金乌骨通胶囊HPLC指纹图谱研究
2014-12-10徐作刚段萍茅向军等
徐作刚+段萍+茅向军等
【摘要】目的：建立金乌骨通胶囊的高效液相色谱指纹图谱分析方法，为金乌骨通胶囊药品质量评价积累数据。方法：采用反相高效液相色谱方法，以安捷伦Eclipse plus C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈（A）-1%冰醋酸水溶液（B），梯度洗脱程序为：0～15min，9～10%A，流速1.0ml/min；15～65min，10～40%A，流速1.0ml/min；65～115min，40～70%A，流速1.5ml/min；115～125min，70%A，流速1.5ml/min；检测波长为0～60min为254nm，60～85min为380nm，85～125min为254nm；洗脱总时间为125min；柱温30℃；进样量20μl，进行指纹图谱研究。结果：建立金乌骨通胶囊高效液相指纹图谱，以淫羊藿苷色谱峰为参照峰，确定13个共有峰，共测定29批样品，样品指纹图谱的相似度均大于0.985。结论：本方法分离效果好，精密度、稳定性、重现性等指标均良好，可用于金乌骨通胶囊的产品质量控制及市场真伪品鉴别。
【关键词】金乌骨通胶囊；高效液相色谱；指纹图谱
【中图分类号】R284.1【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）22-0008-03
3讨论
3.1提取溶剂的选择比较不同浓度甲醇溶液（20、40、50、60、80、100%）共6种提取溶剂对样品的提取效率，结果显示，甲醇浓度较低时，脂溶性成份提取不佳，反之则水溶性成份提取不佳，且甲醇浓度较高时，色谱峰溶剂效应明显，流出时间较短的色谱峰前伸严重，对分离度影响较大，经比较，确定提取溶剂为50%甲醇，此条件下，色谱峰丰富，峰形及分离效果良好。
3.2流动相的选择比较了乙腈-水、乙腈-醋酸溶液、乙腈-磷酸溶液等多种不同组成、不同梯度溶剂系统。结果显示，按1.4项下洗脱溶剂系统实验得到的图谱峰形及分离度较好，故确定此梯度系统为流动相系统。
3.3检测波长的选择使用DAD检测器全波长扫描功能，在210～600nm波长范围内进行扫描，得到全光谱色谱图。根据3D谱图，确定检测波长为：0～60min，254nm；60～85min，380nm；85～125min，254nm。在此条件下，兼顾各峰强度，谱峰最为丰富。
3.4实验注意事项流出时间在75min附近的姜黄素类化合物具光敏性[3]，实验中发现其相对峰面积比值随时间呈缓慢下降趋势，因此实验过程应避光操作以控制其降解速率，获得可靠数据。
3.5实验结果连续4年共29批样品的指纹图谱相似度较高，稳定性、精密度和重现性好，指纹图谱具有一定特征性，可为金乌骨通胶囊的内在质量提供可靠的参考依据。
参考文献
[1]WS-10140（ZD-0140）-2002.国家药品标准（试行）颁布件[S].
[2]何佳，李懿，韦建荣.宫血宁胶囊HPLC指纹图谱研究[J].中成药，2011，33（7）：1098-1101.
[3]王雪梅，陈利华，施文婷.姜黄素类化合物的光稳定性研究[J].安徽大学学报（自然科学版），2012，36（3）：73-78.
（收稿日期：2014.09.16）
【摘要】目的：建立金乌骨通胶囊的高效液相色谱指纹图谱分析方法，为金乌骨通胶囊药品质量评价积累数据。方法：采用反相高效液相色谱方法，以安捷伦Eclipse plus C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈（A）-1%冰醋酸水溶液（B），梯度洗脱程序为：0～15min，9～10%A，流速1.0ml/min；15～65min，10～40%A，流速1.0ml/min；65～115min，40～70%A，流速1.5ml/min；115～125min，70%A，流速1.5ml/min；检测波长为0～60min为254nm，60～85min为380nm，85～125min为254nm；洗脱总时间为125min；柱温30℃；进样量20μl，进行指纹图谱研究。结果：建立金乌骨通胶囊高效液相指纹图谱，以淫羊藿苷色谱峰为参照峰，确定13个共有峰，共测定29批样品，样品指纹图谱的相似度均大于0.985。结论：本方法分离效果好，精密度、稳定性、重现性等指标均良好，可用于金乌骨通胶囊的产品质量控制及市场真伪品鉴别。
【关键词】金乌骨通胶囊；高效液相色谱；指纹图谱
【中图分类号】R284.1【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）22-0008-03
3讨论
3.1提取溶剂的选择比较不同浓度甲醇溶液（20、40、50、60、80、100%）共6种提取溶剂对样品的提取效率，结果显示，甲醇浓度较低时，脂溶性成份提取不佳，反之则水溶性成份提取不佳，且甲醇浓度较高时，色谱峰溶剂效应明显，流出时间较短的色谱峰前伸严重，对分离度影响较大，经比较，确定提取溶剂为50%甲醇，此条件下，色谱峰丰富，峰形及分离效果良好。
3.2流动相的选择比较了乙腈-水、乙腈-醋酸溶液、乙腈-磷酸溶液等多种不同组成、不同梯度溶剂系统。结果显示，按1.4项下洗脱溶剂系统实验得到的图谱峰形及分离度较好，故确定此梯度系统为流动相系统。
3.3检测波长的选择使用DAD检测器全波长扫描功能，在210～600nm波长范围内进行扫描，得到全光谱色谱图。根据3D谱图，确定检测波长为：0～60min，254nm；60～85min，380nm；85～125min，254nm。在此条件下，兼顾各峰强度，谱峰最为丰富。
3.4实验注意事项流出时间在75min附近的姜黄素类化合物具光敏性[3]，实验中发现其相对峰面积比值随时间呈缓慢下降趋势，因此实验过程应避光操作以控制其降解速率，获得可靠数据。
3.5实验结果连续4年共29批样品的指纹图谱相似度较高，稳定性、精密度和重现性好，指纹图谱具有一定特征性，可为金乌骨通胶囊的内在质量提供可靠的参考依据。
参考文献
[1]WS-10140（ZD-0140）-2002.国家药品标准（试行）颁布件[S].
