紫薇花的抗氧化活性研究

孔祥密，崔雪靖，常美芳，康文艺

河南大学中药研究所，开封 475004

紫薇(Lagerstroemia indica L.)为千屈菜科紫薇属落叶灌木或小乔木，广泛分布于我国华南、华中、华东、华北和西南诸省［1］。紫薇的叶、花、根、果实、枝和皮均有药用价值［2］。其根、皮、叶可入药，具有清热解毒、活血止血的功效［3］。紫薇属化学成分主要有鞣质类、鞣花酸类、萜类、生物碱类、黄酮类、木脂素类、香豆素及蒽醌等［4］。目前，对紫薇的研究多集中于栽培管理、生理、药用方面［5，6］，陈林等［7］采用DPPH 和FRAP 方法对大叶紫薇叶的提取物进行了抗氧化性能的研究，发现大叶紫薇叶甲醇提取物在猪肉中具有明显的抗脂质氧化和防腐保鲜的作用。

为了进一步丰富紫薇的抗氧化活性研究，笔者采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基和［2，2＇-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐］(ABTS)自由基方法及铁离子还原/抗氧化力测定(FRAP)法对同月份采摘的红花紫薇和银薇的抗氧化活性进行了综合考察，为进一步开发和利用紫薇提供了理论基础。

1 仪器、材料和试剂

1.1 主要仪器

Multiskan MK3 酶标仪(美国Thermo Electron 公司);UV-2000 型紫外可见分光光度计(上海尤尼可仪器有限公司);旋转蒸发仪(日本东京理化公司);电子天平(美国Mettler-Toledo 仪器有限公司);CS -H1 型混合器(北京博励阳科技公司)。

1.2 材料

银薇和红花紫薇于2012 年7 月采自河南大学药用植物园，经河南大学中药研究所生药教研室李昌勤教授鉴定为千屈菜科紫薇属植物紫薇(Lagerstroemia indica L.)和银薇(Lagerstroemia indica Linn.f.alba(Nichols.)Rehd)，标本存于河南大学中药研究所。

1.3 试剂

DPPH(日本东京化成工业株式会社);［2，2＇-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐］(ABTS，美国Fluka 公司);Fe3+-三吡啶三哑嗪(tripyridyl-triazine，TPTZ;比利时Acrosorganics 公司);6-羟基-2，5，7，8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸(Trolox，美国Aldrich 公司);二丁基羟基甲苯(BHT，比利时Acros organics 公司);其他试剂均为分析纯。

2 实验方法

2.1 活性成分的提取

自然干燥的紫薇花粉碎，70%乙醇浸泡，加热回流2 次，每次1 h，合并、过滤、浓缩得紫薇花70%乙醇总浸膏，提取物分散于水中，依次用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇进行萃取得各部位浸膏。

2.2 抗氧化活性的筛选

2.2.1 DPPH 方法

按照文献［8］，在515 nm 处测定样品及阳性对照的吸光度。每份样品平行操作3 次，取平均值。计算清除率及半数抑制率IC50值。

上式中，Acontrol为DPPH 本身在测定波长的吸收度，Asample为样品对DPPH 作用后的吸收度数值(除去样品自身吸收)。

2.2.2 ABTS 方法

按照文献［9］，在734 nm 处测定样品及阳性对照的吸光度。每份样品平行操作3 次，取平均值。计算清除率及半数抑制率IC50值。按照以下公式计算清除率:

式中Acontrol为ABTS 自由基本身在测定波长的吸收度，Asample为样品对ABTS 自由基作用后的吸收度数值(除去样品自身吸收)。

2.2.3 FRAP 法

按照文献［10］的方法配制TPTZ 工作液，在593 nm 处测定样品及阳性对照的吸光度，结果以Trolox当量表示。当C(Trolox)=25～400 mol/L 时，有良好的线性关系(r=0.9996)。

3 结果与分析

3.1 对DPPH 自由基的清除作用

表1 紫薇花不同提取物的抗氧化活性Table 1 Antioxidant activity of different extracts of L.indica Flower

图1 紫薇花各部位抗氧化质量浓度对ABTS 自由基的影响Fig.1 Scavenging activities of different concentrations of L.indica flowers on ABTS free radical

3.2 对ABTS 自由基的清除作用

表1 显示，银薇乙酸乙酯部位清除ABTS 自由基的能力(IC50=1.8 μg/mL)最强，强于阳性对照BHT(IC50=2.3 μg/mL)。紫薇花不同提取部位对ABTS 自由基的清除能力大小顺序为:银薇乙酸乙酯部位＞BHT ＞银薇70%乙醇总浸膏＞红花紫薇乙酸乙酯部位＞红花紫薇70%乙醇总浸膏＞银薇正丁醇部位＞红花紫薇正丁醇部位＞红花紫薇石油醚部位＞银薇石油醚部位。

图1 显示，在实验的浓度范围内，质量浓度在5.59 μg/mL 时，紫薇红花石油醚部位、正丁醇部位、70%乙醇总浸膏和银薇正丁醇部位对ABTS 自由基的清除率都较低分别为15.93%、21.21%、65.42%和54.69%。随着其质量浓度的增加，清除率也增大。当质量浓度为47.62 μg/mL 时，红花紫薇石油醚部位、正丁醇部位、70%乙醇总浸膏和银薇正丁醇部位对ABTS 自由基的清除率分别增加到93.95%、98.5%、99.03%和98.58%。说明紫薇花提取物清除ABTS 自由基的能力与其质量浓度呈正量效关系，即随着提取物用量的增加，对ABTS 自由基的清除率也增大。当质量浓度＞47.62 μg/mL 时，提取物对ABTS 自由基的清除率几乎不变，说明抗氧化作用已接近饱和，再增加提取物的用量，清除率变化不大。

3.3 还原Fe3+的能力

表1 显示，在紫薇花提取物中，银薇乙酸乙酯部位和70%乙醇总浸膏还原Fe3+的能力最强(TEAC分别为2664.7 和2414.95 μmol/g)，强于阳性对照BHT(TEAC 为1532.7 μmol/g)。紫薇花提取物及阳性对照还原Fe3+能力的顺序为:银薇乙酸乙酯部位＞银薇70%乙醇总浸膏＞BHT ＞红花紫薇乙酸乙酯部位＞红花紫薇70%乙醇总浸膏＞红花紫薇正丁醇部位＞银薇正丁醇部位＞红花紫薇石油醚部位＞银薇石油醚部位。

4 结论

本文采用DPPH、ABTS 和FRAP 3 种方法评价同月份红花紫薇和银薇的抗氧化活性，结果表明，银薇总抗氧化活性好于红花紫薇，其中，银薇乙酸乙酯部位的抗氧化活性最强(IC50分别为7.4 和1.8 μg/mL，TEAC 为2664.7 μmol/g)，远强于阳性对照BHT。紫薇花的乙酸乙酯部位抗氧化活性好于其它部位，可以作为天然抗氧化剂进行深入研究开发。

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