维生素1对羊肚菌菌丝体生长的影响

贺晓龙等

摘要：维生素B1是影响羊肚菌菌丝体生长的环境因素之一，基础培养基中加入适量的维生素B1可促进菌丝体的生长。试验研究M延-5、M延-12、M川美 3种羊肚菌菌丝体生长所需的最适维生素B1浓度范围，结果表明，M延-5、M延-12、M川美菌丝体生长最适维生素B1浓度分别为25～30、15、15 mg/L。

关键词：维生素B1；羊肚菌；菌丝体；生长；方差分析

中图分类号： S646.701文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）10-0230-02

收稿日期：2013-12-18

基金项目：陕西省高水平大学建设专项资金 （编号：2012SXTS06）；陕西科技厅农业攻关（编号：2011K02-11）；陕西省延安市科技项目（编号：2012ks-13）。

作者简介：贺晓龙（1982—），男，陕西临潼人，实验师，从事生物技术与食用菌研究。E-mail：ydhelong@163.com。

通信作者：任桂梅（1955—），女，陕西清涧人，教授，从事应用微生物及食用菌研究。E-mail：ydrgm@163.com。羊肚菌（Morchella esculenta）属子囊菌亚门盘菌纲盘菌类，生于阔叶林地上，菌盖圆锥形，高4～7 cm，表面呈羊肚状，味美，营养价值高。羊肚菌是一种珍稀的野生食用、药用真菌，蛋白质含量极为丰富，必需氨基酸齐全，还含有游离的稀有氨基酸如顺-3-氨基-L-脯氨酸和2，4-二氨基异丁酸等，风味奇鲜、香味独特[1-3]，羊肚菌还含有多种维生素和铁、锌等矿质元素。羊肚菌作为一种调味品，在国外已采用深层培养法规模化生产，但至今羊肚菌子实体仍然不能进行产业化人工栽培。

羊肚菌菌丝体含有子实体固有的营养素和生理活性组分，能较好地保持子实体的独特风味[4]，研究羊肚菌菌丝的生长可以促进营养价值和药用价值的开发利用。维生素B1是影响羊肚菌M延-5、M延-12、M川美菌丝体生长的环境因素之一，而关于维生素B1对羊肚菌菌丝体生长的影响至今尚未见报道。本试验研究M延-5、M延-12、M川美 3种羊肚菌菌丝体在不同维生素B1浓度混合培养基中的生长状况，得到适合这3种羊肚菌菌丝体生长各自最佳的维生素B1浓度。

1材料与方法

1.1材料

菌株M延-5、M延-12，从陕北南泥湾野生羊肚菌菌盖分离筛选而得[5]；菌株M川美引自四川绵阳食用菌研究所。维生素B1片、食用菌制种与培养常用药品、设备等来自市购。

1.2方法

在葡萄糖硝酸钾基础培养基（葡萄糖20 g、硝酸钾2 g、硫酸镁0.5 g、磷酸二氢钾0.5 g、氯化钠0.5 g、琼脂20 g，蒸馏水1000 mL）中，分别加入不同量的维生素B1溶液，配制成含维生素B1为0、10、20、30、40、50 mg/L的培养基各100 mL，分装于10支试管，供试3种菌株各做1组，重复3次，进行菌株培养基初筛；根据初筛试验结果，菌株M延-5使用含维生素B1浓度为0、20、25、30、35、40 mg/L的培养基进行培养试验，菌株M延-12使用含维生素B1浓度为0、10、15、20、25、30 mg/L的培养基进行培养试验，菌株M川美使用含维生素B1浓度为0、5、10、15、20 mg/L的培养基进行培养试验，每个处理各 100 mL，分装于10支试管。所有培养基均121 ℃灭菌 30 min，冷却后取出，摆斜面备用[6]。

超净工作台无菌条件下进行接种，每支试管接1个菌种，尽可能将菌种放在试管斜面近上端同一位置处，接种完毕进行标记；将接种好的试管斜面放入恒温培养箱中24 ℃培养[7]，24 h后随机抽取5支试管测量1次菌丝体的长度，观察长势并记录。每个处理重复3次。采用SSR法进行差异性分析[8]。

