1～21日龄快大型黄羽肉鸡低蛋白质饲粮氨基酸平衡模式

林厦菁 蒋守群 丁发源 郑春田 洪 平

(广东省农业科学院动物科学研究所，畜禽育种国家重点实验室，农业部(华南)动物营养与饲料重点实验室，广东省动物育种与营养公共实验室，广东省畜禽育种与营养研究重点实验室，广州 510640)

大量研究表明，饲粮蛋白质利用效率主要取决于必需氨基酸的比例和平衡关系，于是国内外学者就提出了理想氨基酸平衡模式(ideal amino acid pattern，IAAP)这 个 概 念［1］。目 前 对 禽 类IAAP的研究方法主要有3种:生产性能相关性分析法即生长家禽对饲粮中各种氨基酸需要量与机体组织器官中氨基酸的含量以及各组织器官的相对生长有关;研究单个氨基酸需要量来建立起与其他氨基酸的比例关系;氮平衡试验法，它是检验和评定动物饲粮氨基酸模型的平衡程度及利用效率的公认较理想的方法，NRC提出的IAAP就是利用该方法建立的［2］。IAAP的意义在于可以根据已建立的IAAP来预测各种氨基酸的需要量并制定出合理的营养配方［3］，同时使用IAAP能够精确达到饲粮对动物体的养分供给和需要的平衡，从而降低动物体含氮废物的排泄量［4］，并且使用IAAP可以降低饲粮中粗蛋白质的含量［5］，有利于缓解蛋白质资源浪费。已有一些科研人员对于猪、禽的低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮进行研究［6-8］。目前快大型黄羽肉鸡的市场占有率达到50%，并有越来越高的趋势，但针对快大型黄羽肉鸡IAAP还未见报道。本试验通过研究5种氨基酸平衡模式及低蛋白质饲粮对黄羽肉鸡生产性能、氮和氨基酸存留率、血浆生化指标的影响，旨在建立黄羽肉鸡低蛋白质饲粮氨基酸平衡模式，为制订黄羽肉鸡饲养标准奠定基础，也为合理利用蛋白质资源提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物与试验设计

选用1日龄健康的快大型黄羽肉鸡公雏252只，根据体重相近原则，随机分为7个组，每个组6个重复，每个重复6只鸡。对照(SD)组粗蛋白质和氨基酸含量均符合饲养标准需要量;低蛋白质(LP)组粗蛋白质含量降低3%，添加赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)、苏氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)和异亮氨酸(Ile)，使其必需氨基酸含量与对照组相同;低蛋白质-赖氨酸(LP-Lys)组为在低蛋白质组基础上，将添加的赖氨酸含量降低20%，其他氨基酸含量不变;低蛋白质-蛋氨酸(LP-Met)组在低蛋白质组基础上，将添加的蛋氨酸含量降低20%，其他氨基酸含量不变;低蛋白质-苏氨酸(LP-Thr)组、低蛋白质-色氨酸(LP-Trp)组和低蛋白质-异亮氨酸(LP-Ile)组依此类推，相应氨基酸依次降低20%。具体各组氨基酸含量及比例见表1。

表1 各组氨基酸含量及比例Table 1 Amino acid content and ratio in different groups %

1.2 试验饲粮

试验采用玉米-豆粕-玉米蛋白粉型饲粮，各组饲粮中粗蛋白质和赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、异亮氨酸含量按照试验设计水平确定，其他营养成分均参考我国《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)，参照《中国饲料成分及营养价值表》(第15版)和实测值设计饲粮配方，具体试验饲粮组成及营养水平见表2。

表2 试验饲粮组成及营养水平(饲喂基础)Table 2 Composition and nutrients levels of experimental diets(as-fed basis) %

1.3 饲养管理

试验用鸡采用代谢笼饲养(1笼1只鸡)，试验期间自由采食颗粒料和饮水，其他按常规饲养操作规程进行。试验期21 d。

1.4 测定指标

1.4.1 生产性能

试验开始和结束(21日龄)前1天22:00断料供水，次日08:00，以重复为单位进行称重、称剩料量，统计耗料量，计算平均日增重、平均日采食量和料重比。试验过程中每日观察记录鸡只的健康状况、采食与排泄物情况。

