IL-18、IL-1β水平与非酒精性脂肪性肝病的关系

陈艳丽，张 宝，管石侠，侯丽丽，蒋建华

IL-18、IL-1β水平与非酒精性脂肪性肝病的关系

陈艳丽，张 宝，管石侠，侯丽丽，蒋建华

目的探讨血清炎症因子白细胞介素18（IL-18）、白细胞介素1β（IL-1β）与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的关系。方法选取NAFLD患者作为NAFLD组（n＝46）、正常对照者作为对照组（n＝45），对被选人群进行问卷调查、体格测量、人体成分分析及肝脏超声检查。收集其体检报告。ELISA法检测血清IL-18、IL-1β。结果NAFLD组体质指数（BMI）、内脏脂肪面积、体脂百分比、腰臀百分比、白细胞计数、中性粒细胞绝对数、淋巴细胞计数、空腹血糖、三酰甘油（TG）、极低密度脂蛋白、谷丙转氨酶、血尿酸及IL-18、IL-1β均明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。同时，相关分析显示血清IL-18及IL-1β水平与BMI、TG均有相关性。结论 在NAFLD患者血清中炎症因子IL-18、IL-1β均明显升高，IL-18、IL-1β参与的慢性炎症反应可能是NAFLD的病因之一。

非酒精性脂肪性肝病；白细胞介素18；白细胞介素1β

非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）被定义为在无过度饮酒情况下，肝脏脂肪堆积［1］，其疾病谱包括单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholicsteatohepatitis，NASH）及与之相关的肝硬化［2］。NAFLD与肥胖、2型糖尿病关系密切，现在大多认为NAFLD是代谢综合征的一部分，共同的病理机制是胰岛素抵抗和系统性炎症［3］。炎症小体是病原相关分子模式及损伤相关分子模式的内源性或外源性的感受器，切割促炎因子如白细胞介素18（interleukin-18，IL-18）和白介素1β（interleukin-1β，IL-1β）的前体［4］。IL-18是T细胞介导肝损伤的必须媒介，由于IL-18在分泌γ-干扰素的同时产生大量的肿瘤坏死因子α、白介素6等细胞因子加剧了免疫功能和代谢紊乱，在肝损伤中起着重要作用［5］。IL-1β可通过促进胰岛β细胞的一氧化氮生成和细胞凋亡而引起β细胞选择性的破坏，诱导胰岛素抵抗。白介素家族已被许多实验证实可以影响胰岛素、血糖代谢及调节代谢障碍。该研究通过检测NAFLD人群IL-18、IL-1β炎症标志物水平，探讨IL-18、IL-1β与NAFLD之间的关系。

1 材料与方法

1.1 病例资料选择2013年7月在安徽医科大学第一附属医院体检中心健康体检人群符合NAFLD的诊断标准的46例NAFLD患者为NAFLD组，以同期同一单位体检正常者45例作为对照组。NAFLD人群均符合中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组2010年修订的《非酒精性脂肪性肝病诊断标准》［6］。入选对象均排除病毒性肝炎及其他肝脏疾病、严重心脑肾疾病、严重感染、肿瘤和长期服药史。对照组男28例，女17例，年龄41～71（51.68±8.40）岁；NAFLD组男30例，女16例，年龄41～71（52.10±8.60）岁。各组在年龄、性别比例等方面差异无统计学意义，组间均衡性好，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1问卷调查 采用自行设计的健康状况调查表对研究对象进行面对面调查，内容包括一般信息、生活方式、疾病史等，由调查员填写问卷。

1.2.2一般指标检测 所有受试者在清晨空腹进行体格检查，由经过培训的工作人员测量身高、体重、收缩压（systolic blood pressure，SBP）、舒张压（diastolic blood pressure，DBP）。