2结果与分析

2.1不同浓度维生素B1培养基筛选试验

由表1可见，维生素B1浓度为30 mg/L时，菌株M延-5菌丝体生长速度极显著快于0、10、50 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体，显著快于40 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体，与20 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体之间没有显著性差异，菌株M延-5培养较适宜的维生素B1浓度为20～30 mg/L；维生素B1浓度为20 mg/L时，菌株M延-12菌丝体生长最快，极显著快于其他各浓度，M延-12菌丝体生长较适宜的维生素B1浓度为20 mg/L左右；维生素B1浓度为10 mg/L时，菌株M川美菌丝体生长最快，除与20 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体相比差异不显著外，与其他浓度相比存在极显著差异，M川美菌丝体生长较适宜的维生素B1浓度为10～20 mg/L。

3结论

在基础培养基中加入适量的维生素B1，可促进羊肚菌菌丝体的生长，而不同种类的羊肚菌，其最适的维生素B1浓度范围不尽相同。试验结果显示，菌株M延-5最适维生素B1浓度为25～30 mg/L，菌株M延-12和菌株M川美最适维生素B1浓度均为15 mg/L，这可能是由于菌种本身性质不同所致。

在试验过程中，为使结果更加精确，需将维生素B1片配制成溶液，并用移液管移加。接种后的试管斜面需在接种处贴一细小标签，每次测量以此为起点确保测量的准确性。

参考文献：

[1]任爱梅，李建宏，谢放，等. 不同培养基对羊肚菌菌丝生长及菌核形成的影响[J]. 江苏农业科学，2013，41（11）：270-272.

[2]秦俊哲，吕嘉枥. 食用菌栽培学[M]. 杨凌：西北农林科技大学出版社，2002：17.

[3]刘文丛，刘颖，郭相，等. 滇西北地区羊肚菌的分子鉴定及ITS序列分析[J]. 江苏农业科学，2012，40（3）：31-34.

[4]陈芳草，刘兴蓉，谭方河，等. 尖顶羊肚菌生物培养学特性研究[J]. 西南农业学报，2004，17（4）：508-514.

[5]任桂梅，高小朋，陈国梁. 陕北野生羊肚菌母种分离研究初报[J]. 延安大学学报：自然科学版，2002，21（3）：65-67.

[6]赵春燕，孙军德，李敏，等. 培养条件对羊肚菌菌丝生长的影响[J]. 中国食用菌，2005，24（1）：15-17.

[7]孟丽，许桂芳，段利娟. 硫酸亚铁对食用菌菌丝体生长发育的影响[J]. 中国食用菌，2004，23（3）：45-47.

[8]杜荣骞. 生物统计学[M]. 北京：高等教育出版社，2001：113-114.

摘要：维生素B1是影响羊肚菌菌丝体生长的环境因素之一，基础培养基中加入适量的维生素B1可促进菌丝体的生长。试验研究M延-5、M延-12、M川美 3种羊肚菌菌丝体生长所需的最适维生素B1浓度范围，结果表明，M延-5、M延-12、M川美菌丝体生长最适维生素B1浓度分别为25～30、15、15 mg/L。

关键词：维生素B1；羊肚菌；菌丝体；生长；方差分析

中图分类号： S646.701文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）10-0230-02

收稿日期：2013-12-18

基金项目：陕西省高水平大学建设专项资金 （编号：2012SXTS06）；陕西科技厅农业攻关（编号：2011K02-11）；陕西省延安市科技项目（编号：2012ks-13）。

作者简介：贺晓龙（1982—），男，陕西临潼人，实验师，从事生物技术与食用菌研究。E-mail：ydhelong@163.com。

通信作者：任桂梅（1955—），女，陕西清涧人，教授，从事应用微生物及食用菌研究。E-mail：ydrgm@163.com。羊肚菌（Morchella esculenta）属子囊菌亚门盘菌纲盘菌类，生于阔叶林地上，菌盖圆锥形，高4～7 cm，表面呈羊肚状，味美，营养价值高。羊肚菌是一种珍稀的野生食用、药用真菌，蛋白质含量极为丰富，必需氨基酸齐全，还含有游离的稀有氨基酸如顺-3-氨基-L-脯氨酸和2，4-二氨基异丁酸等，风味奇鲜、香味独特[1-3]，羊肚菌还含有多种维生素和铁、锌等矿质元素。羊肚菌作为一种调味品，在国外已采用深层培养法规模化生产，但至今羊肚菌子实体仍然不能进行产业化人工栽培。