1.4.2 血浆生化指标

在试验结束时，即试鸡21日龄，试鸡称重后从每个重复选取接近平均体重的2只鸡，用抗凝管采血4～5 mL，3 000 r/min离心15 min后取上清液，放置于-20℃下冷冻保存。用全自动生化仪(美国，SpectraMax M5)测定血浆尿酸、总蛋白、白蛋白、尿素氮含量，具体检测方法参照试剂盒说明书进行，检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。血浆中游离氨基酸含量测定:准确取血浆样品1 mL于5 mL离心管中，按1∶3比例加入10%磺基水杨酸溶液，振荡摇匀，将离心管于离心机12 000 r/min离心 15 min，取上清液 1 mL，0.22μM滤膜过滤，用全自动氨基酸分析仪(日本，HITACHI/L-8900)进行检测。

1.4.3 氮平衡试验

试鸡17日龄时，将所有试鸡肛门周围的羽毛剪去，防止其掉落影响粪便中氮含量检测结果。试鸡18日龄时，以每个重复为单位，准确记录每日采食量，同时每天及时准确收集粪盘里的全部排泄物，用镊子挑出皮屑及羽毛等非粪便物质后，将排泄物刮入洁净、干燥、并已称重作好标记的培养皿中，及时盖好盖子密封保存，连续收集96 h粪样，然后对湿粪便排泄物进行称重记录，在收集的排泄物中，按每100 g鲜粪加10%的盐酸溶液10 mL以固定挥发氮，置入65～70℃的烘箱中烘至发脆，取出在室温下回潮24 h后恒重记录作为每个重复鸡的4 d平均风干排泄物总量(g/只)。将风干排泄物粉碎并过40目筛，装袋，并立即取样测定其中水分含量，以计算干物质含量，从而计算每个重复鸡只的4 d平均全干排泄物量(g/只)。剩下样品于-20℃冰箱保存。干物质和粗蛋白质含量的测定分别参照GB 6435—1986和GB/T 6432—1994推荐的方法，每个样品测定2个重复样，以平均值作为测定结果。

排泄物中游离氨基酸含量测定方法同血浆氨基酸含量检测。计算公式如下:

1.5 数据统计分析

试验数据用SPSS 17.0进行方差分析(oneway ANOVA)和多重比较(Duncan)。各组试验数据均以平均值±标准误表示，并以P＜0.05为差异显著性标准。

2 结果与分析

2.1 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡生产性能的影响

由表3可见，各组与对照组相比平均日增重、平均日采食量、料重比均无显著差异(P＞0.05)，其中低蛋白质-赖氨酸组平均日增重最高，料重比最低。

2.2 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡氮排泄量、氮和氨基酸的存留率的影响

由表4、表5可见，各组与对照组相比，排泄物重量无显著差异(P＞0.05)，其中低蛋白质-赖氨酸组排泄物重量最低。所有组排泄物中氮含量显著低于对照组(P＜0.05)。低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-苏氨酸组氮存留率显著高于对照组(P＜0.05)，其他组与对照组无显著差异(P＞0.05)。所有组赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸存留率均显著高于对照组(P＜0.05)，其中低蛋白质-异亮氨酸组的赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸存留率最高。低蛋白质-异亮氨酸组蛋氨酸、精氨酸存留率显著高于对照组(P＜0.05)。低蛋白质组、低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-色氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组及低蛋白质-苏氨酸组的苏氨酸、亮氨酸、酪氨酸存留率显著高于对照组(P＜0.05)，其中低蛋白质-异亮氨酸组苏氨酸、亮氨酸、酪氨酸存留率最高。

