番石榴叶调节小鼠血糖血脂作用的研究

张玉英 陈艳芬 杨超燕 李书渊 唐春萍 陶曙红 曾昭智

【摘要】 目的：研究番石榴叶对实验性糖尿病小鼠和高脂血症小鼠的影响。方法：采用链脲佐菌素复制糖尿病小鼠模型，观察番石榴叶对小鼠空腹血糖和糖耐量的影响;采用脂肪乳剂灌胃建立高血脂小鼠模型，观察番石榴叶对小鼠血脂水平及肝脏指数的影响。结果：番石榴叶高、低剂量（10g/kg、5g/kg）均能明显降低糖尿病小鼠空腹血糖，改善其糖耐量，也能明显调节高脂血症小鼠的血脂水平，高剂量还能降低高脂血症小鼠的肝脏指数。结论：番石榴叶有明显的降糖和调脂作用，为其临床应用和研究开发提供实验依据。

【关键词】番石榴叶;血糖;血脂;小鼠

【中图分类号】R2855【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）01-0014-03

Study on effects of Psidium guajava leaves on blood sugar and blood lipid in mice

ZHANG Yuying1，CHEN Yanfen2*，YANG Chaoyan2，LI Shuyuan2，TANG Chunping2，

JIANG Tao2，TAO Shuhong2，ZENG zhaozhi3

1. School of basic，Guangdong Pharmaceutical University，

2.School of Traditional Chinese Medicine，Guangdong Pharmaceutical University，

3.Animal experiment center，Guangdong Pharmaceutical University， Guangzhou 510006，China

Abstract：objective： t to study the effects of  Psidium guajava leaves on blood sugar and blood lipid in mice. methods：The diabetes mice model induced by  intraperitoneal injection of  streptozocin was used to observed the effects of Psidium guajava leaves on fasting blood glucose， sugar tolerance and AUC; The hyperlipidemic  mice model by gavage with fat emulsion was used to observed the effects of Psidium guajava leaves on blood lipid and liver index. Results： Both high dose group（10g/kg ）and low dose group（5g/kg）of gavage can regulate the fasting blood glucose， sugar tolerance of diabetes mice and blood lipid of hyperlipidemic mice; high dose group can reduce liver index of hyperlipidemic mice. Conclusions： Psidium guajava leaves have the effects to regulate blood sugar and blood lipid of mice

Keywords：Psidium guajava leaves， blood glucose， blood lipid，mice

番石榴（Psidium guajava L）是桃金娘科（Myrtaceae）番石榴属植物，又叫芭乐、鸡屎果、喇叭果等，是我国南方地区的常见水果，在广东、广西、海南、台湾等地都有野生和人工栽培。《全国中草药汇编》记载：番石榴药用价值高，可防治高血压、糖尿病。番石榴叶为番石榴的干燥叶及带叶嫩枝。中医学认为：番石榴叶性平，味甘涩，入脾、胃、大肠、肝经等，且具有生津止渴、除烦、止痒、收敛止泻，消炎止血等功效[1]。现代研究表明，番石榴叶的主要化学成分有黄酮类、鞣质类、三萜类等[2]，具有降血糖[3]、抗氧化[4]、抗病毒[5]抗菌[6]等药理作用。本实验通过建立小鼠糖尿病模型和高脂血症模型，分别观察番石榴叶对血糖和血脂的影响，为本品的临床应用和中药防治代谢综合征新药研究开发提供科学依据。

1材料与仪器

11实验动物雄性SPF级昆明种小鼠，体重18～22g/只，广东省医学实验动物中心提供，许可证号：SCXK（粤）2008-0002，适应性喂养3天后供试。

12药物与试剂番石榴叶流浸膏（1g生药/ml），由广东药学院中药鉴定教研室李书渊教授提供;格列齐特片，深圳海王药业有限公司，批号：20101201;血脂康胶囊：北京大维信生物科技有限公司，批号：20110510。

高血脂模型脂肪乳剂的制备：10%胆固醇、20%猪油、2%脱氧胆酸钠、1%丙硫氧嘧啶、5%吐温-80、蒸馏水按一定比例配制，用前37℃水浴融化。葡萄糖检测试剂盒，上海科欣生物技术研究所，批号：20110701。血脂各指标检测试剂盒为中生北控生物科技股份有限公司产品，总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）测定试剂盒批号分别为：121321，114961，110431，110441。