羊肚菌菌丝体含有子实体固有的营养素和生理活性组分，能较好地保持子实体的独特风味[4]，研究羊肚菌菌丝的生长可以促进营养价值和药用价值的开发利用。维生素B1是影响羊肚菌M延-5、M延-12、M川美菌丝体生长的环境因素之一，而关于维生素B1对羊肚菌菌丝体生长的影响至今尚未见报道。本试验研究M延-5、M延-12、M川美 3种羊肚菌菌丝体在不同维生素B1浓度混合培养基中的生长状况，得到适合这3种羊肚菌菌丝体生长各自最佳的维生素B1浓度。

1材料与方法

1.1材料

菌株M延-5、M延-12，从陕北南泥湾野生羊肚菌菌盖分离筛选而得[5]；菌株M川美引自四川绵阳食用菌研究所。维生素B1片、食用菌制种与培养常用药品、设备等来自市购。

1.2方法

在葡萄糖硝酸钾基础培养基（葡萄糖20 g、硝酸钾2 g、硫酸镁0.5 g、磷酸二氢钾0.5 g、氯化钠0.5 g、琼脂20 g，蒸馏水1000 mL）中，分别加入不同量的维生素B1溶液，配制成含维生素B1为0、10、20、30、40、50 mg/L的培养基各100 mL，分装于10支试管，供试3种菌株各做1组，重复3次，进行菌株培养基初筛；根据初筛试验结果，菌株M延-5使用含维生素B1浓度为0、20、25、30、35、40 mg/L的培养基进行培养试验，菌株M延-12使用含维生素B1浓度为0、10、15、20、25、30 mg/L的培养基进行培养试验，菌株M川美使用含维生素B1浓度为0、5、10、15、20 mg/L的培养基进行培养试验，每个处理各 100 mL，分装于10支试管。所有培养基均121 ℃灭菌 30 min，冷却后取出，摆斜面备用[6]。

超净工作台无菌条件下进行接种，每支试管接1个菌种，尽可能将菌种放在试管斜面近上端同一位置处，接种完毕进行标记；将接种好的试管斜面放入恒温培养箱中24 ℃培养[7]，24 h后随机抽取5支试管测量1次菌丝体的长度，观察长势并记录。每个处理重复3次。采用SSR法进行差异性分析[8]。

2结果与分析

2.1不同浓度维生素B1培养基筛选试验

由表1可见，维生素B1浓度为30 mg/L时，菌株M延-5菌丝体生长速度极显著快于0、10、50 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体，显著快于40 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体，与20 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体之间没有显著性差异，菌株M延-5培养较适宜的维生素B1浓度为20～30 mg/L；维生素B1浓度为20 mg/L时，菌株M延-12菌丝体生长最快，极显著快于其他各浓度，M延-12菌丝体生长较适宜的维生素B1浓度为20 mg/L左右；维生素B1浓度为10 mg/L时，菌株M川美菌丝体生长最快，除与20 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体相比差异不显著外，与其他浓度相比存在极显著差异，M川美菌丝体生长较适宜的维生素B1浓度为10～20 mg/L。

3结论

在基础培养基中加入适量的维生素B1，可促进羊肚菌菌丝体的生长，而不同种类的羊肚菌，其最适的维生素B1浓度范围不尽相同。试验结果显示，菌株M延-5最适维生素B1浓度为25～30 mg/L，菌株M延-12和菌株M川美最适维生素B1浓度均为15 mg/L，这可能是由于菌种本身性质不同所致。

在试验过程中，为使结果更加精确，需将维生素B1片配制成溶液，并用移液管移加。接种后的试管斜面需在接种处贴一细小标签，每次测量以此为起点确保测量的准确性。

参考文献：

[1]任爱梅，李建宏，谢放，等. 不同培养基对羊肚菌菌丝生长及菌核形成的影响[J]. 江苏农业科学，2013，41（11）：270-272.