2.3 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡排泄物中各种游离氨基酸含量的影响

由表6可见，低蛋白质-苏氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组排泄物中苏氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。所有组排泄物中丝氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05);低蛋白质组、低蛋白质-色氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组和低蛋白质-苏氨酸组排泄物中甘氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。低蛋白质-异亮氨酸组排泄物中蛋氨酸、精氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05);低蛋白质组、低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-色氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组排泄物中异亮氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。低蛋白质组、低蛋白质-异亮氨酸组排泄物中脯氨酸、酪氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组排泄物中赖氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。

表3 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡生产性能的影响Table 3 Effects of low protein diet with amino acid balance pattern on performance of fast-growing yellow-feathered broilers

表4 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡排泄物重量、排泄物中氮含量和氮存留率的影响Table 4 Effects of low protein diet with amino acid balance pattern on feces output，nitrogen content of feces and nitrogen retention of fast-growing yellow-feathered broilers

2.4 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡血浆生化指标及其中游离氨基酸含量的影响

2.4.1 血浆生化指标

由表7可见，低蛋白质-蛋氨酸组、低蛋白质-色氨酸组血浆总蛋白含量显著低于对照组(P＜0.05)，与其他组无显著差异(P＞0.05)。低蛋白质-蛋氨酸组血浆白蛋白含量显著低于对照组、低蛋白质组、低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-苏氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组(P＜0.05)。低蛋白质-赖氨酸组血浆尿素氮含量与对照组无显著差异(P＞0.05)，低蛋白质组、低蛋白质-蛋氨酸组、低蛋白质-苏氨酸组、低蛋白质-色氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组血浆尿素氮含量显著高于对照组(P＜0.05)。各组与对照组相比血浆尿酸含量无显著差异(P＞0.05)。

表5 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡氨基酸存留率的影响Table 5 Effects of low protein diet with amino acid balance pattern on amino acid retention of fast-growing yellow-feathered broilers %

表6 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡排泄物中各种游离氨基酸含量的影响Table 6 Effects of low protein diet with amino acid balance pattern on free amino acid contents in feces of fast-growing yellow-feathered broilers mg/g

2.4.2 血浆中游离氨基酸含量

由表8可见，低蛋白质组、低蛋白质-蛋氨酸组、低蛋白质-色氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组血浆赖氨酸含量显著高于对照组(P＜0.05)，低蛋白质-赖氨酸组血浆赖氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。各组血浆蛋氨酸、缬氨酸、组氨酸、精氨酸、半胱氨酸含量与对照组均无显著差异(P＞0.05)。低蛋白质组、低蛋白质-蛋氨酸组、低蛋白质-色氨酸组、低蛋白质-异亮氨酸组血浆苏氨酸含量显著高于对照组(P＜0.05)，低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-苏氨酸组血浆苏氨酸含量与对照组差异不显著(P＞0.05)。低蛋白质-赖氨酸组血浆异亮氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。低蛋白质-色氨酸组血浆丝氨酸含量显著高于对照组(P＜0.05)，对照组与其他组无显著差异(P＞0.05)。低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-苏氨酸组血浆甘氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-蛋氨酸组、低蛋白质-苏氨酸组血浆亮氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。低蛋白质-赖氨酸组、低蛋白质-苏氨酸组血浆苯丙氨酸含量显著低于对照组(P＜0.05)。

表7 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡血浆生化指标的影响Table 7 Effects of low protein diet with amino acid balance pattern on plasma biochemical indexes of fast-growing yellow-feathered broilers

表8 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡血浆中游离氨基酸含量的影响Table 8 Effects of low protein diet with amino acid balance pattern on free amino acid contents in plasma of fast-growing yellow-feathered broilers nmol/mL