1.2.3人体成分指标 采用韩国Biospace Inbody 720人体成分分析仪进行人体成分检测，记录相关指标，包括体质指数（body mass index，BMI）、内脏脂肪面积（visceral fat area，VFA）、体脂百分比（percent body fat，PBF）、腰臀比（waist-hip ratio，WHR）。其中WHR指腰与臀之间的周长比率，通常用来判断腹部肥胖，因为与其密切相关。女性WHR≥0.85、男性WHR≥0.90时可判断为腹部肥胖；VFA用来判断腹部内脏脂肪的横截面积，内脏脂肪的增加意味着肥胖和身体老化，尤其会增加生活习惯性疾病的发病率。

1.2.4生化指标检测 ①所有研究对象清晨空腹采静脉血，分离血清。血液细胞计数采用日本Sysmex公司XE-2100五分类全自动血细胞分析仪测定白细胞计数（white blood cell，WBC）、中性粒细胞绝对数（absolute neutrophil count，NEUT）、淋巴细胞绝对数（absolute lymphocyte count，LYMP），血液生化检查采用Roche公司日立-7600型生化仪测定空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）、三酰甘油（triglycerides，TG）、谷丙转氨酶（alanine transaminase，ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、极低密度脂蛋白（very low density lipoprotein，VLDL）、血尿酸（blood uric acid，UA）。②IL-18和IL-1β使用ELISA试剂盒（苏州卡尔文生物科技有限公司R＆D分装）测定，严格按照说明书操作。用Bio-Tek酶标仪在450 nm波长下读取各孔吸光度值，并根据绘制的标准曲线计算出相应的浓度。

1.3 统计学处理采用SPSS 16.0统计软件进行分析，数据以±s表示。两组间比较采用t检验，检验水准α＝0.05。相关分析采用Pearson直线相关分析。

2 结果

2.1 两组人群基本指标及人体成分指标比较比较两组人体成分、血压指标，两组DBP差异无统计学意义；而NAFLD组的SBP、BMI、VFA、PBF、WHR显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01），见表1。

表1 两组研究对象基本指标及人体成分指标比较（±s）

表1 两组研究对象基本指标及人体成分指标比较（±s）

与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01

2.2 两组研究对象血液指标比较两组人群的TC、AST方面差异均无统计学意义；而NAFLD组的WBC、FPG、VLDL、ALT、UA均显著高于对照组（P＜0.01），NEUT、LYMP、TG也明显高于对照组（P＜ 0.05），差异有统计学意义。见表2。

表2 两组研究对象血液指标比较（±s）

表2 两组研究对象血液指标比较（±s）

与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01

2.3 IL-18和IL-1β浓度比较血清IL-18、IL-1β浓度在NAFLD组［（121.01±39.61）、（23.78± 9.40）pg／ml］均明显高于对照组［（98.08± 40.10）、（19.06±9.42）pg／ml］，差异有统计学意义（t＝－2.550、－2.307，P＝0.013、0.024）。

2.4 相关性分析NAFLD组IL-18与BMI、TG呈正相关性（r＝0.361、0.372，P＜0.05），见图1、2。IL-1β与BMI、TG呈正相关性（r＝0.345、0.465，P＜0.05），见图3、4。

3 讨论

本研究结果显示，NAFLD组人群BMI、PBF、WHR、VFA均明显高于对照组，说明肥胖程度高于对照组，特别是腹型肥胖尤为明显。研究［7］表明超质量、Ⅰ度肥胖、Ⅱ度肥胖组与正常质量组相比，脂肪肝患病风险分别增加了1.7、1.9、9.1倍，脂肪肝组较非脂肪肝组超质量或肥胖检出率显著增高。Caballería et al［8］发现肥胖个体高达25.2%，将超重者计入可达69.2%；其中46.1%的肥胖者和25.8%的超重者患有NAFLD，这些因素与该疾病密切相关（与正常体重者相比，超重及肥胖者与NAFLD发病的OR值分别为2.19、6.78）。但经多分类协变量分析显示差异无统计学意义，其原因可能是肥胖的程度与脂肪肝无密切关系，但肥胖相关代谢紊乱的程度与脂肪肝的发生密切相关［7］。