[2]秦俊哲，吕嘉枥. 食用菌栽培学[M]. 杨凌：西北农林科技大学出版社，2002：17.

[3]刘文丛，刘颖，郭相，等. 滇西北地区羊肚菌的分子鉴定及ITS序列分析[J]. 江苏农业科学，2012，40（3）：31-34.

[4]陈芳草，刘兴蓉，谭方河，等. 尖顶羊肚菌生物培养学特性研究[J]. 西南农业学报，2004，17（4）：508-514.

[5]任桂梅，高小朋，陈国梁. 陕北野生羊肚菌母种分离研究初报[J]. 延安大学学报：自然科学版，2002，21（3）：65-67.

[6]赵春燕，孙军德，李敏，等. 培养条件对羊肚菌菌丝生长的影响[J]. 中国食用菌，2005，24（1）：15-17.

[7]孟丽，许桂芳，段利娟. 硫酸亚铁对食用菌菌丝体生长发育的影响[J]. 中国食用菌，2004，23（3）：45-47.

[8]杜荣骞. 生物统计学[M]. 北京：高等教育出版社，2001：113-114.

摘要：维生素B1是影响羊肚菌菌丝体生长的环境因素之一，基础培养基中加入适量的维生素B1可促进菌丝体的生长。试验研究M延-5、M延-12、M川美 3种羊肚菌菌丝体生长所需的最适维生素B1浓度范围，结果表明，M延-5、M延-12、M川美菌丝体生长最适维生素B1浓度分别为25～30、15、15 mg/L。

关键词：维生素B1；羊肚菌；菌丝体；生长；方差分析

中图分类号： S646.701文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）10-0230-02

收稿日期：2013-12-18

基金项目：陕西省高水平大学建设专项资金 （编号：2012SXTS06）；陕西科技厅农业攻关（编号：2011K02-11）；陕西省延安市科技项目（编号：2012ks-13）。

作者简介：贺晓龙（1982—），男，陕西临潼人，实验师，从事生物技术与食用菌研究。E-mail：ydhelong@163.com。

通信作者：任桂梅（1955—），女，陕西清涧人，教授，从事应用微生物及食用菌研究。E-mail：ydrgm@163.com。羊肚菌（Morchella esculenta）属子囊菌亚门盘菌纲盘菌类，生于阔叶林地上，菌盖圆锥形，高4～7 cm，表面呈羊肚状，味美，营养价值高。羊肚菌是一种珍稀的野生食用、药用真菌，蛋白质含量极为丰富，必需氨基酸齐全，还含有游离的稀有氨基酸如顺-3-氨基-L-脯氨酸和2，4-二氨基异丁酸等，风味奇鲜、香味独特[1-3]，羊肚菌还含有多种维生素和铁、锌等矿质元素。羊肚菌作为一种调味品，在国外已采用深层培养法规模化生产，但至今羊肚菌子实体仍然不能进行产业化人工栽培。

羊肚菌菌丝体含有子实体固有的营养素和生理活性组分，能较好地保持子实体的独特风味[4]，研究羊肚菌菌丝的生长可以促进营养价值和药用价值的开发利用。维生素B1是影响羊肚菌M延-5、M延-12、M川美菌丝体生长的环境因素之一，而关于维生素B1对羊肚菌菌丝体生长的影响至今尚未见报道。本试验研究M延-5、M延-12、M川美 3种羊肚菌菌丝体在不同维生素B1浓度混合培养基中的生长状况，得到适合这3种羊肚菌菌丝体生长各自最佳的维生素B1浓度。

1材料与方法

1.1材料

菌株M延-5、M延-12，从陕北南泥湾野生羊肚菌菌盖分离筛选而得[5]；菌株M川美引自四川绵阳食用菌研究所。维生素B1片、食用菌制种与培养常用药品、设备等来自市购。