3 讨 论

3.1 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡生产性能的影响

本试验中，所有组平均日增重与料重比均与对照组无显著差异，说明降低3%的粗蛋白质含量对于肉鸡的生产性能并无显著影响，说明饲养标准中的粗蛋白质水平对于本试验鸡群来说可能偏高。Kidd等［9］研究发现，肉雏鸡饲粮粗蛋白质水平降低1.46%均对肉鸡的增重和饲料转化率无显著影响，但是当苏氨酸的添加水平超过272 g/t之后，肉鸡生长性能受到影响。易良贵等［10］研究发现在三黄雏鸡的低蛋白质饲粮中添加0.2%～0.3%赖氨酸、0.3% ～0.4%蛋氨酸及 0.05% ～0.08%苏氨酸可以显著提高肉雏鸡日增重。Dean等［11］在对罗斯鸡低蛋白质饲粮的研究中发现，肉雏鸡饲粮粗蛋白质水平低于18%，添加合适的氨基酸比例不影响肉雏鸡生长性能，并得出甘氨酸+丝氨酸的适宜添加量为2.44%。但也有其他研究［12-13］认为肉仔鸡低蛋白质饲粮的生长性能显著低于标准饲粮。崔玉铭等［14］研究发现，爱拔益加(AA)肉仔鸡在平衡氨基酸需要基础上饲粮降低1.5%粗蛋白质水平时，肉仔鸡生长性能无显著变化，降低3%时，极显著降低肉仔鸡平均日增重和采食量，但料重比无显著变化。造成研究结果出现差异的原因可能与鸡的品种、日龄、饲粮类型及饲粮粗蛋白质水平有关。本试验中低蛋白质-赖氨酸组生产性能最好，说明常规饲料中赖氨酸含量过高或者是其他氨基酸的比例不够。低蛋白质-蛋氨酸组、低蛋白质-苏氨酸组生产性能较对照组与低蛋白质组均无显著差异，说明蛋氨酸、苏氨酸与赖氨酸的比例相对比较合适，而低蛋白质-苏氨酸组生产性能较对照组与低蛋白质组虽无显著差异，但是平均日增重降幅最大，说明苏氨酸与赖氨酸的比例应增加。低蛋白质-异亮氨酸组生产性能较对照组和低蛋白质组的平均日增重虽无显著差异，但是升幅大，说明异亮氨酸与赖氨酸的比例可以降低。以生产性能为指标，得出赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸∶色氨酸∶异亮氨酸适宜比例为 100∶44∶72∶(20～23)∶(54～72)。

3.2 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡氮利用率和氨基酸存留率的影响

本试验的结果显示，对照组的排泄物重量和氮排泄量均比其他组高，其中低蛋白质-赖氨酸组和低蛋白质-色氨酸组的氮存留率显著高于对照组，同时对照组氨基酸存留率大部分均低于其他组，其中低蛋白质-异亮氨酸组的氨基酸存留率最高。根据以上结果可以说明，对照组粗蛋白质含量已经过量，赖氨酸与蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、异亮氨酸之间的比例均可以降低，说明低蛋白质饲粮中添加适宜的氨基酸比例，可以显著提高饲粮中氮利用率，减少氮排放量。Hernandenz等［15］在低蛋白质饲粮对公母鸡氮排泄影响的研究中发现，降低饲粮粗蛋白质1.5%和3.0%，可以分别减少9.5%与 17.0%的公鸡氮排放，同时也减少11.8%和 14.6%的母鸡氮排放。游金明等［16］研究发现，降低饲粮中粗蛋白质水平可以显著降低1～21日龄AA肉鸡的氮排放量。李忠荣等［17］报道，降低1～15日龄北京鸭饲粮中粗蛋白质水平1%、2%，同时补充氨基酸，分别降低粪氮含量4.60%和15.71%。本试验中降低饲粮粗蛋白质含量3%，降低20%赖氨酸的氨基酸模式，可以显著降低粪氮排放，结果与上述报道相似。根据氮和氨基酸存留率结果，得出饲粮赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸∶色氨酸∶异亮氨酸适宜比例为 100∶44∶72∶18∶72。

3.3 低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对快大型黄羽肉鸡血浆生化指标及其中游离氨基酸含量的影响