[2]何佳，李懿，韦建荣.宫血宁胶囊HPLC指纹图谱研究[J].中成药，2011，33（7）：1098-1101.
[3]王雪梅，陈利华，施文婷.姜黄素类化合物的光稳定性研究[J].安徽大学学报（自然科学版），2012，36（3）：73-78.
（收稿日期：2014.09.16）
【摘要】目的：建立金乌骨通胶囊的高效液相色谱指纹图谱分析方法，为金乌骨通胶囊药品质量评价积累数据。方法：采用反相高效液相色谱方法，以安捷伦Eclipse plus C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈（A）-1%冰醋酸水溶液（B），梯度洗脱程序为：0～15min，9～10%A，流速1.0ml/min；15～65min，10～40%A，流速1.0ml/min；65～115min，40～70%A，流速1.5ml/min；115～125min，70%A，流速1.5ml/min；检测波长为0～60min为254nm，60～85min为380nm，85～125min为254nm；洗脱总时间为125min；柱温30℃；进样量20μl，进行指纹图谱研究。结果：建立金乌骨通胶囊高效液相指纹图谱，以淫羊藿苷色谱峰为参照峰，确定13个共有峰，共测定29批样品，样品指纹图谱的相似度均大于0.985。结论：本方法分离效果好，精密度、稳定性、重现性等指标均良好，可用于金乌骨通胶囊的产品质量控制及市场真伪品鉴别。
【关键词】金乌骨通胶囊；高效液相色谱；指纹图谱
【中图分类号】R284.1【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）22-0008-03
3讨论
3.1提取溶剂的选择比较不同浓度甲醇溶液（20、40、50、60、80、100%）共6种提取溶剂对样品的提取效率，结果显示，甲醇浓度较低时，脂溶性成份提取不佳，反之则水溶性成份提取不佳，且甲醇浓度较高时，色谱峰溶剂效应明显，流出时间较短的色谱峰前伸严重，对分离度影响较大，经比较，确定提取溶剂为50%甲醇，此条件下，色谱峰丰富，峰形及分离效果良好。
3.2流动相的选择比较了乙腈-水、乙腈-醋酸溶液、乙腈-磷酸溶液等多种不同组成、不同梯度溶剂系统。结果显示，按1.4项下洗脱溶剂系统实验得到的图谱峰形及分离度较好，故确定此梯度系统为流动相系统。
3.3检测波长的选择使用DAD检测器全波长扫描功能，在210～600nm波长范围内进行扫描，得到全光谱色谱图。根据3D谱图，确定检测波长为：0～60min，254nm；60～85min，380nm；85～125min，254nm。在此条件下，兼顾各峰强度，谱峰最为丰富。
3.4实验注意事项流出时间在75min附近的姜黄素类化合物具光敏性[3]，实验中发现其相对峰面积比值随时间呈缓慢下降趋势，因此实验过程应避光操作以控制其降解速率，获得可靠数据。
3.5实验结果连续4年共29批样品的指纹图谱相似度较高，稳定性、精密度和重现性好，指纹图谱具有一定特征性，可为金乌骨通胶囊的内在质量提供可靠的参考依据。
参考文献
[1]WS-10140（ZD-0140）-2002.国家药品标准（试行）颁布件[S].
[2]何佳，李懿，韦建荣.宫血宁胶囊HPLC指纹图谱研究[J].中成药，2011，33（7）：1098-1101.
[3]王雪梅，陈利华，施文婷.姜黄素类化合物的光稳定性研究[J].安徽大学学报（自然科学版），2012，36（3）：73-78.
（收稿日期：2014.09.16）