NAFLD组的TG、ALT、VLDL升高明显，可能是由于肥胖者体内脂肪组织增多，体内脂肪酸和游离脂肪酸释出增加，肝脏脂肪氧化磷酸化和脂肪酸β氧化受损使脂肪酸分解下降，TG合成增多集聚肝脏形成脂肪肝。肝内TG的合成速度超过VLDL的合成及泌入血液的速度时，便出现TG的堆积［9］，并促使肝脏合成VLDL增加，最终导致肝功能异常。

慢性炎症和氧化应激在NAFLD起着重要的作用。WBC在临床实践中是一个简单经济的炎症标志物。本研究显示，WBC、NEUT、LYMP在NAFLD组较对照组显著增加，表明NAFLD患者体内炎症活动性可能增强。有研究［10］表明NAFLD组的WBC、NEVT、LYMP显著高于对照组，同时Lee et al［11］认为慢性低度系统炎症表现为WBC的高水平是非酒精性脂肪性肝病的独立危险因素。Alkhouri et al［12］证实WBC／LYMP可作为NASH患者疾病严重程度的新的非侵入性标记。

IL-18和IL-1β是重要的炎症细胞因子，在机体的免疫和炎症反应中发挥着重要的作用。IL-18是重要的参与炎症反应的前炎症细胞因子，可通过激活单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和内皮细胞产生，在自身免疫性疾病、炎症及感染性疾病中起重要作用。研究［13］表明，与正常组相比，血清IL-18在肝硬化、NAFLD及NASH患者分别是其7.5、8、16倍。有研究［14］表明多囊卵巢综合征患者IL-18、IL-1β显著高于对照组，与BMI呈正相关性。研究［5］显示IL-18与TG呈正相关性。有研究［15］表明糖尿病组血清IL-1β与BMI、TG呈正相关性。本研究结果与上述基本一致。IL-1β参与慢性炎症的发生、发展，由以上研究推测非NAFLD的发生同样有IL-1β的参与。同时NAFLD与肥胖之间的炎症反应关系相互作用，有待进一步的研究。

综上所述，IL-18、IL-1β在NAFLD发病机制中可能起重要作用，但之间的相互作用机制有待进一步研究。通过血清IL-18、IL-1β浓度的变化，从侧面反映NAFLD患者肝损伤的程度，对判断NAFLD的进展及预后有一定价值。

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Study on the correlation between interleukin-18，interleukin-1β and nonalcoholic fatty liver disease

Chen Yanli，Zhang Bao，Guan Shixia，et al
（Dept of Clinical Nutriology，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei 230022）

ObjectiveTo investigate the relationship of the serum levels of interleukin-18（IL-18），interleukin-1β（IL-1β）with pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease（NAFLD）.Methods46 cases of NAFLD patients，45 cases of normal controls were selected，questionnaire survey，physical measurement，body composition and liver ultrasound were conducted for selected population.Collect the physical examination report，serum levels of IL-18 and IL-1β were examined by ELISA.ResultsThe body mass index（BMI），visceral fat area，percent body fat，waist-hip ratio，white blood cell，absolute neutrophil count，absolute lymphocyte count，fasting plasma glucose，triglycerides（TG），very low density lipoprotein，alanine transaminase and blood uric acid，serum levels of IL-18 and IL-1β were significantly higher in NAFLD group than in control group（P＜0.05），with statistical significance.The correlative analysis showed that the serum levels of IL-18 and IL-1β were correlated with body mass index and triglycerides.ConclusionSerum levels of IL-18 and IL-1β in NAFLD group are higher than those in control group，IL-18 and IL-1β participating in chronic inflammation may be one of the causes of NAFLD.

nonalcoholic fatty liver disease；interleukin-18；interleukin-1β

R 589.2

1000－1492（2015）02－0181－04

2014－10－23接收

安徽省年度科研项目（编号：1301043019）

安徽医科大学第一附属医院临床营养科，合肥 230022作者简介：陈艳丽，女，硕士研究生；蒋建华，女，主任医师，副教授，硕士生导师，责任作者，E-mail：Jjhua＠yeah.net