血浆总蛋白含量主要反映体内蛋白质合成及代谢情况，血浆中尿酸和尿素氮含量反映动物体内蛋白质代谢和氨基酸之间的平衡状况。乔建国等［18］在仔猪低蛋白质饲粮中添加赖氨酸和蛋氨酸含量对血浆生化指标的影响的研究中发现，低蛋白质可以降低血浆中尿素氮和总蛋白的含量，但不显著。何欣等［19］、董志岩等［20］均研究认为，低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮可以降低生长猪血浆中白蛋白及尿素氮的含量。李忠荣等［21］在低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮对河田鸡血浆生化指标的影响的研究中发现，低蛋白质氨基酸平衡模式饲粮可以显著提高血浆中总蛋白的含量，显著降低血浆中尿素氮、尿酸的含量。本试验结果显示，各组之间血浆中游离氨基酸含量的比较结果并无明显规律性，低蛋白质-赖氨酸组与对照组血浆中总蛋白、白蛋白、尿素氮、尿酸含量均无显著差异，说明可以降低赖氨酸比例，或者可以提高其他氨基酸的比例。低蛋白质-蛋氨酸组血浆白蛋白和总蛋白含量均显著低于对照组和低蛋白质组，而血浆尿素氮含量显著高于对照组，说明蛋氨酸与赖氨酸比例降低影响机体蛋白质合成，造成氨基酸的浪费。低蛋白质-苏氨酸组血浆总蛋白、白蛋白含量无显著下降，尿素氮含量有显著提高，说明苏氨酸与赖氨酸比例可以再降低。低蛋白质-色氨酸组血浆总蛋白、白蛋白含量显著降低，而尿素氮含量显著增加，说明色氨酸与赖氨酸比例降低对机体蛋白质合成影响很大，应该提高色氨酸与赖氨酸的比例。低蛋白质-异亮氨酸组血浆总蛋白、白蛋白较对照组无显著降低，而尿素氮含量显著增加，说明异亮氨酸与赖氨酸比例可以再降低。根据血浆生化指标得出理赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸∶色氨酸∶异亮氨酸适宜比例为 100∶55∶(54～72)∶23 ∶(54～72)。

3.4 快大型黄羽肉鸡雏鸡IAAP讨论

近年来许多科研机构都已开展对IAAP的研究［5，22］。席鹏彬等［23］通过研究色氨酸水平对 1 ～21日龄黄羽肉鸡生长性能的影响发现，在粗蛋白质水平为21.3%的情况下，饲粮赖氨酸∶蛋氨酸∶色氨酸为100∶40∶17能够获得最大生产性能。张庆生等［24］在研究饲粮色氨酸水平对1～4周龄泰和乌骨鸡生产性能影响试验中发现，对于粗蛋白质水平为17.41%的低蛋白质饲粮，赖氨酸∶赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸∶色氨酸为 100∶37∶85∶18。石天虹等［25］研究认为1～28日龄丝毛乌骨鸡在粗蛋白质水平为19.07%时获得最佳生产性能和经济效益的赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸的比例为100∶36∶97。宁淑芳［26］研究认为，1～5周龄银香麻公鸡(饲粮粗蛋白质水平为20.82)综合生产性能、血浆生化指标得出最佳赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸∶异亮氨酸的比例为 100∶46∶74∶75。本研究综合生长性能、氮与氨基酸存留率及血浆生化指标得出饲粮最佳赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸∶色氨酸∶异亮氨酸的比例为100 ∶(44～55)∶72∶(18～23)∶(54～72)。

由本试验的结果可见，低蛋白质饲粮中搭配IAAP不但不会影响肉仔鸡的生产性能，还能减少氮排泄量和氨基酸存留率。然而不同鸡的品种其营养需求特征不同，导致研究结果也不一致，研究者们应该根据鸡品种特点、当地的饲养环境等因素进行具体比例的研究，更好地利用蛋白质原料，节约饲料资源、保护环境。

4 结论

综合生产性能、氮与氨基酸利用率及血浆生化指标得出，在本试验条件下1～21日龄快大型黄羽肉鸡饲粮赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸∶色氨酸∶异亮氨酸的适宜比例为 100∶(44～55)∶72∶23∶(54～72)。

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