1.2方法

在葡萄糖硝酸钾基础培养基（葡萄糖20 g、硝酸钾2 g、硫酸镁0.5 g、磷酸二氢钾0.5 g、氯化钠0.5 g、琼脂20 g，蒸馏水1000 mL）中，分别加入不同量的维生素B1溶液，配制成含维生素B1为0、10、20、30、40、50 mg/L的培养基各100 mL，分装于10支试管，供试3种菌株各做1组，重复3次，进行菌株培养基初筛；根据初筛试验结果，菌株M延-5使用含维生素B1浓度为0、20、25、30、35、40 mg/L的培养基进行培养试验，菌株M延-12使用含维生素B1浓度为0、10、15、20、25、30 mg/L的培养基进行培养试验，菌株M川美使用含维生素B1浓度为0、5、10、15、20 mg/L的培养基进行培养试验，每个处理各 100 mL，分装于10支试管。所有培养基均121 ℃灭菌 30 min，冷却后取出，摆斜面备用[6]。

超净工作台无菌条件下进行接种，每支试管接1个菌种，尽可能将菌种放在试管斜面近上端同一位置处，接种完毕进行标记；将接种好的试管斜面放入恒温培养箱中24 ℃培养[7]，24 h后随机抽取5支试管测量1次菌丝体的长度，观察长势并记录。每个处理重复3次。采用SSR法进行差异性分析[8]。

2结果与分析

2.1不同浓度维生素B1培养基筛选试验

由表1可见，维生素B1浓度为30 mg/L时，菌株M延-5菌丝体生长速度极显著快于0、10、50 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体，显著快于40 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体，与20 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体之间没有显著性差异，菌株M延-5培养较适宜的维生素B1浓度为20～30 mg/L；维生素B1浓度为20 mg/L时，菌株M延-12菌丝体生长最快，极显著快于其他各浓度，M延-12菌丝体生长较适宜的维生素B1浓度为20 mg/L左右；维生素B1浓度为10 mg/L时，菌株M川美菌丝体生长最快，除与20 mg/L维生素B1培养基培养的菌丝体相比差异不显著外，与其他浓度相比存在极显著差异，M川美菌丝体生长较适宜的维生素B1浓度为10～20 mg/L。

3结论

在基础培养基中加入适量的维生素B1，可促进羊肚菌菌丝体的生长，而不同种类的羊肚菌，其最适的维生素B1浓度范围不尽相同。试验结果显示，菌株M延-5最适维生素B1浓度为25～30 mg/L，菌株M延-12和菌株M川美最适维生素B1浓度均为15 mg/L，这可能是由于菌种本身性质不同所致。

在试验过程中，为使结果更加精确，需将维生素B1片配制成溶液，并用移液管移加。接种后的试管斜面需在接种处贴一细小标签，每次测量以此为起点确保测量的准确性。

参考文献：

[1]任爱梅，李建宏，谢放，等. 不同培养基对羊肚菌菌丝生长及菌核形成的影响[J]. 江苏农业科学，2013，41（11）：270-272.

[2]秦俊哲，吕嘉枥. 食用菌栽培学[M]. 杨凌：西北农林科技大学出版社，2002：17.

[3]刘文丛，刘颖，郭相，等. 滇西北地区羊肚菌的分子鉴定及ITS序列分析[J]. 江苏农业科学，2012，40（3）：31-34.

[4]陈芳草，刘兴蓉，谭方河，等. 尖顶羊肚菌生物培养学特性研究[J]. 西南农业学报，2004，17（4）：508-514.

[5]任桂梅，高小朋，陈国梁. 陕北野生羊肚菌母种分离研究初报[J]. 延安大学学报：自然科学版，2002，21（3）：65-67.

[6]赵春燕，孙军德，李敏，等. 培养条件对羊肚菌菌丝生长的影响[J]. 中国食用菌，2005，24（1）：15-17.

[7]孟丽，许桂芳，段利娟. 硫酸亚铁对食用菌菌丝体生长发育的影响[J]. 中国食用菌，2004，23（3）：45-47.

[8]杜荣骞. 生物统计学[M]. 北京：高等教育出版社，2001：113-114.