13实验仪器UV-1800型紫外可见分光光度计，北京瑞利分析仪器公司。

2实验方法

21对链脲佐菌素糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影响随机选择12只小鼠注射生理盐水作为正常对照组，其余小鼠按150mg/kg腹腔注射01mol/L的链脲佐菌素（STZ）溶液，72h后（空腹12h），乙醚麻醉小鼠，经眼底静脉丛取血，离心取上清，检测血糖值。选择空腹血糖≥111mmol/L的小鼠48只为糖尿病模型小鼠，随机分成4组：模型组，格列齐特片阳性对照组（32mg/kg），番石榴叶高剂量组（10g/kg）、番石榴叶低剂量组（5g/kg），每组12只。正常对照组及模型组予以等体积的蒸馏水（20ml/kg），其余各组分别灌胃给药，每天1次，持续14天。末次给药后禁食12h，每只小鼠取少量血后，灌胃5%葡萄糖溶液（20ml/kg），然后分别于灌胃后的30min，60min，120min四个时间点眼底静脉丛取血，测血糖值，并计算血糖曲线下面积（AUC）。

AUC计算方法：mmolh/L=（A+B）×15/60+（B+C）×15/60+（C+D）×30/60（A、B、C、D分别为0、30、60、120min血糖值）。

22对高脂血症小鼠血脂水平的影响取小鼠60只，随机分成5组：正常对照组、高脂血症模型组、血脂康胶囊阳性对照组（04g/kg）、番石榴叶高剂量组（10g/kg）、番石榴叶低剂量组（5g/kg）。除正常对照组外，其余各组每天上午用脂肪乳剂灌胃（20ml/kg），下午再分别以不同药物灌胃，连续进行14d。末次灌胃后，禁食12h后眼底静脉丛取血，离心分离血清，采用试剂盒分别检测TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。解剖取肝脏称重，计算小鼠肝脏指数（肝脏指数=肝重量/体重×100）。

23统计学处理所有数据以均数±标准差（x±s） 表示，采用 SPSS 130统计软件分析处理，组间比较采用单因素方差分析，以P<005 表示差异有统计学意义。

3结果

31对糖尿病小鼠血糖和糖耐量的影响结果见表1。模型组小鼠的空腹血糖与正常组比较显著升高（P<001），灌胃葡萄糖后，小鼠血糖先升高后逐步下降，但各时间点血糖值与正常组比较差异仍具有统计学意义，提示糖尿病模型造模成功。格列齐特组、番石榴叶高剂量组与模型组相比空腹血糖显著降低（P<001），番石榴叶低剂量组也明显降低（P<005）。给糖负荷后30min、60min、90min，番石榴叶高剂量组与模型组比较，均可显著降低小鼠血糖（P<001或P<005）;番石榴叶低剂量组只在30min时差异具有统计学意义。通过计算各组AUC发现，格列齐特组、番石榴叶高剂量、低剂量组的AUC均明显低于模型组（P<001）。

表1番石榴叶对糖尿病小鼠空腹血糖和糖耐量的影响（x±s，n=12）

组别剂量（g/kg）

血糖值（mmol/L）

0min30min60min120minAUC（mmolh/L）

正常组-584±190763±241629±171522±1171265±234

模型组-1668±527▲▲2367±834▲▲2015±875▲▲1871±794▲▲4658±1338▲▲

格列齐特32mg/kg1049±445**1695±554*1324±228*1320±3392994±367**

番石榴-高10722±121**1328±151**1233±306*1186±225*2360±306**

番石榴-低51107±235*1439±378*1386± 6611327±8312597±267**

与正常组比较，▲▲P<001;与模型组比较，* P<005，**P<001

表 2番石榴叶对高脂血症小鼠TC、TG、HDL-C和LDL-C的影响（x±s，n=12）

组别剂 量（g/kg）TC（mmol/L）TG（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-（mmol/L）

