蛋白，与大多数糖蛋白一样，endocan可以通过其特有的结构域特异性地结合下游的活性分子，广泛参与细胞的增殖、分化、迁移、黏附等病理生理过程［8］。近年来的研究表明，内皮细胞表达的endocan可以激活血管细胞黏附分子-1、细胞间黏附分子-1及E-选择素等黏附分子，导致炎症因子在内皮细胞表面聚集，从而导致内皮功能不全的发生［13］。而近年来的临床研究也证明血清endocan水平升高与多种血管内皮功能不全相关性疾病如高血压、冠心病及慢性肾功能不全等的发病存在相关性［14-16］。与上述研究一致，本研究发现，CSF患者血清endocan水平较对照者明显升高，而且在进一步的多元Logistic回归分析中我们发现，升高的血清endocan水平是CSF发病的独立危险因子，这表明endocan可以成为预测CSF发生风险的生物标记物。

我们进一步评价了血清endocan水平与CSF患者平均TFC的相关性，研究结果显示，血清endocan水平与CSF患者的冠脉平均TFC呈正相关，在通过多元线性回归分析排除了各种潜在混杂因素干扰后，这种正相关仍然具有统计学意义。因为平均TFC是评价CSF严重程度的重要指标，因此，这一研究结果提示血清endocan水平检测同样可能用来对CSF患者进行危险分层。

总之，血清endocan水平是冠脉慢血流独立预测危险因子，与冠脉慢血流的严重程度存在正相关，这提示endocan可能成为预测冠脉慢血流发生风险的生物标记物，血清endocan水平检测应进一步研究是否能用来对CSF患者进行危险分层。上述研究结论需要大样本、前瞻性、随机对照研究确定。

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