正常组-256±070098±019318±063044±025

模型组- 326±067*126±032*193±061**081±033**

血脂康组04271±046△099±026△263±080△055±017△

番石榴叶-高10256±076△092±024△△255±086△056±018△

番石榴叶-低5266±060△093±020△△243±069077±020

与正常组比较，* P<005，**P<001;与模型组比较，△ P<05，△△P<001

32对高脂血症小鼠血脂水平和肝脏指数的影响从表2看出，模型组与正常对照组比较，TC 、TG与LDL-C明显升高 （P<005或P<001），HDL-C明显降低（P<001），提示通过灌胃脂肪乳剂高血脂小鼠模型造模成功。与模型对照组相比，番石榴叶高剂量组和血脂康组TG、TC和LDC-C水平明显下降，HDL-C水平显著升高（P<005或P<001）。番石榴叶低剂量组TG和TC水平显著降低（P<005或P<001）。临床上高血脂是导致脂肪肝的重要原因，表3结果显示，与正常对照组比较，模型组的肝指数明显增高（P<005），提示该模型可导致肝脏重量增加，而番石榴叶高剂量组、血脂康组与模型组比较，肝指数明显下降（P<005），提示它们可能具有通过降低血脂而发挥防治脂肪肝的作用。

表3番石榴叶对高脂血症小鼠肝指数-的影响（x±s，n=12）

组   别剂 量（g/kg）肝指数

正常组-415±025

模型组-449±032*

血脂康组04416±042△

番石榴叶-高10415±037△

番石榴叶-低5432±092

与正常组比较，* P﹤005，**  P﹤001与模型组比较，△ P﹤005，△△ P﹤001

4讨论

随着人们生活水平提高，饮食热量摄入过多、体力劳动减轻及心理应激增加，代谢综合症（MS）的发病率呈明显上升趋势。MS是以中心性肥胖、高血脂、高血糖和高血压为特征的一组综合症。其中，高脂血症是动脉粥样硬化、冠心病和心肌梗死、心脏猝死等心脑血管疾病及脂肪肝的物质基础和主要危险因素。据世界卫生组织（WHO）预测目前全世界患MS约有2亿人，在一些老年群体中甚至高达50%[7]。我国18岁以上人群MS的患病率高达66%[8]。因此，MS已经成为当今社会重大的公共卫生问题，对MS的防治研究成为我国疾病控制的重要内容之一。目前，市售西药虽见效快，但对肝、肾等脏器损害较大，而纯天然植物提取类药物作用温和、毒副作用较轻，开发利用潜力大。

以往对番石榴叶的研究主要集中在降血糖作用上，研究表明番石榴叶通过降低血糖[9]、改善胰岛功能[10]来改善糖代谢紊乱。本实验结果也证实番石榴叶流浸膏能显著降低小鼠空腹血糖，改善糖耐量，且有一定的剂量依赖性，提示民间将该药及果实用于防治糖尿病有一定的依据。关于番石榴叶对血脂的调节作用国内鲜有报道，仅有个别研究者在糖尿病模型上做了观察，如王婧茹等[3]研究发现番石榴叶总三萜可显著降低糖尿病大鼠TC、TG及FFA水平。本实验通过复制小鼠高脂血症模型，观察番石榴叶对血脂的影响，结果显示番石榴叶流浸膏高剂量能显著降低高血脂小鼠TC、TG及LDL-C水平，升高HDL-C，并且降低肝指数;低剂量组也能降低TC和TG。

综上所述，番石榴叶有明显的降血糖和调血脂的作用，这些作用可能与其所含的黄酮类成分等有关。番石榴叶资源较为丰富，进一步深入研究其药理作用和物质基础，对于番石榴叶的有效开发利用以及中药防治代谢综合症研究具有深远的意义。

参考文献

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[2] 徐鸿华.中草药彩图手册（一）[M].广州：广东科技出版社.2003：124-124.

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[5] 张文举，陈宝田，朱全红，陈国宝 魏练波 熊波.番石榴叶中提取的槲皮素和2α-羟基熊果酸体外抗人轮状病毒作用[J].中草药.2005，36（1）：76-79.

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[10] 马山， 崔荣军， 郭尚福， 等.番石榴叶对 2 型糖尿病大鼠血糖的影响[J]. 牡丹江医学院学报， 2007，28（6）： 20-22

（收稿日期：20131028）